中药“增免散”对鸡免疫功能及ND疫苗免疫应答的影响

本试验对中药免疫增强剂“增免散”对雏鸡新城疫(ND)疫苗免疫应答和免疫功能的影响进行了研究。1日龄艾维茵肉鸡健雏200只随机分4组,于7 d、21 d用La Sota活苗免疫,从第7天开始“增免散”按饲料量的0.5%、1.0%、1.5%添加,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,Ⅳ组(对照组)不添加任何药物。各鸡群于7、14、28和49 d测定血液中新城疫血凝抑制(HI)抗体水平,并检测“增免散”对免疫功能的影响。结果表明,中药“增免散”按1%、1.5%添加能显著提高La Sota活苗接种雏鸡的特异性HI抗体水平,延长其持续时间,能促进雏鸡免疫器官的生长发育,能显著增高雏鸡外周血T淋巴细胞ANAE(Acida naphthyl acetate esterase)阳性率和B淋巴细胞EAC(Erythrocyte-antibody-Complement)花环率,并对雏鸡红细胞免疫粘附功能具有显著促进作用。

增免散对鸡脾T淋巴细胞CD4^+和CD8^+亚群的影响

将300只1日龄雏鸡随机分为中药增免散组、环磷酰胺组、环磷酰胺+左旋咪唑组、环磷酰胺+增免散组和正常对照组,6日龄时用鸡新城疫LaSota疫苗点眼滴鼻免疫,14、21、28、35日龄时测定鸡血液NDV抗体效价,脾器官指数,脾组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞浓度和脾细胞凋亡率,观察脾的组织结构变化。结果显示,14、21日龄增免散组抗体水平高于其他各组(P<0.01);14、21、28日龄增免散组脾指数高于其他各组,增免散组脾CD4+细胞浓度、CD4+/CD8+比例高于其他各组,差异极显著(P<0.01);14、21、28日龄增免散组脾细胞凋亡率低于其他各组,差异极显著(P<0.01);14、21日龄时,增免散组脾白髓和红髓内网状细胞和中淋巴细胞较多,脾小体比对照组略有增加。表明,中药增免散不仅能促进鸡脾的发育,增高脾组织中CD4+/CD8+比例,而且对环磷酰胺的免疫抑制有一定拮抗作用。

黄芪增免散对围手术期食管癌间质反应的影响

目的 :观察黄芪增免散对围手术期食管癌间质反应的影响。方法 :用黄芪增免散治疗围手术期食管癌患者 37例 ,共 4周。采用甲苯胺蓝染色方法 ,对手术切除标本进行组织学观察用药后食管癌间质(包括肥大细胞、微血管和淋巴细胞 )反应的变化 ,并与同期手术治疗的 14例患者作对照。结果 :与对照组比较 ,治疗组食管癌间质肥大细胞数量和淋巴细胞灶状聚集增多 ,间质微血管损伤现象明显 (P <0 0 1)。结论 :黄芪增免散对围手术期食管癌患者免疫功能有改善作用。

“增免散”对ND疫苗免疫雏鸡抗体效价和胸腺发育的影响

将300只1日龄雏鸡随机分为空白对照组、中药“增免散”组、环磷酰胺组、环磷酰胺组+左旋咪唑组、环磷酰胺+“增免散”组,雏鸡6日龄时用鸡新城疫(ND)L a Sota疫苗点眼滴鼻,分别于7、14、28、35日龄时测定鸡血液新城疫抗体效价、胸腺器官指数、胸腺组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞浓度、胸腺细胞凋亡率,观察胸腺的组织结构变化,探索中药“增免散”的免疫增强机理。结果表明:中药“增免散”不但能增强ND疫苗的免疫效果,促进雏鸡胸腺发育,提高胸腺组织中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值,而且对环磷酰胺诱导的免疫抑制、免疫器官损伤和细胞凋亡有一定拮抗作用。

健脾增免冲剂的抗癌作用及其对免疫功能的影响

本文报道了健脾增免冲剂(JPZM)对荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对免疫功能的影响。结果表明:口服JPZM对小鼠移植性肉瘤(S_(180))和肝癌(HeP_A)具有明显的抑制作用,抑瘤率达46.25％、45.57％;JPZM能明显提高荷瘤鼠的脾指数和胸腺指数,与对照组相比具有显著差异(P<0.01);能增加小鼠血清溶血素含量,并能促进小鼠脾淋巴细胞转化,两者与对照组相比具有显著的差异(P<0.05)。

UPLC-MS法同时测定增免抑瘤颗粒中5种成分

目的建立同时测定增免抑瘤颗粒（黄芪、党参、白芍等）中芍药苷、芍药内酯苷、黄芪甲苷、野黄芩苷和汉黄芩素的UPLC-MS方法。方法采用Waters公司UPLC—Micro2000仪器ESI＋离子模式下选择离子监控，以柳胺酚为内标；色谱分离采用AcquityUPLCBEHC18色谱柱（50mm×2．1mm，1．7μm）；流动相为0．1％甲酸水溶液（含5mmol／L的乙酸铵）（A）-乙腈（B），梯度洗脱；体积流量0．3mL／min；柱温30℃。结果芍药苷、芍药内酯苷、黄芪甲苷、野黄芩苷、汉黄芩素分别在12．63—1616ng／mL（r=0．9998），12．44—1592ng／mL（r=0．9999），12．53。1604ng／mL（r=0．9994），12．94～1606ng／mL（r=0．9997），2．5—160ng／mL（r=0．9998）范围内线性关系良好。平均回收率分别为101．6％（RSD为2．40％），98．84％（RSD为2．75％），97．89％（RSD为1．49％），98．34％（RSD为2．03％）和97．13％（RSD为1．73％）。结论所建立UPLC—MS方法简捷、准确、重复性好，可用于增免抑瘤颗粒剂的质量控制。

增免升白冲剂的提升白细胞作用研究

目的:评价增免升白冲剂的药效,探讨升高白细胞作用机理。方法:腹腔注射CP和^(60)Co照射LACA小鼠复制WBC减少模型,并经口给予不同剂量的该药治疗9d后计数WBC、BMC、CFU-S、CFU-GM并测定BMC中DNA含量。结果:1500mg·kg^(-1)治疗9d CP和^(60)Co模型小鼠WBC计数均恢复至正常,CP模型小鼠CFU-S和DNA含量亦恢复正常;3000mg·kg^(-1)治疗9d,两种模型小鼠各项检测指标均恢复至正常水平,疗效明显优于鲨肝醇;21例白细胞减少症志愿受试者按100mg·kg-1日剂量连续治疗30d,其中20例WBC计数均升至4×10~9·L^(-1)以上。结论:增免升白冲剂有明显的升高WBC、BMC、CFU-S、CFU-GM计数和增加DNA含量的作用,其疗效明显优于鲨肝醇,其机理可能是组方中各有效成分有改善造血微环境,促进DNA合成,促进造血干细胞增殖、分化和成熟作用。

增免抑瘤颗粒剂干预卵巢癌大剂量化疗后免疫及骨髓抑制的实验研究

目的探讨增免抑瘤颗粒剂对卵巢癌SKOV3荷瘤小鼠顺铂(DDP)化疗后免疫及骨髓抑制的改善情况。方法建立卵巢癌SKOV3荷瘤小鼠模型,测定小鼠单次腹腔注射DDP的LD50。取40只造模成功的荷瘤鼠,随机分为DDP组、ZMYL高、中、低剂量合并DDP组,每组10只,各组均予DDP LD50值单次腹腔注射。注射后次日开始灌胃给药,ZMYL高、中、低剂量组的给药剂量分别为24.0g/kg、12.0g/kg、6.0g/kg,DDP组灌以等量的0.9%NaC l溶液,共干预8天。观察荷瘤小鼠存活时间、存活率、脾脏指数及骨髓DNA含量、血常规等指标变化情况,应用荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群比例。结果①DDP腹腔注射LD50为16.36 mg/kg,95%可信限为13.22mg/k-20.39 mg/kg。②各组生存时间以及存活率差异均无统计学意义(P>0.05)。③与DDP组比较,各剂量ZMYL+DDP组均可提高荷瘤小鼠脾脏指数,中高剂量组还可提高骨髓DNA含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。④与DDP组比较,各剂量ZMYL+DDP组均可提高荷瘤小鼠外周血中白细胞数,差异均有统计学意义(P<0.05)。⑤与DDP组比较,各剂量ZMYL+DDP组的CD3、CD4、CD8及CD4/CD8差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ZMYL对顺铂大剂量化疗引起的荷瘤小鼠外周血白细胞减少及骨髓DNA含量、脾脏指数的降低有明显的升高作用,能调节机体紊乱的免疫功能,改善骨髓抑制。

增免抑瘤颗粒对晚期卵巢癌患者术后化疗期生存质量的影响

目的观察增免抑瘤颗粒对晚期卵巢上皮癌术后化疗患者生存质量的影响。方法将104例Ⅲ-Ⅳ期卵巢癌细胞减灭术后患者按分层随机法分为治疗组54例和对照组50例。两组化疗方案均为紫杉醇+卡铂静脉给药,治疗6个疗程,治疗组在化疗期内口服增免抑瘤颗粒剂。采用Karnofsky评分及癌症治疗功能评价系统卵巢癌子系统(FACT-O)观察两组化疗期生存质量。结果①两组化疗各期卡氏评分均较治疗前差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);治疗组中、后期卡氏评分与上一期比较,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);对照组中、后期卡氏评分与上一期比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组同期比较,化疗各期卡氏评分差异均有统计学意义(P<0.01)。②治疗组化疗初期、中期、后期FACT-O各项评分及总分与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);除化疗初期FACT-O评分中功能状态评分及总分外,对照组各项评分均较治疗前差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。除化疗中期功能状况评分无变化外,治疗化疗中期、后期FACT-O各项评分及总分与上一期比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);除化疗中期社会/家庭状况评分、晚期卵巢癌特异状况评分无变化外,对照组化疗中期、后期各评分与上一期比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。两组同期比较,FACT-O各项评分及总分差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论增免抑瘤颗粒能显著改善晚期卵巢癌术后化疗患者的生存质量,且在化疗早期就显示出良好的疗效。

增免抑瘤颗粒剂抗卵巢癌荷瘤小鼠皮下移植瘤血管生成作用的实验研究

目的探讨增免抑瘤颗粒剂(Zengmian Yiliu Granule,ZMYLG)抗SKOV3卵巢癌荷瘤小鼠皮下移植瘤血管生成的影响及机制。方法建立SKOV3卵巢癌荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、紫杉醇组、ZMYLG高、中、低剂量组(简称ZMYLG高、中、低组),每组8只,连续给药10天。采用细胞膜分化抗原34(CD34)抗体标记新生血管内皮细胞法,计算皮下移植瘤内微血管密度(MVD);免疫组化法、RT-PCR法检测皮下移植瘤内血管内皮生长因子(VEGF)及其受体胎肝激酶-1(FLK-1)、缺氧诱导因子(HIF-1α)蛋白及mRNA表达水平。结果与对照组比较,紫杉醇组和ZMYLG高、中、低剂量组移植瘤内MVD明显降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。ZMYLG各剂量组均能下调瘤组织中VEGF、FLK-1及HIF-1α蛋白及mRNA表达量(P<0.01,P<0.05)。结论 ZMYLG能抑制肿瘤血管新生,其机制可能与下调HIF-1α表达,改善荷瘤小鼠缺氧状态,抑制VEGF及其受体FLK-1表达,发挥抗肿瘤血管生成作用有关。

增免抑瘤合剂合并化疗对卵巢癌大鼠bcl-2、bax基因表达的影响

目的从卵巢癌大鼠bcl-2、bax凋亡相关基因表达的变化,探讨增免抑瘤合剂辅助治疗卵巢癌的作用机制。方法采用DMBA诱发的原发性卵巢癌大鼠模型,随机分为化疗组(DDP化疗)、合并组(化疗结合增免抑瘤合剂灌胃)、中药组(增免抑瘤合剂灌胃)和模型组(生理盐水灌胃)。共治疗2周,比较各组大鼠bcl-2、bax表达及bcl-2/bax变化。结果治疗各组的bcl-2,bcl-2/bax均较模型组下降,差异显著(P<0.01),其中合并组下降最明显,与中药组及化疗组相比,也具有统计学意义(P<0.01)。合并组的bax表达较其余各组明显提高(P<0.01)。本研究凋亡指数曲线与bax曲线趋于一致性,显示增免抑瘤合剂辅助化疗能促进细胞凋亡。合并组平均凋亡指数最高(33.53%),模型组最低(13.35%),各组间具统计学意义(P<0.01)。结论增免抑瘤合剂合并化疗能下调卵巢癌bcl-2表达,提升bax表达,从而下调bcl-2/bax比值,激活卵巢癌细胞的凋亡途径,这可能是其抗癌增效的作用机制之一。

增免合剂对气阴两虚反复下呼吸道感染患儿T细胞功能障碍的调节作用

目的探讨气阴两虚反复下呼吸道感染 (RLRTI)患儿T细胞功能障碍情况及增免合剂的免疫调节作用 ,为有效治疗该病寻找理论依据。方法采用免疫荧光标记和流式细胞仪技术 ,检测了 31例轻型和 2 8例重型RLRTI患儿治疗前感染期及增免合剂治疗后 3个月和 6个月非感染期外周血T细胞亚群和与T细胞活化有关的CD3+/HLA DR+和CD3+/CD2 5+等表面分子的表达情况。结果轻型RLRTI治疗前CD4 +细胞和CD3+/HLA DR+活化T细胞的表达率均明显降低 ,治疗后 3个月CD4 +、CD3+/HLA DR- 静止T细胞、CD3+/HLA DR+活化T细胞及CD3+/CD2 5+表达IL 2R的T细胞的阳性率均明显降低 ;但治疗 6个月后 ,只有CD3+/HLA DR+活化T细胞的表达率低于对照组。重型RLRTI患儿治疗前 ,CD3+、CD4 +、CD3+/HLA DR- 、CD3+/HLA DR+和CD3+/CD2 5+的表达率均降低 ,治疗 3个月和 6个月后上述指标似有恢复 ,但仍低于对照组。增免合剂的临床效果显示 ,轻型总有效率是 10 0 % ,其中显效 78 9% ;重型总有效率是 90 9% ,显效 6 8 2 %。结论气阴两虚RLRTI患儿T细胞数减少 ,T细胞活化功能障碍 ,病情轻、重与T细胞功能障碍情况一致。增免合剂治疗RLRTI临床疗效显著 ,对T细胞功能障碍有明显的调节作用 。

“增免方”防治小儿复感116例临床观察

运用平补阴阳法设计“增免方”防治小儿复感１１６例，对照组３２例用丙种球蛋白，结果两组分别取得９４．８％和６８．７５％的防治效果。治疗组用药后，血清ＩｇＧ、ＩｇＡ，唾液ＳＩｇＡ和血Ｈｂ明显提高，ＰＨＡ皮试反应增强，与治疗前比较，有显著性差异。而对照组上述指标治疗前后，无显著性差异。

增免抑瘤颗粒剂对卵巢癌荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞凋亡的影响

目的研究增免抑瘤颗粒剂(ZMYL)对卵巢癌皮下移植瘤的抑制作用,并从细胞凋亡途径探讨其作用机制。方法建立卵巢癌荷瘤小鼠模型,随机分为5组:对照组、紫杉醇组、ZMYL高、中、低剂量组,每组8只。给予相应干预措施。给药10天后处死荷瘤小鼠,称取瘤重计算抑瘤率,电镜观察瘤组织超微结构,TUNEL法检测凋亡指数,实时荧光定量PCR法检测细胞凋亡促进及抑制因子Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果①紫杉醇及ZMYL各组均能抑制移植瘤增殖,ZMYL高、中、低剂量组的抑瘤率分别为34.64%、31.60%、30.03%。②病理检查ZMYL各组与紫杉醇组肿瘤细胞均有典型凋亡形态学改变。③与对照组比较,紫杉醇组及ZMYL高、中、低剂量组有诱导肿瘤细胞凋亡作用,差异有统计学意义(P<0.05)。④与对照组比较,紫杉醇组及ZMYL高、中剂量组能上调移植瘤内Bax mRNA表达和下调移植瘤内Bcl-2 mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中ZMYL高剂量组上调Bax及下调Bcl-2表达的作用强于ZMYL中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05);ZMYL中剂量组上调Bax以及下调Bcl-2表达的作用强于ZMYL低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ZMYL颗粒剂具有一定的抑制卵巢癌细胞增殖的作用,其机制与上调Bax、下调Bcl-2 mRNA表达、促进肿瘤细胞凋亡有关。

增免强力颗粒薄层色谱鉴别方法分析

目的:为控制增免强力颗粒质量,采用薄层色谱法对增免强力颗粒处方中的组成药味进行定性鉴别。方法:选择能有效排除干扰、富集待测成分的提取方法,选用合适的固定相,减少展开剂的组成、配比、展开环境等影响因素,确定最优色谱条件、显色剂或紫外光灯检视。结果:供试品在与对照品或对照药材色谱相应的位置处显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰。结论:所建方法专属性强、简便、准确,可用于增免强力颗粒的定性鉴别以控制制剂质量。

增免强力颗粒对小鼠免疫功能影响的研究

目的:探讨增免强力颗粒治疗小儿反复呼吸道感染的作用机制。方法:以20、15、10 g/kg的剂量给正常小鼠连续7 d灌服增免强力颗粒,观察其对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑形成的影响。结果:增免强力颗粒可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数;显著促进正常小鼠溶血素的形成,大剂量可显著促进溶血空斑的形成,中、小剂量可明显促进溶血空斑的形成。结论:增免强力颗粒可以明显增强小鼠免疫功能。

正交试验法优选增免强力颗粒提取工艺

目的:优选增免强力颗粒的最佳提取工艺。方法:以出浸膏量为考察指标,采用L9(34)正交设计优选水提法的最佳提取条件。结果:①水提提取的影响因素程度依次为:C(提取次数)>A(提取时间)>B(加水量)。②最佳水提工艺条件为:先浸泡1h,再加水煎煮提取3次,第1次提取1.5h,加8倍量水;第2次、第3次各提取1h,加6倍量水。结论:确定了增免强力颗粒合理的提取工艺。