增强化学发光免疫分析的研究进展

介绍了增强化学发光分析的原理和增强化学发光体系 。

梅毒实验诊断中增强化学发光技术与其它血清学比对以及在急诊筛查流程的探讨

目的 通过分析梅毒螺旋体血清学比对试验,探讨增强化学发光技术（enhanced chemiluminescence technologies,ECT）在急诊化验室筛查流程.方法 增强化学发光技术与梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）法同时检测2013年4月～2014年5月间257例患者血清标本梅毒螺旋体抗体,二者不相符的检测结果,使用梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）进行验证.结果 ECT与TP-PA比对敏感度为98.9％,特异度为88％,二者具有较高的一致性（K=0.921,P＜0.05）;二者结果不符标本11例（4.28％）,ECT阳性TP-PA阴性的不符标本9例中,FTA-ABS IgG抗体9例均为阴性,RPR检测阳性1例;ECT阴性TP-PA阳性的不符标本2例,RPR检测与FTA-ABSIgG抗体均为阴性.经FTA-ABS验证后的ECT敏感度为100％,特异度为88.3％.结论 ECT敏感度高,特异度较好,且简便快速的方法学适用于急诊化验室梅毒血清学试验筛查.ECT阳性时,建议使用RPR检测以确定疾病的活动性.

聚合酶链反应-增强化学发光检测结核分枝杆菌

目的 探讨微孔板杂交技术结合增强化学发光 (ECL)检测结核分枝杆菌 (MTB)。方法 同时应用聚合酶链反应 (PCR) ECL、PCR 比色法与PCR电泳检测 6 0例活动性肺结核和 5 4例健康对照痰标本 ,比较结果。结果 PCR ECL、PCR 比色法与PCR电泳总阳性率分别为 76 .7%、6 3.3%、5 0 .0 % ,其中PCR ECL阳性率显著高于PCR电泳 (P <0 .0 5 ) ;对涂片阳性标本 ,阳性率分别为 85 .7%、85 .7%、71.4% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;对涂片阴性标本 ,阳性率分别为 73.9%、5 6 .5 %、43.5 % ,PCR ECL阳性率高于PCR电泳 (P <0 .0 5 )。另外PCR ECL、PCR 比色法与PCR电泳特异性分别为 92 .6 %、96 .3%、96 .3% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 PCR ECL灵敏度高 ,能提高临床标本MTB检出率 ,尤其是对涂片阴性痰标本 ,并且该方法操作简单 ,结果客观。

增强化学发光法检测手术及输血感染标志物的临床应用

目的对增强化学发光法检测感染性标志物进行临床应用评价。方法采用美国强生增强化学发光技术检测系统及配套试剂对乙肝表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、抗梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)进行初筛检测,阳性标本立即重新复查一次,仍为阳性者判断为初筛试验阳性。对于HBsAg、抗-HCV初筛阳性标本采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)进行确证;抗-HIV初筛阳性者送HIV确诊实验室进行确诊、抗-TP初筛阳性者采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确证。结果增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的阳性检出率分别是5.83%、0.75%、0.05%、2.73%,阳性检出率均高于各检测项目的复检确认方法的阳性率。41123例术前检查患者血清标本中,应用增强化学发光法共筛查出2399例HBsAg阳性标本、308例抗-HCV阳性标本、19例抗-HIV阳性标本、1123例抗-TP阳性标本。筛查的阳性标本经各项目的复检确认方法进行复检确认后,共确认出2325例HBsAg阳性标本、299例抗-HCV阳性标本、17例抗-HIV为阳性标本、1054例抗-TP阳性标本。应用增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的S/CO值分别在5.71、9.24、15.9、10.82以上时,经复检后各检测项目均呈现100%的阳性。结论增强化学发光法HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的检测特异性大于99%,检测阳性预测值完全能够满足临床诊疗需求,检测过程和工作效率都优于常规免疫标记技术,值得临床推广应用。

增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用

增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的应用杨晓林，王申五，蒋中华，毕建进，马立人（北京医科大学附属人民医院中心实验室，北京１０００４４）编者按：本刊自１９９３年第二期刊登“生物和化学发光技术在生物、医学中的应用”专题以来，该技术的应用又有了许多新...

增强化学发光基因检测技术

增强化学发光基因检测技术(enhanced chemiluminescence,简称ECL)是目前最灵敏的非放射性核酸检测方法之一。其灵敏度可以满足多数杂交技术的需要(达pg水平),并且具有快速显示杂交结果(曝光1～5min)和对人无伤害、对环境不会造成污染等独特优点。在分子生物学研究中有广泛的用途。根据我们应用ECL基因检测系统(amersham)情况,将这一技术介绍如下。 ECL检测系统的工作原理是在氧化剂存在时。

增强化学发光分析仪器中光电检测系统的设计与实验

增强化学发光分析仪器中光电检测系统的设计与实验王勇徐大雄（北京邮电大学无线系１０００８８）朱一川许士坤邹俊伟齐莉周蓉李海珠（北京市新技术应用研究所１０００３５）和平（陕西省华阴市场８８＃西安７１４２００）增强化学发光（ＥｎｈａｎｃｅｄＣｈｅｍｉｌｕｍ...

可用于增强化学发光光子计数的系统设计及实验

文中介绍了增强化学发光的工作机理 .针对发光物的特性 ,对光电倍增管 (PMT)光子计数系统供电电路及其前置放大器设计做了阐述 .用 C14系列做微弱光源进行了实验 ,结果表明 ,此系统设计线性动态范围很宽 ,噪声小 。

4-（1H-三氮唑）苯酚增强化学发光酶联免疫分析法检测甲胎蛋白

增强化学发光酶联免疫分析法除具有化学发光信号持续稳定时间长、发光强度高、灵敏度高等优点外，而且简便、快速、安全、应用面广，克服了直接化学发光用于免疫分析的缺点，提高了化学发光免疫分析的灵敏度。实验利用Luminol—H2O2-辣根过氧化物酶（HRP）-4-（1H-三氮唑）苯酚（TRP）增强化学发光分析体系，采用双抗体夹心法，结合免疫磁性微球分离技术和化学发光分析技术建立了血清中AFP含量的测定方法，实验方法如图1所示。

用增强化学发光法检测β-地中海贫血的基因突变

使用生物素-14-dATP于3＇末端标记等位基因特异性寡核苷酸(ASO)探针,结合增强化学发光法(ECL)检测β-地中海贫血的基因突变。经过对已知突变类型的15例β-地贫杂合子,1例双重突变杂合子DNA的检测,证明本法具有良好的敏感性和特异性,能准确区分上述样品的4种基因型,与放射性同位素^(32)p标记ASO探针的分析结果相一致。将本法应用于15例临床新病例的基因分析,其中鉴定出4例为CDs41-42(-TCTT)突变,7例为IVS-Ⅰ-654(C→T)突变。本法操作简便,结果可靠,不依赖同位素,适用于临床实验室开展β-地贫的基因诊断和大样本人群的基因调查。

增强化学发光酶联免疫分析用于伏马菌素B_1的快速检测

以抗原-抗体的免疫反应及化学发光为基础,以辣根过氧化物酶(HRP)标记伏马菌素B_1(FB_1)为半抗原、鲁米诺-H_2O_2为发光底物,对羟基联苯为化学发光增强剂,建立了一种新型的FB_1快速检测方法——增强化学发光酶联免疫分析法,相关系数R为0.991 6,线性范围为200~1 400μg/L,检测限为91.3μg/L.在不同的加标水平下,回收率为85.9%~115.4%,与之相对应的板内RSD为9.1%~10.2%(n=6),板间RSD为10.6%~12.4%(n=6),与其他真菌毒素交叉反应率较低.与传统的检测方法(酶联免疫吸附测定和高效液相色谱法)进行了比较,结果表明,本研究建立的方法灵敏度高、特异性好、操作简单、检测快速,能够用于大批量实际样品的快速检测.

四苯硼钠和对苯苯酚协同增强化学发光的研究

目的 探讨四苯硼钠 (Sodiumtetraphenylborate ,NaTPB)和对苯苯酚 (Para phenyl phenol ,ppp)的协同增强作用。方法 应用流动注射化学发光分析技术对Luminol H2 O2 HRP增强发光体系中各组分的浓度进行初选及均匀设计优化 ,确定出该发光体系的最佳浓度组合。结果 鲁米诺为 6× 10 -4mol/L ,H2 O2 为 1× 10 -3 mol/L ,NaTPB为 6× 10 -4mol/L ,ppp为 4× 10 -4mol/L时协同增强作用最强 ;该发光体系用于流动注射化学发光测定时 ,检测限可达 8 46× 10 -12 g/mL ,分析灵敏度、重现性比两种增强剂单独使用时都高。结论 在一定条件下 。

酶连结增强化学发光法的实验研究

对溴酚可作为化学发光增强剂,增强辣根过氧化物酶催化的鲁米诺与H_2O_2的化学发光反应。据此建立酶连结增强化学发光法(ELECL),测定抗炭疽保护性抗原IgG,敏感度与BA-ELISA相当(T=0.935)。

增强化学发光法评价血清抗氧化能力的研究

利用对溴苯胺增敏Ｌｕｍｉｎｏｌ－ＨＲＰ－Ｈ２Ｏ２化学发光反应不断产生自由基中间体的机制，加入富含抗氧化剂的血清于反应体系，通过测定血清抑制化学发光的时间来评价血清的抗氧化能力．分析了２２个血清样品。

增强化学发光技术的发展和在生物学与医学中的实践

近年来增强化学发光技术得到快速发展,在生物学和医学中得到逐步应用,具有很大的应用价值。本文就增强化学发光技术的工作原理、增强化学发光的基因加测系统、增强化学发光的酶联免疫研究、增强化学发光的蛋白质检测系统、增强化学发光的寡核苷酸标记与检测系统进行全面分析,以促进增强化学发光技术在生物学与医学中的实践应用更加广泛。

增强化学发光法测定盐酸恩诺沙星的含量

目的采用增强化学发光法快速测定痕量盐酸恩诺沙星。方法利用加入Tb3+和盐酸恩诺沙星后可以使Ce4+-Na2SO3体系的化学发光显著增强的原理,测定盐酸恩诺沙星的含量。结果增强的化学发光强度与盐酸恩诺沙星0.1~10μg.mL-1和10~100μg.mL-1呈良好的线性关系(r分别为0.9984、0.9980),检测限为0.033μg.mL-1,RSD=1.29%(n=11)。结论所建方法快捷、简便、灵敏度高,测定了自制牛奶样品中盐酸恩诺沙星的含量,结果满意。

增强HRP化学发光酶联免疫分析研究进展

本文综述了近几年增强化学发光分析中,辣根过氧化物酶/鲁米诺/增强剂/过氧化氢(HRP/luminol/enhancer/H2O2)体系中各种增强剂的发现发展过程及其广泛应用,通过罗列比较协同增强剂、增强液、代谢物增强剂等不同时期不同类型的增强剂,得出当今增强剂的研发规律,指出未来新型增强剂的研发方向。

应用增强化学发光法分型检测肠毒素大肠埃希菌

应用增强化学发光法分型检测肠毒素大肠埃希菌蔡庆朱美财王蔚陈友纯肠毒素大肠埃希菌（ＥＴＥＣ）是引起人畜急性感染性腹泻的重要病原体。与人类腹泻密切相关的是不耐热肠毒素ｈ（ＬＴｈ）、耐热肠毒素Ⅰｂ（ＳＴⅠｂ）及耐热肠毒素Ⅰａ（ＳＴⅠａ）三种肠毒素菌株。我们...

流动注射化学发光增强法测定奶粉中铁

在碱性条件下,KIO4氧化鲁米诺产生化学发光,本文系统讨论了Fe(Ⅱ)对鲁米诺-KIO4化学发光体系的影响,发现在一定条件下,Fe(Ⅱ)对鲁米诺-KIO4化学发光体系有较强的增强作用。据此建立了流动注射化学发光增强法测定铁的分析方法。该法测定Fe(Ⅱ)的线性范围为5.0×10-6～5.0×10-9mol/L,检出限为4.4×10-10mol/L。对2.0×10-7mol/L的铁(Ⅱ)进行11次平行测定,得该法的相对标准偏差为2.3%。应用于成功地用于奶粉中铁的测定,结果满意。