乳胶增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白

目的 为了研究乳胶增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白在临床中的应用。方法 采用乳胶增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白,同时用高铁血红蛋白法测定血红蛋白,然后计算出糖化血红蛋白的百分比。结果 该方法的批内和批间重复性在4.0％以内,测定结果与微柱法有很好的相关性,其参考范围是4.7％～6.3％。该方法使用的试剂比较稳定,开盖后可以使用至少20d,每月只需校准一次,且高浓度的尿素、血脂、胆红素和Schiff反应对该法测定无干扰;红细胞压积比从30％到100％也不影响HbA1c的测定。结论 该方法最大的优点是能进行自动化分析,可以使用末梢血测定;样品前处理少,溶血处理后8min内就可以得到第一个HbAlc结果。由于试剂比较稳定,分析方法的总不精密度大大提高(每月只需校准一次),因此降低了由于频繁校准带来的潜在变异。认为该法用于测定HbAlc具有快速、准确、精度高等优点,可以在使用自动化生化分析仪的医院推广使用。

乳胶增强免疫比浊法测定血清胃蛋白酶原水平在胃癌筛查中的价值研究

目的探讨以乳胶增强免疫比浊法测定的血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ(PGR)水平在胃癌筛查中的价值。方法根据组织病理学检查结果将受检者分为4组,正常对照组60例、萎缩性胃炎组160例、消化性溃疡组65例、胃癌组55例。以乳胶增强免疫比浊法检测受检者空腹血清PGⅠ、PGⅡ的水平。结果萎缩性胃炎组和胃癌组的PGⅠ和PGR水平显著降低(P<0.05)。消化性溃疡组PGⅠ,PGⅡ明显升高(P<0.05)。根据流行病学原理,确定以PGⅠ≤70ng/mL和PGR≤4为界值(敏感性为69.09%,特异性70.65%)筛查胃癌。结论乳胶增强免疫比浊法测定的血清PG水平在胃癌筛查中有重要的应用价值。

胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ的不精密度和线性观察

目的对胶乳增强免疫比浊法测定胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)进行初步方法学评价,为临床应用提供依据。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A及EP10-A2文件提供的方法,对胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ进行初步的评价。结果 PGⅡ的低值样本批内变异系数(CV)为2.05%、批间CV为1.60%、日间CV为3.92%、总CV为4.70%;高值样本批内CV为1.70%、批间CV为1.21%、日间CV为3.79%、总CV为4.32%。当PGⅡ浓度分别为9.6、24.7、39.8μg/L时,相对偏倚分别为-0.18、-0.47、-0.39μg/L,总不精密度分别为4.98%、2.39%、2.71%。测试间的携带污染差异无统计学意义(P>0.05)。线性回归方程为Y=0.975 7X-0.016 8,决定系数(R2)=0.998 7。结论胶乳增强免疫比浊法测定PGⅡ的精密度符合EP5-A文件标准,具有良好的重复性。线性、偏倚、总不精密度及抗交叉污染能力均达到EP10-A2文件标准,符合临床应用要求,适用于实验室常规测定。

胶乳增强免疫比浊法测定糖化血红蛋白的方法学评价

目的应用美国，旌床实验室标准化委员会的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc进行方法学评价。方法依据标准化文件要求，分析胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc的精密度、线性范围、回收率和干扰因素，并考察其与高效液相色谱法的相关性。结果该法总变异系数为3．19％（低值），3．53％（中值）和4．11％（高值）。平均回收率100．2％，在4．4％～13．5％范围内线性良好。胆红素在884μmol／L，三酰甘油在13．5mmol／L时对测定存在干扰。试剂和样本在低温保存时可稳定10天。该法与HPLC法结果明显相关，r=0．994，但整体略高于HPLC法的结果。结论胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc方法符合NCCLS标准要求，适应临床需要。临床实验室在建立或引进新的检验项目时需要进行系统的方法学评价以验证检测的有效性和完整性。

乳胶增强免疫比浊法测定髓过氧化物酶试剂盒性能验证评价

目的：评价血浆髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在AU2700全自动生化分析仪使用的性能验证。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案对北京九强公司生产的乳胶增强免疫比浊法髓过氧化物酶测定试剂盒进行了回收试验、干扰试验、临床可报告范围及精密度验证。结果北京九强生产的MPO乳胶增强免疫比浊法试剂盒的两个浓度水平质控品的实验室精密度CV为8．9％；回收率95．7％～108．3％。线性评价的相关系数r＝0．997，线性回归方程为Y＝1．033X-25．092；干扰试验中不同程度的标本溶血均对测定MPO造成严重干扰。抗坏血酸6．3～100mg/L，三酰甘油小于7．8mmol/L内无明显干扰，相对偏差小于10％，三酰甘油浓度大于7．8mmol/L对试验有明显干扰，相对偏差为11．5％～11．9％。结论九强公司在国内首次推出的髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在抗干扰、线性、正确度及精密度等方面的性能达到临床需求，值得在临床心脑血管危险因子检测中推广应用。

微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法测定β_2-微球蛋白的评价

对微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法测定血清和尿液β2-微球蛋白(β2-MG)结果偏差进行评估。按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件,以微粒子酶免疫分析法为实验方法,胶乳增强免疫比浊法为比较方法进行对比及偏差评估,将测定数据进行相关分析,并对两种分析系统之间的预期偏差进行评估。结果发现,除高浓度(>10mg/L)尿液样本外,其余各浓度的血清和尿液β2-MG用两种方法的测定结果的偏差均在可接受的范围。在使用性能较好的全自动生化分析仪和相配套试剂的前提下,微粒子酶免疫分析法和胶乳增强免疫比浊法对血清和尿液β2-MG的测定结果基本一致。

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

目的对胶乳增强免疫比浊法（LEIA）定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。方法应用美国临床实验室标准化协会（CLSI）的标准化评价方案评价LEIA测定血浆NGAL的不精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。同时测定86例2型糖尿病（T2DM）患者（其中包括41例糖尿病肾病（DN）患者）、40名体检健康者（正常对照组）的血浆NGAL水平。结果LEIA测定血浆NGAL低、高水平的批内变异系数（CV）分别为3.76%、1.79%;日间CV分别为6.62%、3.45%。平均回收率为97.3%~104.6%;在0~5 000μg/L内线性良好,线性范围内偏差〈8%。与进口同类试剂盒（粒子增强免疫比浊法）具有高度相关性（R2=0.996 6）,两种检测方法在200和700μg/L处的偏倚分别为3.66和11.79μg/L,均满足厂家规定的要求。总胆红素≤600μg/L、血红蛋白≤10 g/L、维生素C≤0.6 g/L、甘油三酯≤15 mmol/L时对LEIA测定血浆NGAL均无明显干扰;试剂在仪器2~8℃的条件下放置,至少可保存稳定35 d;20名健康体检者血浆NGAL水平均处于厂家声明的参考区间内。正常对照组、T2DM组和DN组血浆NGAL水平呈逐步增高趋势,各组间差异均有统计学意义（P均〈0.01）。血浆NGAL与血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）、肌酐（Cr）呈正相关（相关系数分别为0.58、0.43,P均〈0.01）。结论 LEIA测定血浆NGAL具有较高的灵敏度和精密度,所测结果准确可靠,能直接在自动生化分析仪上使用,操作简便、快速,适用于大批量测定。

胶乳增强免疫比浊法检测糖化血红蛋白的性能评价

目的对应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测糖化血红蛋白（Hb A1c）的性能进行评价。方法应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c,对其精密度、空白检测限、线性、携带污染率进行评价,并与BIO-RAD（D-10N）高效液相色谱法（HPLC）检测Hb A1c进行相关性分析,同时对参考区间进行验证。结果日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c的低高水平的CV%批内分别为1.6%、0.5%;CV%批间分别为2.6%、1.3%;CV%总分别为3.5%、2.6%。检测限为0.1%。在2.0%~17.6%范围内线性良好（Y=1.0046X-0.0619,R2=0.9996）。携带污染率为1.03%,样本间交叉污染小。日立7600-020分析仪与BIO-RAD（D-10N）分析仪检测Hb A1c的结果呈明显相关（Y=1.0064X-0.0769,R2=0.9942）,95%置信区间为（-0.41~0.52）且百分偏倚的绝对值均小于6%。20名健康人群的Hb A1c测定结果为4.0%~5.5%,在厂家提供的参考区间内。结论应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测Hb A1c的性能良好,可供临床使用。

乳胶增强免疫比浊法与电化学发光法检测降钙素原的对比分析

目的:探讨乳胶增强免疫比浊法与电化学发光法检测降钙素原结果的可比性。方法:依照美国临床实验室标准化协会指南比对标准文件EP9-A2,以电化学发光-双抗体夹心法为比较方法,以乳胶增强免疫比浊法为试验方法,采用患者血清样本检测降钙素原含量,通过检测数据比对分析,对两种检测方法之间的偏倚进行评估。结果:两种方法检测降钙素原(PCT)在线性范围内的结果,直线回归方程为Y=0.037+0.992 15X,相关性良好,r=0.99092,在选定PCT医学决定水平0.5 ng/ml、2 ng/ml、10 ng/ml以比较方法为参考方法计算两种方法检测值的阳性符合率为95%、96.25%、95%,经χ~2检验表明差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胶乳增强免疫比浊法与电化学发光法均能有效检测降钙素原且相关性良好,均能满足临床需要,适合临床实验室推广使用。

胶乳增强免疫比浊法测定肌红蛋白

目的:通过对肌红蛋白(Myo)试剂盒的化学性能测定,评价了Myo测定方法的可靠性。方法:用胶乳增强免疫比浊的方法,在OLYMPUS和COBAS MIRA全自动生化分析仪上对Myo的精密度、线性、稳定性、回收试验、灵敏度、抗干扰性等指标进行评价,并进行了临床评价。结果:本方法性能评价表明,Myo批内变异系数分别为1.83%和4.56%,批间变异系数分别为2.52%和5.38%。线性γ2=0.9984。回收97%～101%。灵敏度0.0037ng/ml。37℃稳定性,放置5d后与4℃比较,相对误差<10%,人血清白蛋白、甘油三酯、γ球蛋白分别为两种浓度时测定,干扰均<10%,严重溶血和黄疸造成负干扰。与德国Disys试剂盒比较有良好的相关性。临床评价预期值100例非相关人血清测定,95%单侧57ng/ml,敏感性96.1%,特异性93.0%,临床符合率94.7%。结论:本方法所测结果准确可靠,且操作简便、快速,直接在自动生化分析仪上使用,值得推广。

胶乳增强免疫比浊法测定心型脂肪酸结合蛋白的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法定量测定血清心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法进行临床实验评价。方法分析胶乳增强免疫比浊法测定H-FABP的精密度、线性范围、前带反应、回收率和干扰因素,并考察其与酶联免疫吸附法的相关性。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP批内精密度的高值与低值变异系数分别为0.54%、1.56%;批间精密度的高值与低值变异系数分别为0.58%、1.8%,回收率为96.2%~99.3%。线性测定良好,可检测范围为2.5 ng/m L^160 ng/m L,标准品曲线回归方程为Y=1.02X+0.31,标准品检测相关性R2≥0.995。跟国外同类试剂相比较,曲线回归方程为Y=0.97X+0.13,检测相关性R2=0.998。实验组血清H-FABP检测结果为(78.3±10.4)ng/m L,与对照组相比差异有统计学意义。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP快速、准确、可靠,适用于临床急性心肌梗死的早期诊断。

乳胶增强免疫比浊法在PG1、PG2临床检测中的应用价值

目的:探究乳胶增强免疫比浊法在PG1、PG2临床检测中的应用价值。方法:选取2012年5月-2014年5月本院治疗的胃癌患者50例(胃癌组),同期根据病理学检查结果选择75例萎缩性胃炎患者(对照1组),50例消化性溃疡患者(对照2组),以及正常体检者50例(对照3组)。应用乳胶增强免疫比浊法检测四组患者空腹血清PG1、PG2水平,并进行对比分析。结果:对照3组的PG1、PG2含量与其他三组比较差异均有统计学意义(P<0.05);对照2组患者的PG1、PG2含量及其PGR值与胃癌组比较差异均有统计学意义(P<0.05);对照2组患者的PG1、PG2含量及其PGR值与对照1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);各萎缩程度亚组PG1、PG2含量及其PGR值比较差异均有统计学意义(P<0.05);胃窦组PG1、PG2含量均高于非胃窦组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。以PG1≤70 ng/m L且PGR≤4为界值时特异性为68.08%,敏感性为70.59%。结论:采用免疫比浊法检测血清PG1、PG2水平,在胃癌、萎缩性胃炎患者中具有较高的敏感性和特异性,对临床早期诊断有着重要的意义,且具有定量、快速、稳定、成本低,实用性强、检测方便、无辐射等优点。

胶乳增强免疫比浊法在甲胎蛋白测定的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法（LEIA法）测定甲胎蛋白（AFP）水平，并进行方法学评价。方法用LEIA法测定178例血清的AFP水平，同时采用化学发光免疫分析仪法（CLIA法）对AFP水平进行测定。结果LEIA法测定AFP的灵敏度为0．65ng／mL，低、中、高水平的批内CV分别为0．98％、0．92％、0．89％；批间CV分别为1．63％、1．53％、1．45％。回收率96．3％～102．9％。结论LEIA法是测定AFP较好的方法，适合普及推广。

胶乳增强免疫比浊法定量测定肌钙蛋白Ⅰ的影响因素探讨

目的探讨胶乳增强免疫比浊定量测定血清肌钙蛋白I(cTnI)的影响因素。方法对胶乳增强免疫比浊法定量测定cTnI进行三酰甘油、抗凝剂、类风湿因子(RF)阳性的干扰性试验。结果血脂、抗凝剂、RF阳性对胶乳增强免疫比浊定量测定cTnI有一定影响。结论胶乳增强免疫比浊定量测定cTnI受抗凝剂等因素影响,在实验室检测和临床诊断中应引起重视。

乳胶增强免疫比浊法测定血清Lp(a)

目的了解乳胶增强免疫比浊法检测血清Lp(a)的优越性和临床应用前景。方法对检测血清Lp(a)的乳胶增强免疫比浊法和免疫比浊法进行重复性试验、线性范围试验和回收试验的比较,采用两种方法平行检测48例冠状动脉心脏病患者血清Lp(a)的含量,进行相关性分析,并用乳胶增强免疫比浊法检测42例正常人血清Lp(a)含量。结果两种方法都有较好的重复性,但乳胶增强免疫比浊法稍优于免疫比浊法;两种方法具有较好的相关性(r=0.988,P<0.001),相关方程Y=1.087X+10.8;回收率均在95%以上,乳胶增强免疫比浊法略高于免疫比浊法;乳胶增强免疫比浊法的线性范围(5～1200mg/L)较免疫比浊法(10～900mg/L)要宽;乳胶增强免疫比浊法检测血清Lp(a)的参考范围为18.4～292mg/L。结论乳胶增强免疫比浊法检测血清Lp(a)的准确性和精确度都优于免疫比浊法;具有敏感性高、稳定性好、方便快速的优点,适宜在有自动化生化分析仪的医院推广使用。

乳胶增强免疫比浊法测定血清总IgE

目的了解乳胶增强免疫比浊法检测血清免疫球蛋白E(IgE)的优越性和临床应用前景。方法对检测血清IgE的免疫比浊法和酶标免疫(EIA)法进行重复性试验、线性范围试验和回收试验的比较,采用两种方法平行检测76例过敏性疾病患者血清IgE含量进行相关性分析,并用免疫比浊法检测48例正常人血清IgE含量。结果两种方法都有较好的重复性,但免疫比浊法明显优于EIA法;免疫比浊法和EIA法具有良好的相关性(R=0.9927,p<0.001=,相关方程Y=1.01X+11.5;回收率均在95%以上,免疫比浊法略高于EIA法;免疫比浊法的线性范围(10~1500IU/mL)较EIA法(<1200μg/L=要宽;免疫比浊法检测血清IgE的参考范围为10~120IU/mL。结论免疫比浊法检测血清IgE的准确性和精确度都明显优于EIA法;具有敏感性高、稳定性好、方便快速的优点,适宜在有自动化生化分析仪的医院推广使用。

胶乳增强免疫比浊法测定KL-6的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法(LEIA)检测唾液酸化糖链抗原(KL-6)进行方法学评价,判断其能否满足临床要求。方法在贝克曼库尔特AU5421全自动生化分析仪上利用LEIA法检测血清KL-6,参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)的标准化评价方案评价LEIA法检测血清KL-6的精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。结果 LEIA法检测血清KL-6在(50~5000)U/ml范围内线性良好(y=0.9923 x-0.0776,r^2=0.9981),线性范围内偏差<10%;高、低浓度样本批内不精密度评价变异系数CV分别为2.60%、2.63%,日间不精密度评价变异系数CV分别为3.13%、4.07%;平均回收率为100.4%;总胆红素≤200mg/l、血红蛋白≤6g/L、脂肪乳≤5%,对该法无明显干扰;试剂在仪器内(2~8)℃的条件下放置,至少可保存稳定29d;与化学发光法比较,回归方程为y=0.9581 x+14.3206,r^2=0.9989,两法高度相关(P<0.01)。结论在全自动生化分析仪上利用LEIA法测定KL-6操作简便、快速,检测结果准确可靠、重复好、线形范围较宽,与化学发光法比较有良好的相关性,符合临床实验室要求。

胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价

目的:胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒的制备及性能评价。方法:对反应体系中的主要成分定标,校准品溯源,质控品定值,参考区间确定,并对试剂准确度、精密度、稳定性、干扰物实验等相关性能指标进行评价,检测临床标本评价研制的试剂盒效能。结果:羧基微球粒径采用108 nm,羧基微球与环瓜氨酸肽抗原比例为3∶1,交联时间为60分钟,BSA封闭时间为60分钟,这时方法学灵敏度最佳。标准品溯源至北京九强生物技术股份有限公司试剂盒,两者线性回归y=1.010x-0.420(r=0.981)。质控品定值分别为20.0 U/mL±4.0 U/mL,50.0 U/mL±10.0 U/mL。参考范围95%可信区间为<35 U/mL。在2℃~8℃环境下,产品校准品贮存12个月和质控品开封16天后检测结果变化不显著。干扰物胆红素≤200 mg/L、甘油三酯≤3 g/L、血红蛋白≤2.5 g/L时,对三批试剂结果均无显著干扰。对照试剂和考核试剂检测临床标本,线性回归y=0.9607x-0.3451(r=0.9763),偏倚分析在允许误差范围内,说明考核试剂完全达到临床检测要求。结论:制备的胶乳增强免疫比浊法检测抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒符合临床诊断要求。