circNRIP1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响研究

目的探讨环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)在宫颈癌组织中的表达,并初步考察其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法采用荧光定量PCR(qPCR)检测circNRIP1在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达水平,并通过细胞增殖实验(MTS法)、细胞划痕实验和Transwell Matrigel实验分别考察circNRIP1对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果与癌旁组织相比,circNRIP1在宫颈癌组织中的表达显著升高(P<0.001);circNRIP1在HeLa细胞系中表达水平最低,在SiHa细胞系中表达水平最高,与其他细胞系circNRIP1表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.001)。在SiHa细胞系中,与NC组比较,shRNA1、shRNA2、shRNA3慢病毒均可显著降低circNRIP1的表达水平,其中shRNA2的敲低能力最高,在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,circNRIP1在OV-cNRIP1组的表达水平更高(P<0.01)。MTS实验结果显示,在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞增殖能力更高(P<0.001);在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞增殖能力更低(P<0.001)。划痕实验结果显示,在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞迁移能力更低(P<0.001);在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞迁移能力显著增强(P<0.001);Transwell Matrigel实验结果显示,在SiHa细胞系中,与sh-NC组比较,sh-cNRIP1组的SiHa细胞穿膜数显著减少(P<0.001);在HeLa细胞系中,与OV-NC组比较,OV-cNRIP1组的HeLa细胞穿膜数显著增多(P<0.001)。结论circNRIP1在宫颈癌组织中的表达上调,circNRIP1能显著促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭。

己糖激酶结构域成分1基因敲除对人结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨己糖激酶结构域成分1(HKDC1)对人结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 HT-29、SW480细胞进行瞬时转染,设置HKDC1-si RNA组、阴性对照组及空白组。同时收集2020年3月至2022年5月河北北方学院附属第一医院接受手术的50例患者的结直肠癌组织和癌旁正常组织。RT-q PCR实验检测HKDC1 m RNA表达;Western blot实验检测HKDC1蛋白表达;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 HT-29细胞HKDC1 m RNA的表达量高于SW480细胞(P<0.05),故选取HT-29细胞株用于后续实验。结直肠癌组织中HKDC1 m RNA、光密度值高于癌旁正常组织(P<0.05)。空白组与阴性对照组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组光密度值比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组光密度值低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移率低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移数目比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移数目低于阴性对照组(P<0.05)。结论 HKDC1在结直肠癌组织及细胞中高表达,可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,有望成为结直肠癌基因治疗的新靶点。

布比卡因对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:探讨布比卡因对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人肝癌细胞Hep3B,分为空白对照组、100μmol/L布比卡因组、200μmol/L布比卡因组、400μmol/L布比卡因组,miR-阴性对照(NC)组、miR-143-3p组,抗miR-NC+400μmol/L布比卡因组、抗miR-143-3p+400μmol/L布比卡因组;分别采用MTT法、流式细胞仪、Transwell实验检测细胞增殖能力、细胞周期、迁移及侵袭能力;qRT-PCR法检测miR-143-3p表达情况;Western blot法检测CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,100、200、400μmol/L布比卡因组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平逐渐降低,S期细胞比例逐渐降低,迁移及侵袭细胞数逐渐减少,miR-143-3p表达水平和G1期细胞比例逐渐升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-143-3p组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低,迁移及侵袭细胞数减少,S期细胞比例降低,G1期细胞比例逐渐升高(P<0.05)。与抗miR-NC+400μmol/L布比卡因组比较,抗miR-143-3p+400μmol/L布比卡因组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高,迁移及侵袭细胞数增多,S期细胞比例升高,G1期细胞比例降低(P<0.05)。结论:布比卡因可通过调控miR-143-3p抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭,诱导细胞周期阻滞。

CRISPR/Cas9敲除pyk2基因对人脑胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

为了探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶(proline rich tyrosine kinase2,Pyk2)对人脑胶质瘤U251细胞增殖及侵袭能力的影响,设计了2对以pyk2为靶基因的sgRNA片段,以px335质粒为载体,构建CRISPR/Cas9重组质粒,转染至人脑胶质瘤U251细胞中,同时设置野生型U251细胞作为对照组。通过酶切鉴定及Western blot分析筛选阳性单克隆细胞,并测序揭示突变位点。筛选出的阳性单克隆细胞作为实验组,经RTCA法比较后,发现实验组细胞的增殖能力较对照组明显下降,且具有统计学意义(P<0.05);Transwell小室法及划痕实验的结果均证实,较对照组,实验组细胞的体外侵袭及迁移能力受到明显的抑制,差异显著(P<0.05)。作为验证侵袭能力的代表,基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)在Western blot实验中表达量较对照组也明显下降。通过上述方法成功得到目的基因敲除的稳定细胞株,并证实敲除pyk2基因能明显的抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

下调雌激素受体β对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的观察下调雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术构建低表达ERβ的A549细胞株及阴性对照细胞株(ERβ-siRNA1、ERβ-siRNA2、ERβ-siRNA3、ERβ-siRNA-NC),并采用qRT-PCR检测干扰效率。后将A549细胞分为5组:阴性对照组(NC组,转染ERβ-siRNA-NC)、DPN组(10^(-8) mol/L DPN)、ERβ敲低(si-ERβ)组(转染ERβ-siRNA)、DPN+si-ERβ组(转染ERβ-siRNA后给予10^(-8) mol/L DPN)、DPN+NC组(转染ERβ-siRNA-NC后给予10^(-8) mol/L DPN)。利用平板克隆形成实验和CCK-8检测下调ERβ对A549细胞增殖能力的影响;利用Transwell实验分别检测下调ERβ对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。结果不同siRNA干扰序列转染A549细胞后,qRT-PCR检测结果显示ERβ-siRNA3组ERβmRNA水平最低,差异有统计学意义(P<0.01),选择其用于后续实验。平板克隆形成实验结果显示,与NC组比较,DPN组细胞克隆计数增高(P<0.001);与DPN+NC组比较,DPN+si-ERβ组细胞克隆计数降低(P<0.001)。CCK-8结果显示,与NC组比较,DPN组在72 h和96 h的增殖率增高(P<0.001);与DPN+NC组比较,DPN+si-ERβ组在72 h和96 h的增殖率降低(P<0.001)。Transwell实验结果显示,与NC组比较,DPN组细胞的侵袭和迁移能力增高(P<0.01);与DPN+NC组比较,DPN+si-ERβ组细胞的侵袭和迁移能力降低。结论下调ERβ可在体外细胞层面拮抗DPN对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的促进作用。

miR-195对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探讨miR-195对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法以人胃癌细胞系SGC-7901细胞株及BGC-823细胞株为研究对象,分别转染miR-195模拟物及抑制物。应用实时荧光定量PCR技术,检测转染后miR-195 mRNA的表达水平。通过CCK8方法检测miR-195对胃癌细胞增殖的影响。通过Transwell实验检测miR-195对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。结果 (1)CCK8实验研究显示,与阴性对照(无关序列)相比,转染miR-195模拟物后,SGC-7901细胞的增殖能力减弱;转染miR-195抑制物后,BGC-823细胞的增殖能力明显增强。(2)Transwell小室实验研究显示,与阴性对照相比,转染miR-195模拟物后,SGC-7901细胞的迁移及侵袭能力明显下降;转染miR-195抑制物后,BGC-823细胞的迁移及侵袭能力明显增强。结论 miR-195在胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭中发挥重要的作用,miR-195可能成为治疗胃癌的靶基因。

沉默环状RNA hsa_circ_0001785表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:探究环状RNA(circR NA) hsa_circ_0001785在乳腺癌组织和细胞中的表达变化及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:qRT-PCR实验检测hsa_circ_0001785在乳腺癌组织和乳腺癌细胞(MDA-MB-231和SK-BP-3)中的相对表达水平; CCK-8和克隆形成实验检测沉默或上调表达hsa_circ_0001785对MDA-MB-231细胞活性和克隆形成能力的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测沉默或上调表达hsa_circ_0001785对MDA-MB-231细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:hsa_circ_0001785在乳腺癌组织中的相对表达水平明显高于癌旁组织,hsa_circ_0001785在MDA-MB-231和SK-BP-3细胞中的相对表达水平明显高于人乳腺上皮细胞MCF10A。在MDA-MB-231细胞沉默hsa_circ_0001785,MDAMB-231细胞的活性和克隆形成能力明显降低,迁移距离显著减少,侵袭能力也明显下降。而在MDA-MB-231细胞中上调表达hsa_circ_0001785,MDA-MB-231细胞的活性和克隆形成能力显著升高,迁移距离明显升高,侵袭能力也明显升高。结论:hsa_circ_0001785在乳腺癌组织和乳腺癌细胞(MDA-MB-231和SK-BP-3)中的表达水平明显升高;沉默hsa_circ_0001785显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力,而上调表达hsa_circ_0001785明显促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

干扰LASP1基因表达对胃癌细胞BGC823增殖、迁移及侵袭能力的影响

背景与目的:LASP1是一种新的肌动蛋白结合蛋白,参与细胞骨架的重组调控及细胞迁移,在多种恶性肿瘤中高表达,并与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。但目前LASP1在胃癌发生、发展中的作用少见报道。该研究旨在探讨LASP1在胃癌增殖和侵袭中的作用及分子机制。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测LASP1在不同胃癌细胞系中的表达,应用RNA干扰技术抑制BGC823细胞中LASP1的表达,采用RTFQ-PCR和Western blot检测转染后LASP1的表达,应用体外增殖、迁移和侵袭实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力,通过F-actin聚合实验检测细胞的F-actin的聚合能力,采用Western blot检测转染前后BGC823细胞中Akt的磷酸化情况。结果:LASP1在胃癌BGC823细胞中高表达。RNA干扰技术沉默LASP1基因后,干扰组与对照组相比,LASP1的m RNA和蛋白表达水平均明显下降。细胞增殖实验显示,干扰组细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验发现,与对照组相比,干扰组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05);在干扰组细胞内的F-actin聚合量比对照组减少(P<0.05);在干扰组细胞内Akt磷酸化受到抑制。结论:LASP1的表达降低可以抑制胃癌BGC823细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,LASP1通过调节F-actin的聚合和Akt磷酸化从而影响胃癌细胞的侵袭、转移。

丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响和作用机制

目的分析丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法将SKOV3细胞分为空白对照组(C组)、脂肪乳对照组(F组),以及按不同丙泊酚浓度(25、50、100μmol/L)干预分为P25组、P50组、P100组。CCK8实验检测不同组SKOV3细胞吸光度(OD)值评估细胞增殖活性;划痕实验、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭实验检测不同组SKOV3细胞迁移、凋亡、侵袭活性。细胞免疫荧光法和Western blot法检测各组SKOV3细胞中Yes相关蛋白(YAP)表达情况。结果各组SKOV3细胞48 h时OD值均高于本组24 h时,72 h时OD值均高于48 h时,差异均有统计学意义(P﹤0.05);24、48 h时,P50组、P100组SKOV3细胞OD值均低于C组、F组及P25组,P100组SKOV3细胞OD值均低于P50组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。P50组、P100组SKOV3细胞凋亡率均高于C组、F组及P25组,迁移率、侵袭数和迁移数均低于C组、F组及P25组,P100组SKOV3细胞凋亡率高于P50组,迁移率、侵袭数和迁移数均低于P50组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。P50组、P100组SKOV3细胞中YAP荧光强度及相对表达量均低于C组、F组及P25组,P100组SKOV3细胞中YAP荧光强度及相对表达量均低于P50组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论高浓度丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭有抑制作用,这种作用可能通过下调肿瘤细胞中YAP蛋白实现。

六氧化四砷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的观察六氧化四砷(As_4O_6)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,探讨其作用机制。方法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,不同浓度As_4O_6对细胞进行干预。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,半定量RT-PCR检测细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)、细胞周期蛋白A2(Cyclin A2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、p21和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)m RNA表达情况。结果 As_4O_6对MCF-7细胞增殖有明显抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.01);与对照组(0μmol/L)比较,As_4O_6浓度为9、12、15μmol/L时,MCF-7细胞凋亡率明显增加(P<0.05,P<0.01);As_4O_6高(3μmol/L)、低(1μmol/L)浓度均可有效抑制MCF-7细胞的迁移能力(P<0.01);随As_4O_6浓度增加,Cyclin E1、Caspase-3、p21 m RNA表达明显升高,Cyclin A2、MMP-9 m RNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 As_4O_6对乳腺癌MCF-7细胞增殖、周期、侵袭及迁移能力有明显抑制作用,其机制可能与增强Cyclin E1、Caspase-3、p21及抑制Cyclin A2、MMP-9 m RNA表达有关。

乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨不同浓度乳酸脱氢酶抑制剂Galloflavin(GF)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 体外培养肺腺癌A549细胞,实验分为对照组(无GF处理组)和实验组(GF处理组,浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L),分别使用CCK-8、划痕实验、Transwell法检测不同浓度GF在不同作用时间条件下对A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;分别使用乳酸脱氢酶活性检测试剂盒、乳酸定量试剂盒检测不同浓度GF对乳酸脱氢酶活性、乳酸生成量的影响。结果 CCK-8结果表明,GF对A549细胞具有增殖抑制作用,并且在一定浓度和时间范围内呈现出依赖性(P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞迁移率小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,迁移率逐渐降低(P<0.05)。Transwell结果表明,实验组细胞侵袭细胞数小于对照组(P<0.05),随着GF浓度的增加,侵袭细胞数逐渐减少(P<0.05)。乳酸脱氢酶活性检测结果表明,实验组乳酸脱氢酶活性较对照组显著降低(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸脱氢酶活性逐渐降低(P<0.05)。乳酸检测结果表明,实验组乳酸生成量较对照组显著减少(P<0.05),随着GF浓度的增加,乳酸生成量逐渐减少(P<0.05)。结论 GF在体外能够抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制可能是通过抑制乳酸脱氢酶活性从而抑制肺癌细胞糖酵解。

沉默YAP1可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力

目的探究沉默Yes相关蛋白1(YAP1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测YAP1在鼻咽癌细胞系中的表达水平;在鼻咽癌细胞S26和S18中转染3条合成的小干扰RNA:si-NC, siYAP1#1和si-YAP1#2,以转染阴性对照si-NC的细胞作为对照组,转染si-YAP1#1和si-YAP1#2的细胞作为实验组,实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后的干扰效率;通过细胞计数、平板克隆形成等方法评估转染si-YAP1#1和si-YAP1#2后的实验组和转染si-NC的对照组对鼻咽癌细胞增殖能力的影响;用划痕和Transwell方法分析各组细胞迁移与侵袭能力的变化;Western blot检测各组细胞中c-myc、上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)等与细胞增殖和上皮间质转化相关蛋白的表达变化。结果 YAP1在鼻咽癌细胞系中高表达;与阴性对照组相比,转染si-YAP1#1和siYAP1#2的实验组细胞中YAP1的mRNA及蛋白水平均显著降低(P<0.05);生长计数、平板克隆、划痕及Transwell等实验结果均显示转染si-YAP1#1和si-YAP1#2的实验组细胞的生长和克隆能力、划痕愈合能力及侵袭能力较阴性对照组细胞明显下降(P<0.01);且相较阴性对照组,实验组细胞中c-myc、N-cadherin和Vimentin等蛋白的表达水平降低,E-cadherin的表达量增加。结论 YAP1在鼻咽癌细胞系中高表达,在鼻咽癌细胞中利用siRNA靶向敲低YAP1的表达后可以抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示YAP1可以作为一个潜在的鼻咽癌临床治疗干预靶点。

干扰FGF4表达可抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力

目的探索干扰成纤维细胞生长因子4(fihmhlast growth factor 4,FGF4)表达对口腔鱗状细胞癌(oral squamous fell rarrinoma,0SCC)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响_,方法培养5株0SCC细胞株并检测FGF4 DMA拷贝数及mRNA的表达变化;转染siRNA干扰FGF4表达并进行验证;干扰FGF4表达后,采用CCK-8检测0SCC细胞株HSC-3、H3I4细胞增殖能力的变化,采用Transwell方法检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果同对照组相比,干扰FGF4表达后,HSC-3、H314细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。在HSC-3中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数分别下降了64.52%、66.81%;在H314细胞系中,FGF4siRNA-002组及siRNA-003组迁移细胞数下降了66.81%、82.01%。同对照组相比,在HSC-3中,FGF4siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了52.34%、49.89%。在H314中,FGF4 siRNA-002组及siRNA-003侵袭细胞数分别下降了75.3%、90.63%。结论在0SCC细胞中,干扰FGF4表达可抑制0SCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力.

下调脂肪酸合成酶表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究脂肪酸合成酶(FASN)表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移、侵袭的影响,探讨其内在可能机制。方法:免疫组化法检测30例膀胱癌和15例正常膀胱组织FASN蛋白的表达;用脂质体2000分别转染FASN siRNA和无义siRNA至UMUC3细胞,筛选、鉴定siFASN和siControl稳定的细胞,siFASN组细胞设为实验组,siControl组设为对照组;采用蛋白印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法分别检测siFASN组和siControl组细胞FASN蛋白及mRNA的表达,MTT法检测siFASN组和siControl组细胞增殖情况,划痕试验、Transwell试验分别检测siFASN组和siControl组细胞迁移、侵袭能力。结果:FASN蛋白在膀胱癌组织中过表达,且与病理分期、分级密切相关(P<0.05)。与siControl组相比,siFASN组细胞FASN mRNA及蛋白表达下调(P<0.05),细胞增殖活力明显下降(P<0.05),迁移能力明显下降(P<0.05),穿膜细胞数量明显减少(P<0.05)。结论:FASN过表达在膀胱癌发生、发展中发挥重要作用,下调FASN表达能抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,抑制FASN表达有望成为一种新的膀胱癌治疗方法。

UBE2T基因表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探讨泛素结合酶E2T(UBE2T)基因表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法选取鼻咽癌细胞系5-8F细胞,随机分为对照组、空白转染组和si-UBE2T组,其中空白转染组细胞转染空白载体,si-UBE2T组细胞转染UBE2T特异性siRNA载体,采用MTT法检测各组细胞增殖情况,采用Transwell迁移侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭,Western blotting法检测各组细胞UBE2T蛋白表达。结果 si-UBE2T组UBE2T蛋白相对表达量为(0. 354±0. 051),明显低于对照组和空白转染组(P <0. 05);si-UBE2T组培养第1 d、3 d和6 d吸光度值均低于对照组和空白转染组(P <0. 05);对照组和空白转染组培养第1d、3d和6d吸光度值比较差异无统计学意义(P> 0. 05);si-UBE2T组细胞迁移率和穿膜细胞数分别为(0. 322±0. 040)%和(85. 12±12. 06)个,明显低于对照组和空白转染组(P <0. 05);对照组和空白转染组UBE2T蛋白相对表达量、细胞迁移率和穿膜细胞数比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 UBE2T基因表达可促进鼻咽癌5-8F细胞增殖、侵袭及转移,有望成为鼻咽癌分支靶向治疗的靶标。

miR-612靶向调控FOXP1对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探讨微小RNA-612(miR-612)对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及分子机制。方法选择2020年6月至2021年6月在我院住院期间确诊为前列腺腺泡腺癌患者18例,收集标本通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测癌组织和癌旁组织中miR-612的表达情况;RT-qPCR检测多种前列腺癌细胞系中miR-612表达;双荧光素酶报告实验检测miR-612与靶基因叉头框蛋白P1(FOXP1)的关系;蛋白印迹检测前列腺癌细胞中FOXP1蛋白表达;MTT法、划痕试验、Transwell检测miR-612过表达和(或)FOXP1过表达对增殖、迁移和侵袭的影响。结果前列腺癌组织和细胞中miR-612的表达显着降低;miR-612过表达显著抑制前列腺癌PC3细胞增殖、迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验及蛋白印迹检测发现miR-612可靶向负性调控FOXP1的表达,进一步研究发现FOXP1过表达可促进前列腺癌PC3细胞增殖、迁移及侵袭能力;FOXP1过表达逆转了miR-612介导的对前列腺癌PC3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制。结论miR-612通过靶向FOXP1部分抑制前列腺癌PC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,miR-612/FOXP1轴可能成为前列腺癌的潜在治疗靶点。

雌激素受体β拮抗剂对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:观察雌激素受体β拮抗剂(PHTPP)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:利用MTT法筛选出PHTPP对A549细胞增殖产生作用的有效浓度和时间;利用平板克隆形成实验检测PHTPP对A549细胞增殖能力的影响;利用Transwell实验分别检测PHTPP对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:平板克隆实验结果显示PHTPP可拮抗雌激素受体β激动剂(DPN)对A549细胞增殖能力的提高(P<0.05)。Transwell实验结果显示PHTPP可拮抗DPN对A549细胞迁移和侵袭能力的提高(P<0.05)。结论:在体外,应用PHTPP可拮抗在激动雌激素受体β时,A549细胞所提高的增殖、迁移和侵袭能力。

Trim21对肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其机制研究

目的探究Trim21敲低及过表达对肾癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响以及相关机制。方法TCGA数据库分析Trim21的表达与肾细胞癌患者临床预后的关系;Western blot检测Trim21在HK2、786-O、ACHN、Ketr3细胞中的本底表达;敲低及过表达Trim21后,Western blot验证敲低及过表达效率,CCK8检测细胞增殖能力变化,Transwell、划痕实验检测细胞迁移、侵袭能力变化,Western blot检测上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白表达情况。结果TCGA数据库分析显示Trim21低表达患者的生存期较短;Western blot显示不同肾癌细胞系中均有Trim21的表达;敲低Trim21可增强肾癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,过表达Trim21限制肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力;敲低Trim21可下调E-cadherin,上调N-cadherin、Vimentin的表达;过表达Trim21结果则相反。结论Trim21可抑制肾癌细胞的增殖,并通过调控EMT相关蛋白表达,限制细胞的迁移及侵袭能力。

亚砷酸联合电离辐射对肝癌细胞株HepG2增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:探究亚砷酸联合电离辐射对肝癌细胞株HepG2增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:采用CCK-8及EdU法检测照射处理、亚砷酸处理及联合处理对HepG2细胞增殖能力的影响;采用Transwell法检测上述处理方法对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:肝癌细胞株HepG2经照射、亚砷酸或联合处理后,与对照组相比,增殖能力减弱,处于S期的细胞比例显著降低;迁移及侵袭能力也受到了显著的抑制,其中联合作用效果最明显。结论:亚砷酸联合电离辐射可显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)在宫颈癌细胞中的表达情况,并明确UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:首先查阅GEPIA数据库,了解UBE2C在宫颈癌中的表达;其次通过qRT-PCR和Western blotting法明确UBE2C在宫颈癌HeLa细胞及正常宫颈上皮细胞End1/E6E7中表达差异,然后分别构建si-UBE2C及si-NC转染宫颈癌HeLa细胞,检测转染后细胞中UBE2C mRNA和蛋白表达;最后采用CCK-8实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,并鉴定UBE2C下游靶基因PTEN、P-p53的表达情况。结果:UBE2C在宫颈癌中高表达,能够促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并下调抑癌基因PTEN、P-p53的表达。结论:UBE2C能够加重宫颈癌细胞恶性表型;UBE2C可能作为宫颈癌诊断及治疗的判定指标之一。