油茶组培苗高效增殖体系的建立

以油茶优良无性系"湘林1号"的茎段为外植体培养的无菌苗为材料,开展了无菌苗增殖培养研究,研究结果表明:基本培养基及外源激素均对油茶无菌苗增殖培养产生重要作用,以WPM为基本培养基,激素组合为6-BA5.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+生物素1.0 mg/L时,增殖系数达最高值3.90;以MS为基本培养基,激素组合为6-BA1.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+生物素0.5 mg/L时,新梢生长量达2.01 cm。

芦荟试管微克隆繁育中芽增殖体系的建立

研究了库拉索芦荟茎尖组织、叶盘组织和茎盘组织的离体培养特性,发现芦荟茎尖组织芽增殖效率较低,叶盘组织无再生能力,而茎盘组织是芦荟试管克隆芽增殖系建立的最佳外植体。利用茎盘组织建立微克隆增殖系与茎盘组织在茎段上的位置有关,库拉索短宿茎的中部茎段不定芽形成能力最强。细胞分裂素是诱导库拉索芦荟芽增殖的主要激素,但质量浓度过高,不定芽生长弱,玻璃化现象严重。1.0mg/L6-BA,1.5mg/LKT和0.5mg/LNAA组合的MB培养基(该培养基由MS培养基大量元素、微量元素、铁盐,B5培养基的有机物质构成)是库拉索芦荟试管苗增殖的最佳培养基。

白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

【目的】筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持。【方法】以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基。【结果】采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响。在原球茎诱导过程中,30.0μmol/m^2·s光照强度和25℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳。正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270。【结论】建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用。

银条不定芽诱导及高效增殖体系的建立

以"二细一粗"银条茎尖、叶片、茎段组织为外植体,研究了不同激素配比对其不定芽诱导与增殖效果的影响。结果表明,银条叶片组织未能再生;茎尖、茎段组织直接诱导较大不定芽的再生率较低,平均每个外植体最多可诱导不定芽5～7个。而通过茎段先诱导出不定芽芽团,再进行芽的伸长这一途径,每个外植体诱导的不定芽数平均可提高到14.3个,且芽团经5次继代后,增殖再生能力无衰退表现,且再生植株生产潜力非常巨大,是一条较优的再生途径。茎段不定芽芽团诱导培养基以添加6-BA5.0mg/L的MS培养基效果较好;增殖培养基以MS+6-BA4.5mg/L+GA31.0mg/L效果较好;不定芽伸长培养基以MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L+GA30.5mg/L较好。

栓皮栎胚性愈伤组织诱导及增殖体系的建立

由栓皮栎 1个月生的实生苗上采集幼叶和茎段做为外植体诱导胚性愈伤组织。结果表明,NAA和BA结合使用(茎段和带叶柄的叶片: 1. 0~2. 0mg·L-1 NAA+0. 5mg·L-1BA;不带叶柄的叶片: 2. 0~4. 0mg·L-1NAA+1. 0mg·L-1BA)诱导的愈伤组织质量好,胚性愈伤组织较多,增殖能力强。2, 4 D和KT结合使用 (最适配比为: 1. 0mg·L-1 2, 4 D+1. 0mg·L-1 KT),虽然诱导时间短,诱导率高,但是愈伤组织质量差,多呈水煮样组织,胚性愈伤组织少并且增殖能力差。最优的增殖培养体系激素组合为 0. 1mg·L-1 NAA+0. 1mg·L-1BA。

大花蕙兰腋芽增殖体系的建立

[目的]建立大花蕙兰腋芽增殖体系。[方法]以大花蕙兰的嫩芽为试材，研究大花蕙兰腋芽增殖的最佳条件。[结果]结果表明，腋芽增值的最佳培养基为B5＋6-BA3.0～4.0mg/L＋KT0.5mg/L＋NAA 0.1mg/L＋AD 2.0mg/L＋YE 100.0mg/L；生根阶段培养基为1/2MS＋2.0g/LAC＋0.3mg/L NAA生根效果好,生根率为90%，根数3～4条,6-BA添加与否影响不大。[结论]该试验通过腋芽增殖模式，遗传稳定性较高。

白芨试管苗高效增殖方法试验研究

以白芨(Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.)成熟未开裂的蒴果的种子为外植体,将白芨种子播种在含有不同浓度生长激素的培养基上,待种子萌发后,利用组织培养技术进行无性繁殖,研究不同生长激素浓度对种子萌发率、丛生芽增殖率、生根培养的影响,并进行炼苗移栽,建立了高效增殖体系.试验结果表明:1/2MS+1.0mg/L1-萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid,NAA)培养基最适于种子萌发,丛生芽在MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)培养基上增殖效果最好,1/2MS+0.5mg/LNAA培养基生根效果最好.炼苗基质为泥炭土:蛭石:珍珠岩(3∶1∶1),成活率可达90%以上.最适宜的炼苗温度是23℃~28℃,空气相对湿度是80%~90%时有利于提高炼苗成活率.

铁皮石斛原球茎高效增殖体系的构建

以铁皮石斛T4种群原球茎为试材,研究了原球茎团块直径、接种密度、不同激素配合及继代周期对原球茎的增殖和长势的影响,以期构建铁皮石斛原球茎的高效增殖体系。结果表明:在铁皮石斛原球茎的增殖过程中具有明显的群体效应,适当增大原球茎团块直径和接种密度有利于提高增殖率;不同浓度的激动素(KT)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)与萘乙酸(NAA)配合试验中,NAA 0.02mg/L+KT 0.5mg/L能更有效地促进原球茎的增殖和生长;铁皮石斛原球茎增殖培养的适宜继代周期是50d。

三叶青愈伤组织诱导增殖体系建立及天然有机物促进总黄酮合成的研究

目的建立三叶青愈伤组织诱导增殖体系,探讨不同天然有机物对三叶青愈伤组织中总黄®生物合成的影响,优化三叶青的培养体系,为植物细胞规模化生产三叶青总黄胡奠定基珀。方法以诱导率、增技率为指标,选择MS、6-BA、NAA浓度作为考察对象,采用正交试验方法确定三叶青愈伤组织最佳诱导增妞培养基;以总黄酮含量为指标,选择椰乳、土豆泥、香蕉泥浓度作为考察对象,研究天然有机物配比的浓度。结果最佳三叶青愈伤组织诱导培养基为2/3MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA,其诱导率为70%,增技率为85%,愈伤组织膨大,呈青绿色颗粒状,无褐化现象;发现天然有机物椰乳、土豆泥和香蕉泥均能提高三叶青愈伤组织中总黄酮的生物合成,确定最佳天然有机物配比组合为10%椰乳+150 g/L土豆泥+80g/L香蕉泥,其诱导三叶青愈伤组织总黄胡平均含量为59.256mg/g,较不添加天然有机物愈伤组织的总黄酮含量提高了49.88%。结论明确三叶青愈你组织的诱导培养体系,发现不同天然有机物的配比能有效提高三叶青愈伤组织中总黄酮含量,大幅缩短三叶青总黄玥的生产周期,为规模化生产三叶青总黄酮提供参考依据。