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题名聚合酶链反应检测食品中的沙门氏菌
被引量:1
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作者
刘明远
卢强
陈贵连
柳增善
王礼文
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机构
解放军农牧大学食品微生物学教研室
江苏省中医院检验科
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出处
《山东肉类科技》
CAS
1994年第6期13-16,共4页
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文摘
参考沙门氏菌侵袭性基因invA的序列,设计合成一对引物扩增其中一段序列,建立了特异性检测沙门氏菌的PCR方法。引物两端分别加了Bam HI和EcoR I切点,扩增片段大小为300bp。对收集的50个血清型123株沙门氏菌及7种23株非沙门氏菌进行PCR检测,结果仅沙门氏菌有300bp的扩增产物,显示了很强的特异性,为下一步克隆而设计的两个酶切位点对引物的特异性没有影响。经琼脂糖凝胶电泳,PCR的检出极限是10pg染色体DNA和10~2 cfu的细菌。将扩增产物经slot—blot与辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的invA基因探针杂交,经增强型化学发光反应(ECL)及化学发光自显影(CPD)检测,可提高检测的敏感性一个数量级,同时增加了特异性。为推广应用,本文试验了8种模拟食品样品对PCR反应的影响,结果除奶酪外,其余都得到较好扩增。对120份污水及食品样品进行检测,该检测系统检出70份阳性结果,检出率高于常规分离。初步应用显示,PCR检测方法敏感、特异、简便、快速,适合于食品卫生检验和临床标本检验的现场应用。
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关键词
INV
A基困
聚合酶链反应
增强型化学发光反应
沙门氏菌检测
食品
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Keywords
invA Gene, PCR, BCL, Saltmnella Detection, Food
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分类号
TS207
[轻工技术与工程—食品科学]
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