基于“填精补髓、清脑通络法”探讨血管性认知障碍中医证治规律

血管性认知障碍(VCI)是脑血管病变及其危险因素导致的血管性损伤,涉及至少1个认知域受损的临床综合征,涵盖从轻度认知障碍到痴呆、合并阿尔兹海默病等混合性病理所致的不同程度认知障碍。从中医“整体观念”出发,肝风内动是VCI的始动因素,肾虚髓减,痰瘀阻滞脑络是VCI的关键环节,根据“治病求本、杂合以治”的原则,治疗上应“间者并行,甚者独行”,须“标本兼顾,通补兼施”,临床运用填精补髓、清脑通络之法,以补肾填髓方药坚固脑之脉络,在痰瘀等病理产物尚未戕害清窍之时,阻断其阻滞脑脉或侵入脑内,基于以上理念探讨VCI中医证治规律,以飨同道。

破血化瘀、填精补髓方对脑出血模型小鼠脑组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响

目的:探讨破血化瘀、填精补髓方治疗脑出血的相关作用机制。方法:野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠各90只,采用小鼠尾动脉取血向脑内灌注的方法建立脑出血小鼠模型,造模成功后120只小鼠随机分为野生型模型组、野生型方剂组、Nrf2基因敲除模型组、Nrf2基因敲除方剂组,每组30只。另分别取30只野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠脑内只插入微量注射针数分钟不注血作为野生型假手术组和Nrf2基因敲除假手术组。造模后对野生型方剂组及Nrf2基因敲除方剂组给予破血化瘀、填精补髓方10.41 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,模型组及假手术组给予等量生理盐水。给药1 d、3 d后检测小鼠的行为学变化及脑含水量变化,3 d后HE染色观察脑组织病理形态学改变,用Western Blot以及免疫组化检测脑组织TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白水平。结果:与野生型假手术组相比,野生型模型组小鼠的神经功能评分、脑含水量、HE染色病理细胞数、免疫组化阳性细胞数以及TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)。与野生型模型组比较,野生型方剂组小鼠上述各指标均明显改善(P<0.05)。相对于野生型模型组小鼠,Nrf2基因敲除型模型组小鼠上述各指标均有明显改善(P<0.05)。结论:破血化瘀、填精补髓方可以通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制氧化反应及炎症反应,从而抑制脑出血后的神经细胞功能损伤,减少继发性脑损伤。

填精补髓中药汤剂对脑出血模型小鼠Keap1-Nrf2-ARE信号通路的影响

目的探讨填精补髓中药汤剂对脑出血模型小鼠Keap1-Nrf2-ARE信号通路的影响。方法将48只Wistar雄性小鼠分为假手术组、模型组(均予等体积生理盐水灌胃),阳性药组(每100 g体质量灌胃脑血康30 mg)、中药汤剂组(每100 g体质量灌胃填精补髓中药2 mL),各12只。采用Rynkowski法建立脑出血小鼠模型,各组均于麻醉清醒后给药,每天1次,比较各组小鼠的神经功能(Longa)评分、脑含水量、血肿周围脑组织病理变化情况。应用Western blot法检测Nrf2信号通路相关蛋白(Nrf2,Keap1,HO-1)的表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Nrf2,Keap1,HO-1 mRNA的表达水平。结果术后1,3 d,模型组小鼠的Longa评分、脑含水量均较假手术组高,阳性药组、中药汤剂组小鼠的Longa评分、脑含水量均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组小鼠的血肿区被大量红细胞浸润,伴随神经细胞数量减少,存在明显的间质水肿,神经细胞排列稀疏,中药汤剂组、阳性药组小鼠的红细胞浸润程度、间质水肿程度均轻于模型组;中药汤剂组、阳性药组小鼠术后3 d的脑组织Nrf2,Keap1,HO-1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于模型组(P<0.05)。结论填精补髓中药汤剂可通过激活Keap1-Nrf2-ARE信号通路而发挥抗氧化作用,改善脑出血模型小鼠的神经功能障碍及脑水肿,预防脑出血后继发损伤。

破血化瘀,填精补髓法对实验性脑出血大鼠血肿周围组织脑源性神经生长因子及TrkB蛋白表达的影响

目的探讨破血化瘀,填精补髓法对脑出血大鼠血肿周围组织脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体表达的影响。方法应用Wistar大鼠复制脑出血大鼠模型,观察破血化瘀,填精补髓法方剂改善脑出血大鼠神经功能缺损的情况及对血肿周围组织BDNF及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)蛋白表达水平的影响。结果在给药第7天,与模型组比较,阳性药组、受试药各剂量组均明显增加了损伤脑区BDNF阳性细胞数量(P<0.001,P<0.01,P<0.05);在给药第3、7、14天,与模型组比较,受试药高剂量和中剂量均明显增加了损伤脑区TrkB阳性细胞数量(P<0.05或P<0.01)。结论破血化瘀,填精补髓法方剂能明显改善脑出血大鼠神经功能缺损;其作用机制可能与上调脑出血血肿周围损伤组织中BDNF及受体TrkB蛋白表达有关。

破血化瘀、填精补髓法对脑出血大鼠血肿周围组织神经生长因子表达的影响

目的探讨破血化瘀、填精补髓法对脑出血大鼠血肿周围组织NGF表达的影响。方法选用Wistar大鼠复制脑出血大鼠模型,观察破血化瘀、填精补髓法方剂改善脑出血大鼠神经功能缺损的作用,及血肿周围组织NGF蛋白表达情况。结果在给药第1、3、7天,与模型组比较,阳性药对照组及受试药各剂量组对损伤时脑区NGF阳性细胞数量没有明显的影响(P>0.05)。在给药第14天,与模型组比较,阳性药对照组、受试药高剂量和中剂量明显增加了损伤脑区NGF阳性细胞数量(P<0.01)。结论破血化瘀、填精补髓法方剂能明显改善脑出血大鼠神经功能缺损;其作用机制可能与上调脑出血血肿周围损伤组织中NGF蛋白表达有关。

破血化瘀填精补髓方剂对脑出血大鼠模型神经营养因子BDNF表达的影响

目的观察破血化瘀填精补髓方剂对脑出血大鼠脑出血后不同时间点脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响。方法选用Wistar大鼠复制脑出血大鼠模型,观察不同剂量破血化瘀填精补髓方剂改善脑出血大鼠神经功能缺损的作用,及出血后不同时间点神经营养因子BDNF表达情况。结果在给药第1、3、7日,脑出血损伤增加损伤区域内的BDNF阳性细胞数量;而且在损伤的第3日因损伤刺激出现的BDNF阳性细胞数量达到高峰,第7日已经开始回落。应用破血化瘀填精补髓方剂干预后,可以延长BDNF阳性细胞数量达到高峰的时间。结论破血化瘀填精补髓方剂能明显改善脑出血大鼠神经功能缺损;其作用机制可能与上调脑出血血肿周围损伤组织中BDNF表达有关。

破血化瘀填精补髓对脑出血急性期证候要素评分的影响

目的探讨破血化瘀填精补髓法治疗脑出血急性期证候的疗效。方法从证候学的研究角度出发,运用十一·五期间北京中医药大学研究制定的证候要素判定及评价量表对破血化瘀,填精补髓法治疗脑出血急性期证候疗效进行评价。结果出血性中风发病后,内火、痰湿、内风占主要方面,其次为血瘀、气虚及阴虚;第2周时,内风证候得到了明显改善,痰湿、内风证候也有下降的趋势。治疗期:第2、4周中风病证候要素中内火、痰湿评价评分两组比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01);内风、血瘀、气虚、阴虚评价评分两组比较均无统计学差异(P>0.05)。随访期:第3、6个月中风病证候要素中痰湿评价评分两组比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01);中风病证候要素内风、内火、血瘀、气虚、阴虚评价评分两组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论破血化瘀,填精补髓法显示出了治疗出血性中风的证候学疗效。

破血化瘀、填精补髓中药汤剂对脑出血大鼠HSP70与HIF-1α的影响

目的观察以破血化瘀、填精补髓法组方的中药汤剂对脑出血模型大鼠热休克蛋白70(HSP70)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法将80只Wistar雄性大鼠随机分为4组:假手术组,脑出血模型组(模型组),破血化瘀、填精补髓法中药汤剂组(方剂组),脑血康对照组(对照组),每组20只。采用尾状核注射自体血方法制作大鼠脑出血模型,评估大鼠神经功能状态,方剂组和对照组均在大鼠麻醉清醒后开始给药干预。应用免疫组织化学法检测各组大鼠HSP70和HIF-1α表达差异。结果与模型组比较,破血化瘀、填精补髓汤剂和脑血康胶囊治疗后的脑出血模型大鼠神经功能评分显著改善,同时2组脑组织中的HSP70较模型组明显增加、HIF-1α较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01)。各项指标方剂组均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论破血化瘀、填精补髓中药汤剂可通过调节HSP70和HIF-1α保护脑出血后继发损伤的脑组织。

益气养血填精补髓法治疗肿瘤化疗后白细胞减少症的临床观察

目的:观察益气养血、填精补髓法治疗肿瘤化疗后白细胞减少症的疗效。方法:将60例肿瘤化疗后白细胞减少症患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组予贞芪扶正胶囊口服,治疗组予自拟的扶正增白汤口服,2组治疗15d后观察白细胞及中性粒细胞计数及疗效。结果:治疗组在治疗后白细胞数及中性粒细胞数显著升高(P<0.05,P<0.01),与对照组相比差异显著(P<0.05)。治疗组的总有效率为93.3%,对照组总有效率为66.7%,2组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:益气养血、填精补髓法治疗肿瘤化疗后白细胞减少症的疗效较好。

破血化瘀填精补髓法对脑出血大鼠脑组织含水量的影响

目的观察破血化瘀,填精补髓法对实验性大鼠脑出血(ICH)后脑水含量的变化及灶周组织MMP-2/MMP-9蛋白表达的影响。方法选用Wistar大鼠,以自体血注入法制备ICH模型,观察脑出血方干预后脑水含量和MMP-2/MMP-9蛋白表达的变化。结果模型组ICH后脑水含量明显高于假手术组,P<0.01;治疗组与模型组相比,中剂量组1 d时和高剂量组各时间点脑水含量均明显降低,P<0.01。模型组与假手术组相比,MMP-2水平显著降低,P<0.01;MMP-2蛋白1 d开始表达,随时间持续增长;治疗组与模型组相比较,中剂量组在3、7 d时明显增高,P<0.05;高剂量组在3、7 d时显著增高,P<0.01。MMP-9水平:模型组与假手术组相比显著降低,P<0.01;MMP-9蛋白1 d开始表达,在3 d达高峰,7 d时降低;治疗组与模型组相比较,低剂量组7 d时显著降低,P<0.01;高剂量组1d时明显降低,P<0.05,3、7 d时显著降低,P<0.01。结论脑出血方能有效降低ICH后脑水含量,拮抗脑水肿的发生,可能是通过抑制MMP-2/MMP-9蛋白表达而减少脑水含量。

破血化瘀、填精补髓中药汤剂对实验性脑出血大鼠Keap1-Nrf2/HO-1途径相关蛋白表达的影响

目的观察以破血化瘀、填精补髓法组方的中药汤剂对实验性脑出血模型大鼠Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核转录因子E_2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1蛋白表达的影响。方法将64只Wistar雄性大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、脑血康胶囊阳性对照药组(简称阳性药组),以及破血化瘀、填精补髓中药汤剂组(简称汤剂组),每组16只。采用尾状核注射自体血方法制作大鼠脑出血模型,分别给药(1次/d),3天后,麻醉下取大鼠脑组织,检测脑含水量,采用HE染色观察鼠脑尾状核神经细胞的形态变化,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织Keap1、Nrf2、HO-1的表达变化。结果模型组大鼠脑含水量与假手术组比较明显增加(P<0.05);阳性药组和汤剂组脑含水量与模型组比较均明显下降,尤以汤剂组下降明显(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠脑尾状核血肿区可见大量红细胞浸润,神经细胞数目减少,胶质细胞增多,间质水肿明显,神经细胞排列紊乱、稀疏、淡染;与模型组比较,汤剂组和阳性药组大鼠脑尾状核均可见少量红细胞浸润,神经细胞略微肿胀,间质水肿较轻,神经细胞排列略疏松。与假手术组比较,模型组大鼠脑组织Keap1、Nrf2和HO-1的表达增加(P<0.01);与模型组比较,阳性药组和汤剂组大鼠脑组织肿Keap1、Nrf2和HO-1表达减少(P<0.01),其中汤剂组较阳性药组改善显著(P<0.05)。结论破血化瘀、填精补髓中药汤剂可通过Keap1-Nrf2/HO-1途径改善脑组织氧化应激状态,进而保护脑出血后继发损伤的脑组织。

破血化瘀,填精补髓方剂对脑出血大鼠脑血肿周围组织生长因子的表达

目的探讨破血化瘀,填精补髓法(受试药)对脑出血(ICH)大鼠血肿周围组织脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体(TrKB)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法用大鼠脑立体定位仪,参照Deinsberer等报道的方法,获得脑出血大鼠模型,通过逆转录聚合酶链反应及免疫组化技术对上述各项指标检测。结果与模型组比较,阳性药组和受试药各组大鼠在给药1~3 d后能明显改善大鼠神经系统体征,降低神经功能缺损评分;脑含水量明显降低,随着时相的变化,在给药后第7天,损伤脑区ICH面积比明显降低(均P【0.001);免疫组化结果显示,损伤脑区BDNF、TrkB及VEGF阳性细胞数量明显增加(均P【0.01);在治疗14 d,与假手术组比较,模型组VEGF阳性细胞明显增高(P【0.001);与模型组比较,阳性药组对损伤脑区VEGF阳性细胞数量并没有明显的影响(P】0.05);受试药高剂量和中剂量治疗组明显增加了损伤脑区VEGF阳性细胞数量,均有显著性差异(P【0.01);而低剂量组并没有看到相同的效应。结论受试药方剂可能通过调节神经元细胞膜上BDNF、TrKB及VEGF蛋白表达,促进出血灶脑神经元损伤修复及保护作用。

赵建军教授运用破血化瘀、填精补髓法治疗脑出血

赵建军教授基于脑髓理论提出了脑出血的病机关键为髓虚毒损,并提出了破血化瘀、填精补髓的治疗法则。主张在脑出血的治疗过程中应结合现代医学手段辅助治疗,重视患者肢体康复、言语功能康复、智能的锻炼与恢复等方面,同时应密切关注患者心理情绪方面的变化,将中医辨病与辨证相结合,充分发挥中医药在治疗脑出血方面的优势。

破血化瘀、填精补髓中药汤剂治疗脑出血急性期的药物经济学评价

目的用成本-效果分析法对联用破血化瘀,填精补髓法中药汤剂治疗脑出血进行评价,为临床治疗提供药物经济学参考。方法开展前瞻性队列研究,采用随机对照的方法,观察出血性中风120例,比较常规治疗组（对照组）与常规治疗基础上联用破血化瘀、填精补髓中医汤剂治疗组（实验组）的疗效;运用成本-效果分析法对联用破血化瘀,填精补髓法中药汤剂治疗脑出血进行药物经济学评价。结果第4周美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分与基线差值试验组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;试验组NIHSS评分每提高1分花费2569.23元,对照组NIHSS评分每提高1分花费3077.69元。第3个月、第6个月BI评分≥85分及mRS量表0~2级患者比例试验组与对照组差异有统计学意义（P〈0.05）;3个月随访时,试验组及对照组BI评分≥85分患者比例每提高1%分别花费199.43元、237.39元,6个月随访时试验组及对照组BI评分≥85分患者比例每提高1%分别花费194.68元、245.08元;3个月随访时试验组及对照组mRS量表0~2级的患者比例每提高1%分别花费240.47元、316.53元,6个月随访时试验组及对照组mRS量表0~2级的患者比例每提高1%分别花费209.65元、271.33元。结论与常规治疗比较,破血化瘀、填精补髓法治疗出血性中风能显著改善急性期患者NIHSS评分,并显示出较高的成本效果优势;随访期通过对患者日常生活能力评定及mRS评分,证实本治疗法则的远期效果及经济学指标同样具有优势。

破血化瘀填精补髓法治疗出血性中风临床研究

目的观察破血化瘀填精补髓法治疗出血性中风血瘀髓虚证的临床疗效。方法将96例患者随机分为治疗组48例和对照组48例,两组均使用西医基础治疗,治疗组同时口服中药脑出血Ⅰ号方(急性期)及脑出血Ⅱ号方(恢复期)。评价两组中风病中医证候积分、神经功能缺损程度评分、临床疗效。结果两组治疗后各项指标较治疗前均显著下降,且以治疗组下降为著。治疗组总有效率优于对照组。结论破血化瘀填精补髓法治疗出血性中风急性期及恢复期血瘀髓虚证疗效显著优于单纯西医基础治疗,且未见不良反应。

填精补髓、活血化痰开窍法对血管性痴呆大鼠海马组织单胺类神经递质的影响

目的观察填精补髓、活血化痰开窍法对VD大鼠海马组织单胺类神经递质含量的影响。方法建立双血管阻塞(2VO)改良法复制VD大鼠模型;采用酶联免疫法(ELISA)检测海马组织内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马组织NE、DA、5-HT含量减少(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组,中药高剂量组、中药中剂量组海马组织DA、5-HT含量均增加(P<0.05),阳性对照组,中药高剂量组海马组织NE含量增加(P<0.05)。结论填精补髓、活血化痰开窍法改善大鼠学习记忆功能障碍,其作用机制可能与提高海马组织内NE、DA、5-HT含量相关。

填精补髓、祛瘀化痰法治疗血管性痴呆及阿尔茨海默病的理论探讨

认为血管性痴呆与阿尔茨海默病有着共同的病理机制,即肾精不足,髓海空虚,痰瘀闭阻脑络。肾精不足是其共同的病理基础,髓海空虚是其共同的病理演变,痰瘀闭阻脑络是其共同的中心病理环节。填精补髓、祛瘀化痰为两病的通用大法。

填精补髓、活血化痰开窍法对血管性痴呆大鼠海马组织BDNF和bFGF含量的影响

目的探讨填精补髓、活血化痰开窍法对血管性痴呆(VD)大鼠海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)含量的影响。方法采用双血管阻塞(2VO)改良法复制VD大鼠模型,以盐酸多奈哌齐片为阳性对照组,观察填精补髓、活血化痰开窍法对大鼠海马组织BDNF及b FGF含量的影响。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马组织BDNF和b FGF含量升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组,中药高剂量组,中药中剂量组海马组织BDNF含量升高(P<0.05),阳性对照组,中药高剂量组海马组织b FGF含量升高(P<0.05)。结论填精补髓,活血化痰开窍法可通过提高VD大鼠海马组织BDNF和b FGF含量,改善其学习与记忆能力。

破血化瘀填精补髓法治疗出血性中风的临床疗效

目的:探讨破血化瘀、填精补髓法在出血性中风治疗中的运用价值。方法:以我院2013年1月-2015年11月收治的出血性中风患者90例为对象,按治疗方案分为观察组和对照组各45例。对照组采用西医基础治疗。观察组在对照组的基础上,辨证予以破血化瘀、填精补髓治疗。在患者治疗前和治疗28d后,进行神经功能缺损、日常生活能力和中医证候评分,并在治疗28d后进行疗效评价。结果:观察组治疗28d后,NIHSS评分、中医证候评分、生活质量评分分别为(3.46±0.58)分、(6.08±3.14)分、(74.93±7.72)分,与对照组比较有统计学差异(t=4.893、4.236、5.126,P<0.05)。经治疗,观察组基本痊愈、显效、有效、无效例数分别为4例、23例、13例、5例,治疗总有效率为88.89%,显著高于对照组的71.11%(χ2=4.444,P<0.05)。结论:在西医基础治疗的同时,辨证予以出血性中风患者破血化瘀、填精补髓治疗,可以取得更好的效果。

填精补髓法治疗痉挛型脑瘫患儿临床研究

目的：探讨填精补髓法在痉挛型脑瘫治疗中的临床应用,开拓痉挛型脑瘫治疗新思路。方法：将300例1～6岁痉挛型脑瘫患者随机分为治疗组和对照组各150例,治疗组在针刺治疗、运动康复治疗、中药熏洗的基础上给予具有填精补髓功效的中药制剂口服。分别治疗3个疗程后进行粗大运动功能、肌张力改善和脑瘫患儿综合功能评定等疗效比较。结果：填精补髓法治疗痉挛型脑瘫患儿粗大运动功能、肌张力改善和脑瘫患儿综合功能评定等疗效指标改善效果显著。结论：中医药填精补髓法治疗痉挛型脑瘫值得临床研究和推广。