鸡的塞尔托利氏细胞样颗粒膜细胞瘤

日本学者发现90日龄雌性肉鸡,卵巢部位有一灰黄色肿瘤,表面有点状出血,切面无结构,质地 柔软,卵巢未发育,输卵管发育良好。病理组织学检查,肿瘤组织呈蜂窝状结构和睾丸样结构(类似塞尔托利氏细胞),瘤细胞呈圆柱形或纺锤形,有伊红着染的大的细胞质,核呈圆形或椭圆形,散见核分裂像。睾丸样的构造和蜂窝状结构部的肿瘤细胞PAS染色为阴性,渡银染色可见嗜银纤维增生,嗜银纤维包围一个或数个肿瘤细胞。瘤组织附近可见正常卵巢组织和卵泡。

睾丸支持细胞的研究现状及应用前景

目的:综合分析睾丸支持细胞的研究动态及意义。资料来源:应用计算机检索Pubmed1995-01/2006-02有关睾丸支持细胞研究的文章,检索词为"sertolicell,application,transplantation"等,限定语言种类为英文。同时检索中国期刊网全文数据库1995-01/2006-02有关睾丸支持细胞研究的文章,检索词为"睾丸支持细胞,应用,移植",并限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选择与睾丸支持细胞研究进展及应用前景相关的文章,筛选与以上要求无明显关系的文章以及重复性研究。同一领域的文献则选择近5年来在权威刊物上发表的文章。资料提炼:共收集到57篇文献,其中32篇符合要求。排除25篇,为重复性文章。资料综合:由于睾丸支持细胞具有分泌多种营养因子和免疫豁免功能,睾丸支持细胞已成为细胞培养技术、组织工程及器官移植领域的研究热点之一,在临床移植领域中有良好的应用前景。结论:睾丸支持细胞为器官移植、帕金森病及糖尿病等疾病的治疗提供了新的治疗途径,虽然还有许多问题尚需解决,但对睾丸支持细胞的研究已经取得了一系列可喜的成果,在临床应用中具有良好的应用前景,也将会给人类临床事业的发展作出巨大贡献。

睾丸支持细胞对异基因T淋巴细胞的毒性作用

目的:分析睾丸支持细胞(塞尔托利氏细胞)对异基因T淋巴的细胞毒性作用。方法:实验于2006-01/07在解放军广州军区武汉总医院实验科完成。睾丸支持细胞取材于二三周龄SPF级Wistar雄性大鼠,由湖北省实验动物中心提供(许可证号:SCXK(鄂)-2003-005)。T淋巴细胞取材于体质量为200-250g的SPF级SD雄性大鼠脾脏,由湖北省实验动物中心提供(许可证号:SCXK(鄂)-2003-005)。将Wistar大鼠睾丸支持细胞与异基因SD大鼠T淋巴细胞共同培养。按睾丸支持细胞含量将实验分6组:对照组(0个睾丸支持细胞+DMEM/F12培养基100μL)、睾丸支持细胞1×103组(100μL)、睾丸支持细胞1×104组(100μL)、睾丸支持细胞1×105组(100μL)、睾丸支持细胞1×106组(100μL)及FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组(经0.2μg抗FasL单克隆抗体封闭过的睾丸支持细胞1×106,100μL),每组均加1×105T淋巴细胞,6复孔培养48h,应用噻唑蓝比色法测定睾丸支持细胞对T淋巴细胞的毒性作用,用酶标仪于570nm处测各孔吸光度(A值),细胞毒性百分比(%)=(对照组A值-试验孔A值)/对照组A值×100%。结果:睾丸支持细胞1×103组、睾丸支持细胞1×104组、睾丸支持细胞1×105组及睾丸支持细胞1×106组对T淋巴细胞的细胞毒性百分比显著高于对照组、FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组(8.75%,20.37%,65.07%,62.96%;0,3.85%,P<0.01);睾丸支持细胞1×103组-睾丸支持细胞1×105组随睾丸支持细胞数量增加,对T淋巴细胞的毒性作用也明显增加,当睾丸支持细胞数增加至1×105,杀伤作用的增加不再显著。FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论:睾丸支持细胞对异基因T淋巴细胞有明显毒性作用,随着睾丸支持细胞增加,对异基因T淋巴细胞的抑制和杀伤作用也越大;但是当睾丸支持细胞达到一定数量后,其毒性作用不再增加;这种作用也可以被抗FasL单克隆抗体阻断。表明睾丸支持细胞FasL的表达是发挥免疫豁免作用的主要作用途径。

人类精液中一氧化氮和转铁蛋白含量的关系

目的 :探讨一氧化氮 (NO)与人精液转铁蛋白 (Tf)含量及精子质量的关系 .方法 :参照WHO标准 ,进行精液常规分析 .无菌取大鼠睾丸 ,经胶原酶和透明质酸酶消化 ,分离出纯度较高的支持细胞 ,用Ham sF 1 2培养液培养 .实验组加入NO供体硝普钠 (SNP) ,同对照组一起培养 4 8h取上清液 ,采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐 (NO-3 ) .用免疫散射比浊法检测Tf含量 .结果 :1 30例不育者精液Tf含量、精子密度和活动率随NO含量升高而降低 ,呈显著的负相关 (P <0 .0 1 ) ,大鼠睾丸支持细胞悬液Tf含量正常生育组[(2 2± 9) μmol/L]显著高于不育组 [(1 3± 8) μmol/L ,P <0 .0 1 ].结论 :精液Tf含量测定有助于评价精子质量 ,可作为反映支持细胞功能的特异指标 ,NO对精子运动能力及支持细胞产生和分泌Tf有抑制作用 ,这对研究不育症的机制有重要价值 .

睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂对异体移植肾细胞的保护作用

目的 研究表达Fas配体 (FasL)的睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂细胞毒性T细胞相关抗原 4免疫球蛋白 (CTLA 4Ig)对异体移植肾细胞的保护作用 ,以提高移植肾的免疫耐受性。方法 酶消化法制备睾丸支持细胞及肾细胞。取 10 6个细胞混合移植于大鼠肾包膜下 ,实验大鼠分为 3组 :对照组 (10只 )、混合细胞移植组 (混合移植组 ,16只 )、联合CTLA 4Ig组 (CTLA组 ,10只 )。分别于术后 1、7、14、2 0d检测血清白细胞介素 2 (IL 2 )水平变化。术后 2 0d取出移植物 ,以亲和素 生物素 过氧化物酶复合物技术观察肾细胞存活状况 ;MD 2 0图像分析系统测定混合移植物灰度值 ;末端脱氧核糖核酸转移酶介导的X dUTP缺口末端标记 (TUNEL)法观察移植物中凋亡的细胞。 结果对照组无移植物存活 ;混合移植组 14只移植物存活 ,灰度值为 0 36 2± 0 0 17;CTLA组 10只移植物均存活 ,灰度值为 0 4 4 5± 0 0 2 1;混合移植组与CTLA组间灰度值差异有显著意义。术后CTLA组血清IL 2水平较混合移植组低 ,差异有显著意义 ;混合移植物中可见凋亡的淋巴细胞。 结论 异体肾细胞移植中 ,睾丸支持细胞与CTLA 4Ig对移植肾细胞具有协同保护作用。

共培养大鼠睾丸体细胞组织工程技术构建雄激素分泌组织

目的探讨应用组织工程技术体内外构建具有一定形态和睾酮分泌功能组织的可行性。方法雄性 Wister 大鼠,无菌切取双侧睾丸,制备去势及移植鼠动物模型。睾丸去包膜,剪碎,胶原酶消化,经差速贴壁或直接混合共培养方法,分别获取睾丸间质细胞(Leydig 细胞)和共培养的睾丸多种体细胞,两类细胞分别与可降解生物材料聚羟基乙酸(PGA)纤维复合并进行体外培养,光、电镜观察体外组织形成过程,定期检测培养液内睾酮分泌水平。取体外培养7 d 细胞-材料复合物,分别移植于去势鼠睾丸鞘膜腔或大网膜内(n=6),不同时间点取材,通过大体观察、组织学染色和免疫细胞化学方法,检测移植鼠体内雄激素分泌组织的形成过程及血睾酮水平。结果两类细胞均与PGA 具有良好的亲和性,体外可形成具有一定睾酮分泌功能的细胞一材料复合物,体内移植2个月后,两类细胞-材料复合物在大网膜和睾丸鞘膜内均可形成具有一定形态的雄激素分泌组织,再生组织具有良好的血管化。血睾酮检测及统计分析结果表明,移植6周后,单纯 Leydig 细胞组血睾酮水平为(0.60±0.04)μg/L,共培养细胞组血睾酮水平为(0.85±0.03)μg/L,均明显高于单纯去势鼠血睾酮水平(0.56±0.05)μg/L(P<0.01),两组移植鼠相比,共培养细胞移植组血睾酮水平明显高于单纯Leydig 细胞移植组(P<0.01)。结论以共培养睾丸体细胞作为种子细胞在体内外构建雄激素分泌组织具有可行性,共培养睾丸内体细胞是雄激素分泌组织构建的良好种子细胞。