Pax2、增殖细胞核抗原、细胞凋亡在肾病综合征激素耐药中的作用

目的观察原发性肾病综合征(PNS)激素敏感与激素耐药组患儿Pax2、增殖细胞核抗原(PCNA)表达及细胞有效凋亡率,探讨Pax2在肾脏糖皮质激素(GC)耐药中的作用。方法采用免疫组织化学法观察PNS患儿40例肾活检组织Pax2、PCNA表达,采用荧光显微镜检测细胞凋亡。结果激素敏感组Pax2适量表达,与PCNA阳性表达呈正相关。激素耐药组,Pax2呈过度表达,与PCNA阳性表达无明显相关性。Pax2始终与细胞凋亡呈负相关。结论Pax2适量表达,通过促进细胞增殖及抑制凋亡,修复受损的小管-间质。Pax2过度表达,细胞增殖与凋亡进一步减少,导致肾小管病理改变加重,使其对激素不敏感甚至耐药。

增殖细胞核抗原反义核酸对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察增殖细胞核抗原 (PCNA)反义核酸对人肝癌细胞的抑增殖效应。 方法 设计针对 PCNAm RNA的 18个碱基的反义核酸 ,分反义组、正义组和空白组作用于 Hep G- 2肝癌细胞 ,MTT法和 3H- Td R掺入法观测肝癌细胞的生长抑制情况 ,流式细胞仪检测细胞周期的改变。 结果 反义组肝癌细胞生长受到明显抑制 ,抑制作用于培养 48h达高峰 ,达 5 0 %左右 ,72 h后减弱 ,96 h已基本消失。反义组肝癌细胞与空白对照组相比较 ,G0 /G1 期细胞增加 2 1.9% ,而 S期和 G2 / M期细胞分别减少 2 0 .3%和 5 9.5 %。 结论 PCNA反义核酸对 Hep G- 2肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用。

利用增殖细胞核抗原（PCNA）表达观察几种微量元素的抗增殖作用

利用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达观察几种微量元素的抗增殖作用钟小明，杨杏芬，庄志雄，张桥（中山医科大学，遗传毒理研究室）经口给予大鼠四氯化碳（ＣＣｌ４）５００μｇ／ｋｇ，每周二次，共六周（Ｘ２组）。做成肝损害模型。同时分别经拌入饲料喂饲锌（Ｘ４组４...

复方抗瘤冲剂抑制小鼠肉瘤180的生长及对p53和增殖细胞核抗原表达的影响

探讨复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤 180的作用及机制。通过体内实验 ,观察复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤180的抑瘤作用和免疫组化法检测p5 3和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平。结果显示 ,经复方抗瘤冲剂及其不同组合和CTX治疗 10天后 ,对小鼠肉瘤 180有不同程度的抑制作用 ,抑瘤率分别为 2 0 31%、6 5 6 %、12 5 %、19 0 6 %和 30 3%。同时各组药物对p5 3和PCNA的表达水平也有不同程度的影响。提示复方抗瘤冲剂对小鼠肉瘤 180的生长具有一定的抑制作用 ,其机制可能与抑制突变型p5

增殖细胞核抗原表达在晚期卵巢上皮癌化疗效果中的预测价值

目的:研究晚期卵巢上皮癌增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigenPCNA的表达与化疗效果的关系。方法:选择28例Ⅲ/Ⅳ期上皮性卵巢癌手术后继续行6个疗程以上化疗有效者及28例与之相匹配的化疗无效者手术时的卵巢癌标本,以免疫组化SP法检测PCNA的表达。结果化疗无效组与化疗有效组PCNA表达强度分别为32.14±19.27%23.18±16.38%,差异显著P<0.05。结论:PCNA在化疗反应不同的上皮性卵巢癌中表达不同,有可能成为卵巢癌化疗效果的预测指标。

诱导型一氧化氮合酶在结肠癌组织中表达及其与p53增殖细胞核抗原的相关关系

目的 :探讨诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的产物一氧化氮 (NO)在结肠癌癌变过程中可能作用机制 ,进一步研究结肠癌中iNOS、p5 3及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的相关关系。方法 :应用免疫组织化学检测 60例结肠癌、3 0例癌旁组织及 3 0例正常结肠粘膜中iNOS蛋白表达 ,同时检测 60例结肠癌中p5 3、PCNA蛋白表达。应用原位分子杂交方法检测 60例结肠癌中iNOSmRNA表达。结果 :60例结肠癌组织中iNOS表达阳性率为 75 % (4 5 60 ) ,3 0例癌旁组织中iNOS阳性表达率为 2 0 % (6 3 0 ) ,3 0例正常结肠粘膜组织中iNOS呈阴性表达。结肠癌组织中iNOS表达明显高于癌旁组织 ,统计学分析有显著性差异 (P <0 .0 1)。DukesA、B期iNOS蛋白及iNOSmRNA的表达明显高于DukesC、D期 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。iNOS表达与p5 3表达呈正相关 (r =0 .743 2 ,P <0 .0 0 1) ,iNOS表达与PCNA表达呈正相关 (r =0 .612 2 ,P <0 .0 5 )。结论 :iNOS在结肠癌组织中表达上调 ,提示iNOS可能在结肠粘膜细胞癌变过程中起重要作用。iNOS表达可促进结肠癌细胞增殖。iNOS的异常表达及抑癌基因p5 3的失活在结肠癌的癌变过程中起协同作用。

阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔肿瘤坏死因子-α和增殖细胞核抗原表达的影响

为探讨阿托伐他汀对粥样硬化家兔增殖细胞核抗原 (PCNA)和肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)表达的影响 ,将 18只家兔随机分为 :正常对照组、动脉粥样硬化 (AS)模型组和阿托伐他汀组 ,每组 6只。采用高脂饮食喂养法建立 AS模型 ,饲养 12周后处死 ,取胸主动脉行 HE染色 ,免疫组化染色法检测 PCNA和 TNF-α的抗原表达。结果显示 ,阿托伐他汀可以显著降低粥样硬化主动脉组织PCNA和 TNF-α的表达 ,这两种作用可能部分是通过抑制甲羟戊酸 (MVA)的合成这个共同的机制所引起。

增殖细胞核抗原与卵巢癌细胞系化学敏感性的关系

目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)与上皮性卵巢癌细胞系化学敏感性的关系。方法 使用顺为铂作用于A2780及AD60细胞株。在MTT法测定耐药倍数基础上,用ABC检测PCNA表达。结果 MTT测定AD60的耐药倍数为2.4。A2780 PCNA的表达低于AD60,且随药物浓度的递增染色较耐药组明显变浅。A2780、AD60相同药物浓度作用后PCNA的表达有显著性差异(P<0.01);同一细胞株不同药物浓度作用后PCNA表达有显著性差异(P<0.01)。结论 增殖细胞核抗原表达与上皮性卵巢癌细胞对细胞毒性药物的化学敏感性呈负相关。

荜茇提取物对大鼠骨髓间质干细胞MSC的增殖作用及与化学官能团的关系

目的:观察荜茇挥发油和水溶性部分对大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)体外增殖的影响,并进一步探讨了与分子中化学官能团的关系。方法:使用密度梯度法分离大鼠骨髓间质干细胞,体外培养,经Brdu标记和CD44染色及两者双重染色鉴定后,观察在培养液中添加不同浓度荜茇挥发油及其水溶性部分的条件下MSC的生长变化。应用形态学、MTT法和5-溴脱氧尿嘧啶(5-Bromodeoxyuridine,Brdu)、增殖细胞核抗原(Proliferationcellnuclearantigen,PCNA)免疫细胞化学方法测定细胞增殖活性。结果:荜茇挥发油以浓度依赖方式促进MSC增殖活力和增加Brdu、PCNA阳性细胞数,与对照组比较有显著性(P<0.05)。经GC-MS检测,荜茇挥发油含C=C(50.66%)、-OH(27.02%)、多种官能团(5.05%)等;而荜茇水提物对MSC无增殖作用。结论:荜茇挥发油明显促进MSC的增殖,这种作用可能与分子中C=C、-OH等官能团有关。

铜蒸气激光照射对血管平滑肌细胞凋亡的诱导作用及对其增殖的影响

目的 :研究 5 10 .6nm铜蒸气激光照射对体外培养的血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡的诱导作用 ,以及对增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响 ,探讨铜蒸气激光照射在经皮冠状动脉成形术 (PTCA)后再狭窄 (RS)的防治作用。方法 :贴块法培养兔VSMC ,5 10 .6nm铜蒸气激光照射后透射电镜观察凋亡细胞形态学改变 ,TUNEL法计数凋亡细胞 ,免疫组化染色法计数照光对PCNA阳性表达率的影响。结果 :激光照射后 ,VSMC凋亡率较未照光组增加 12 .8倍 ,而PCNA表达阳性率降低 2 7.9%倍 ;电镜下观察细胞呈典型的凋亡形态学改变。结论 :铜蒸气激光照射可以诱导VSMC凋亡 ,而且抑制其增殖 。

几种微量元素抗细胞增殖作用

几种微量元素抗细胞增殖作用钟小明杨杏芬庄志雄张桥中山医科大学（广州５１００８９）增生细胞核抗原ＰＣＮＡ（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅ－ａｒａｎｔｉｇｅｎ）存在于多种动物及组织中［１］，它以十分复杂的形式参与ＤＮＡ复制和细胞周期的过程［２...

顺铂对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用

目的 观察顺铂对HeLa细胞增殖、端粒酶活性及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响 ,以揭示顺铂抗宫颈癌的机理。 方法 运用体外细胞培养技术 ,以不同浓度的顺铂作用于培养的HeLa细胞 72小时 ,采用MTT法测定细胞代谢率 ,用端粒酶重复序列扩增 -酶联免疫吸附法 (TRAP -ELISA)检测细胞端粒酶活性 ,以流式细胞术观察PCNA的表达。 结果 顺铂能以浓度依赖方式减低细胞代谢率、下调端粒酶活性并降低PCNA的表达。细胞代谢率减低分别与端粒酶活性的下调 (r =0 .984 )和PCNA表达的降低 (r=0 .996 )均呈正相关 ,端粒酶活性的下调与PCNA表达的降低也呈正相关 (r=0 .993)。 结论 顺铂能显著抑制HeLa细胞增殖、下调端粒酶活性并使PCNA的表达降低 ,这可能是顺铂抗癌作用的重要机理之一。

天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖及其信号转导机制

目的:探讨天然药物榄香烯(Ele)、姜黄素(Cur)、雷公藤内酯醇(Tri)对重组人表皮生长因子(rhEGF)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及其信号转导机制. 方法:用rhEGF诱导体外培养的牛LEC增殖,将高、中、低不同浓度的Ele、Cur、Tri与增殖状态的LEC共同孵育后,进行以下研究:1、四甲基偶氮唑蓝法(MTT)法检测LEC增殖情况.2、流式细胞仪(FCM)检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达.3、荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度.4、放射免疫法检测LEC内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)含量.

慢性代谢性酸中毒显著诱导大鼠系膜细胞的增殖

目的:研究慢性代谢性酸中毒对大鼠肾小球体积、系膜细胞增殖、基质表达的影响及分子机制。方法:采用0·28mol/L NH4Cl喂饲大鼠构建大鼠慢性代谢性酸中毒模型。采用光镜结合图像分析软件观察和分析大鼠肾小球结构。从肾皮质分离大鼠肾小球,肾小球增殖细胞核抗原(PCAN)和p27的表达采用免疫组化和/或Westernblotting检测。肾皮质纤维连接蛋白(FN)mRNA的表达采用荧光定量RT-PCR检测。分别采用[3H]-TdR掺入法和ELISA方法检测了慢性酸负荷对体外培养的大鼠系膜细胞增殖及FN合成的影响。结果:各时点实验组大鼠动脉血pH、[HCO3-]均显著低于对照组(P<0·01)。第3、7、14d实验组大鼠肾重及肾/体重比值均显著大于对照组,而绝对体重与对照相比无显著差异;平均肾小球面积、肾小球丝球体面积、球内细胞总数以及系膜区细胞数均大于对照组(P<0·05),第14d大鼠肾小球系膜区面积与肾小球丝球体面积比值高于对照组(P<0·05);第3、7、14d Western blot-ting检测实验组大鼠肾小球PCNA表达增加,p27表达下调,免疫组织化学检测显示肾小球内阳性PCNA细胞主要位于系膜区;第7d、14d大鼠肾皮质FN mRNA的表达显著高于对照组(P<0·01)。体外系膜细胞[3H]-TdR掺入量随酸负荷强度而增高,酸负荷24h和48h,系膜细胞上清中FN含量显著增高。结论:慢性代谢性酸中毒能够诱导大鼠肾小球肥大、系膜细胞增生及细胞外基质增多,其机制与系膜细胞周期调控蛋白P27的表达下调有关。本研究为慢性代谢性酸中毒参与慢性肾小球疾病的硬化提供了体内和体外证据。

5-氟尿嘧啶术前化疗对胃癌细胞凋亡和增殖的影响

目的:观察应用5-氟尿嘧啶术前化疗对胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法:30例进展期胃癌患者术前应用5-氟尿嘧啶,周围静脉给药,750mg/d,连用5d后手术。对比分析术前胃镜活检及术后切取肿瘤组织细胞凋亡和增殖情况,分别应用TUNEL标记和免疫组化方法。结果:化疗后胃癌细胞凋亡总指数为(10·1±5·3)%,较化疗前凋亡总指数(6·9±3·0)%显著增高,P=0·026。高中分化腺癌组、肿瘤直径<4cm组、未浸及浆膜层组化疗前后凋亡指数差异明显。化疗后增殖总指数为(48·7±13·4)%,较化疗前增殖总指数(58·4±14·8)%显著降低,P=0·0035。化疗前后各组均差异有统计学意义。结论:5-氟尿嘧啶术前静脉化疗可诱导胃癌细胞凋亡,并有效抑制胃癌细胞增殖。5-氟尿嘧啶对分化程度高的胃癌诱导凋亡作用明显。

特发性少精子症生精细胞增殖与凋亡变化的研究

目的 探讨特发性少精子症患者睾丸生殖细胞增殖与凋亡的病理生理机制。方法 选择特发性少精子症患者79例,行睾丸穿刺活检,所取睾丸组织采用免疫组织化学技术观察生精细胞增殖细胞核抗原的表达,采用原位3'羟基末端标记法观察生殖细胞的凋亡变化。同时以5 例暴死男性的睾丸作为正常对照组,经病理证实组织结构无异常。结果 与正常睾丸生精细胞相比,特发性少精子症患者增殖细胞核抗原增殖指数明显降低, P<0.001;而凋亡指数明显升高,P<0.01。结论 特发性少精子症患者精子减少的主要原因之一是由于生精细胞增殖能力减少及凋亡增加造成增殖与凋亡的平衡失调所致。

食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡与增殖的研究

目的 :探讨食管鳞状细胞癌组织中细胞凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA )之间的关系及与食管癌发生、发展及预后的关系。方法 :47例原发性食管鳞癌手术切除标本为一组 ,2 0例正常食管黏膜组织为对照组 ,采用免疫组织化学方法及TUNEL法检测其PCNA的表达及细胞凋亡。结果 :癌组织中平均增殖指数 (PI)、平均凋亡指数(AI)及PI/AI比值均较正常组高 (P <0 0 5 )。PI随肿瘤病理分级及临床分期的增加以及淋巴结转移和浸润深度的增加而增高 (P <0 0 5 ) ;AI则随肿瘤病理分级的升高而降低 (P <0 0 5 ) ;PI/AI比值随肿瘤病理分级的升高及淋巴结的转移而增加 (P <0 0 5 )。食管鳞癌组织中PCNA高表达组 (PI >5 0 % )的术后 5年生存率低于PCNA低表达组(PI≤ 5 0 % ) (P <0 0 5 )。结论 :PCNA的异常表达状态能较好地反映食管鳞癌的浸润、转移能力 ,对预后判定有一定价值。增殖凋亡失衡贯穿于食管鳞癌发生、发展的整个过程 。

胃癌的发生与胃上皮细胞增殖和凋亡的相关性

目的 :探讨胃癌的发生演化过程中与胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡的相关性。方法 :采用免疫组化(LSAB法 )检测增殖细胞核抗原 ,原位末端标记法 (TUNEL)检测细胞凋亡。结果 :正常胃粘膜、萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生、胃癌的增殖指数分别为 ( 7 2± 2 1) % ,( 16 7± 6 5 ) % ,( 18 6± 8 2 ) % ,( 33 2± 9 0 ) % ,( 5 2 5±18 9) % ;凋亡指数分别为 ( 5 5± 1 9) % ,( 14 1± 5 7) % ,( 2 0 6± 6 6) % ,( 15 4± 3 2 ) % ,( 9 7± 4 2 ) %。结论 :胃粘膜癌变过程中 ,前 3个阶段增殖指数与凋亡指数同步上升 ,但在不典型增生期开始 ,增殖指数继续上升 ,而凋亡指数则逐步下降。