生物导向药物转化生长因子α-皂草毒素蛋白Saporin对增殖血管平滑肌细胞具有特异性的生长抑制作用

目的 :证实导向药物转化生长因子α 皂草毒素蛋白Saporin (TGFα SAP)对增殖血管平滑肌细胞特异性的生长抑制作用。 方法 :用SPDP化学联结的方法合成了导向药物TGFα SAP ,并以四唑盐 (MTS)比色法和3 H 胸腺嘧啶掺入法进一步探讨了TGFα SAP对血管平滑肌细胞增殖的作用 ,及对血管平滑肌细胞和内皮细胞DNA合成的影响。 结果 :实验显示TGFα SAP对血管平滑肌细胞的增殖有明显抑制作用 ,并可使其3 H 胸腺嘧啶掺入量降低 ,而皂草毒素蛋白Saporin显示的细胞毒性作用则很弱 ;同时TGFα SAP对增殖的内皮细胞的DNA合成几乎未显示明显的细胞毒性作用。 结论 :TGFα SAP通过表皮生长因子 (EGF)受体介导较皂草毒素蛋白Saporin具有了明显增强的细胞毒性作用 ,可选择性抑制血管平滑肌细胞的增殖而对内皮细胞未显示出明显的毒性作用。

粉防己碱对高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

探讨了粉防己碱 (Tet)抑制培养的大鼠主动脉平滑肌细胞 (AVSMC)增殖的作用 ,MTT法分析细胞增殖 ,[3 H]TdR参入法分析细胞DNA合成 .结果显示 :①肾血管性高血压〔RH ,二肾一夹 (2K1C)术后18周〕大鼠AVSMC超微结构呈典型的合成细胞特征 ;②RH大鼠AVSMC具有更活跃的增殖倾向 ,血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和去甲肾上腺素 (NE)刺激下指数增长期细胞数和在NE刺激下的AVSMC生长率均明显增高 ;③Tet(50mg·kg- 1·d- 1,po ,2K1C术后 9周始 ,连续 9周 )治疗组的AVSMC对NE和AngⅡ诱导的细胞增殖反应性和生长率较RH组明显降低 ;④对RH组和伪手术组大鼠的AVSMC ,Tet(0 .1～ 10μmol·L- 1)体外给药可浓度依赖性地抑制NE或AngⅡ诱导的增殖和 [3 H]TdR参入 .研究表明 ,RH大鼠AVSMC对NE和AngⅡ促增殖作用敏感性及反应性增高 ;Tet可降低其对NE和AngⅡ的反应性 ,抑制AVSMC增殖和DNA合成 .

芎芍胶囊对动脉粥样硬化兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究芎芍胶囊对实验性兔动脉粥样硬化(AS)血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法采用4F.Fogarty导管剥脱损伤腹主动脉内皮后继喂高脂饲料的方法,复制兔节段性AS模型。术后随机分为8组,即模型3天组、2周组、6周组,单纯内皮损伤组,普罗布考组,芎芍胶囊小剂量组、大剂量组及假手术组。除假手术组及单纯内皮损伤组外均予高脂饲料喂养,采用增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化方法分析腹主动脉病变最明显处新生内膜中VSMC增殖活性,透射电镜观察VSMC的表型转变及采用放射免疫法测定血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的水平,观察药物对其的影响。结果内皮损伤喂食高脂饲料3天(模型3天组),血浆AngⅡ水平逐渐升高,6周时(模型6周组)与假手术组比较差异显著(P<0.01);芎芍大剂量组血浆AngⅡ水平明显降低,与模型6周组比较差异显著(P<0.05);普罗布考组及芎芍小剂量组AngⅡ水平亦有降低的趋势,但与模型6周组比较差异无统计学意义。PCNA免疫组化染色结果显示,假手术组血管中未见PCNA阳性表达细胞,模型3天组内膜中有少量表达,模型2周组内膜细胞的阳性表达最多,模型6周组内膜明显增厚,但PCNA阳性表达有所下降,药物组阳性反应细胞数均明显减少,尤以芎芍大剂量组为著,与模型6周组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。透射电镜观察结果显示,假手术组兔腹主动脉中膜VSMC形态正常,模型3天组VSMC形态基本正常;但模型2周组,中膜VSMC已向内膜迁移;模型6周组,VSMC内脂质颗粒增多,有较大的空泡,细胞间胶原纤维增生更加明显,单纯内皮损伤组VSMC亦呈合成型改变,各用药组损伤血管新生内膜中合成型VSMC较模型6周组少,其中,普罗布考组与芎芍小剂量组VSMC内仍有较多脂滴,细胞间有较多胶原纤维增生,而芎芍大剂量组VSMC形态已基本正常,细胞间只有少量胶原纤维增生。结论芎芍胶囊可明显降低血浆AngⅡ水平,抑制VSMC的迁移、增殖,从而抑制AS的发生发展。

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖(英文)

目的本研究观察绿茶多酚对晚期糖基化终产物(AGEs)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,将不同剂量的绿茶多酚与AGEs共同作用并设立对照组进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果与对照组相比,晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。在晚期糖基化终产物刺激下,绿茶多酚可明显抑制血管平滑肌细胞的生长。AGEs对p44/42 MAPK磷酸化蛋白表达有显著的增强作用,此作用可被绿茶多酚抑制。结论本研究提示绿茶多酚可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖及p44/p42 MAPK磷酸化蛋白的表达。

多沙唑嗪抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的实验研究

为探讨多沙唑嗪对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用 ,将不同浓度的多沙唑嗪作用于体外培养的血管平滑肌细胞 ,采用氚 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR )掺入的方法检测平滑肌细胞的增殖。结果发现 ,多沙唑嗪能够抑制血管平滑肌细胞和不表达α1 受体的成纤维细胞的增殖。用不可逆的α1 受体阻滞剂酚苄明处理平滑肌细胞 ,多沙唑嗪仍表现为抑制增殖的作用。以上提示 ,多沙唑嗪对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用与其对α1

昆明山海棠提取物对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨昆明山海棠提取物 (THW 4 )对离体血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及凋亡的影响。方法培养家兔主动脉平滑肌细胞 ,加入不同浓度的THW 4进行处理 ,用MTT法测定细胞生长曲线 ,以AnnexinV FITC/PI双标记、透射电镜、原位末端标记法检测细胞凋亡。结果THW 4可以明显抑制VSMC增殖 ,呈剂量和时间依赖性 ,作用 4 8h的半有效抑制浓度 (IC50 )为 15 .6 μg/L ;VSMC在含 10～ 10 0 μg/LTHW 4的培养液中孵育 5 6h ,可检测到细胞早期凋亡 ,且凋亡率随THW 4浓度增加而升高 ;延长孵育时间至 72h ,透射电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态学改变 ,原位末端标记法显示DNA片段化增多 ,有核碎裂、固缩等改变 ;细胞周期时相分布显示THW 4主要阻滞VSMC于G2 /M期。结论THW 4能有效抑制体外培养的VSMC增殖及诱导其凋亡 ,提示THW

高胰岛素血症对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :观察胰岛素、内皮素 - 1 (ET - 1 )和胰岛素 +ET - 1对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和形态结构的影响。方法 :体外培养VSMC中分别加入 32 0mIU/L胰岛素 ,1 0 - 9mol/LET - 1 ,32 0mIU/L胰岛素加 1 0 - 9mol/LET - 1 ,通过细胞计数和 [3H] -TdR掺入量反映VSMC增殖情况 ,进行细胞形态学观察。结果 :①胰岛素和ET - 1都能促进VSMC的增殖 (均为P <0 0 5) ;②胰岛素和ET - 1的联合应用使VSMC增殖约是对照组的两倍 (P <0 0 1 ) ,二者的联合作用也明显强于胰岛素 (P <0 0 5)或ET - 1 (P <0 0 5)的单独作用 ;③ 3组VSMC均有不同程度出现形态结构的改变 ,由收缩表型转为合成表型。结论 :高胰岛素血症和 /或ET -

IL-10对尾加压素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :探讨白细胞介素 10 (interleukin 10 ,IL 10 )对血管活性肽尾加压素Ⅱ (urotensinⅡ ,UⅡ )诱导的大鼠血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖的影响及其作用机制。方法 :在培养的大鼠主动脉VSMC上 ,采用3H 胸腺嘧啶 (3H TdR)参入测定VSMCDNA合成速率 ,Westernblot及免疫沉淀法测定粘着斑激酶(focaladhensionkinase ,FAK)的表达及活性。结果 :IL 10 (10 -10 ～ 10 -8g·ml-1)呈浓度依赖的方式抑制UⅡ (10 -8mol·L-1)诱导的VSMC3H TdR参入增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)和FAK的活性上调 (P <0 .0 5 ) ,但各组间FAK的蛋白表达差异无显著性。结论 :IL 10可能通过抑制FAK活性的上调 。

血管平滑肌细胞增殖信号转导通路与血管再狭窄防治

上游激活蛋白(Ras)信号通路与血管再狭窄的发生有着十分密切的关系。雷帕霉素和紫杉醇等药物涂层支架主要通过抑制Ras下游的信号转导发挥抗细胞增殖作用。新基因M fn2可直接抑制Ras,其抑制点更高,效果更明显,因而可望用于研制基因涂层球囊与基因涂层支架,从而成为血管再狭窄等血管增殖性疾病基因治疗的新靶点。

柿叶黄酮抑制LDL刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的 :观察柿叶黄酮对低密度脂蛋白 (LDL)刺激时离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 :体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,LDL刺激时 ,应用不同剂量的柿叶黄酮作用 2 4h后 ,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果 :与对照组相比 ,LDL可以明显刺激大鼠血管平滑肌细胞的增殖 ,柿叶黄酮对LDL刺激下的大鼠血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用 (P <0 0 5 ) ,并呈现剂量依赖性。结论

苦参碱对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖及超微结构变化的作用

为研究筛选抗高血压血管重构药物，在建立兔主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）体外培养方法的基础上.运用结晶紫染色法、3H-TdR掺入法及透射电镜，观察苦参碱（Mat）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的VSMC增殖及超微结构变化的作用。结果显示：AngⅡ能明显刺激VSMC增殖，引超VSMC肥大、高尔基体等细胞器增多。Mat低、中、高剂量组都能对抗AngⅡ的病理作用，且呈良好的量效关系.与雷米普利（Rap）组相比无明显差异。

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制

目的探讨川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖模型,用酶促反应定磷法观察不同浓度的川芎嗪在不同时段内对血管平滑肌细胞中钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性的影响。结果与正常对照组比较,血管紧张素Ⅱ组能够明显刺激血管平滑肌细胞增殖,血管紧张素Ⅱ处理的血管平滑肌细胞的钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性及细胞增殖活度均较正常对照组显著增高(P<0.01)。同时加川芎嗪处理后,各组钙调蛋白和钙调神经磷酸酶活性均显著下降(P<0.01)。结论川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖有显著抑制作用,其抑制机制可能与其干预钙调神经磷酸酶依赖的信号转导途径有关。

诺考达唑抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用及机制

目的研究诺考达唑抑制大鼠血管平滑肌细胞(rVSMCs)的作用及机制。方法将rVSMCs分为A、B、C、D 4组,A组常规培养,B组无血清培养24 h,C组无血清培养48 h后常规培养18 h,D组先后加入胸腺嘧啶核苷(工作浓度为0.05 g·mL-1)作用12 h后再加入诺考达唑(工作浓度为0.05 g·mL-1)继续维持12 h。分别进行细胞周期的检测,观察细胞超微结构的变化,检测糖代谢、氨基酸代谢与ATP以及NAD/NADH的变化以及线粒体融合蛋白2(Mfn-2)的表达。结果流式细胞术检测结果显示B、C、D组细胞分别阻滞于G0/G1期,S期及G2/M期。电子显微镜检测显示D组线粒体的数量减少,体积缩小。D组与A组及C组相比,糖代谢、氨基酸代谢均显著降低,ATP的产生明显减少,NADH的生成显著增加(P<0.05)。Western Blot示G2/M期细胞阻滞与诺考达唑均可导致Mfn-2表达增高(P<0.05)。结论诺考达唑可明显降低rVSMCs能量代谢,阻断rVSMCs的增殖状态,可能与Mfn-2抗动脉粥样硬化的作用有关。

灯盏花素对兔血管平滑肌细胞增殖的影响

观察灯盏花素对兔血管平滑肌细胞生长增殖、细胞超微结构及其细胞周期和核因子κB活性的影响 ,以探讨其药理机制。胎牛血清刺激体外培养的兔血管平滑肌细胞使其快速增殖生长 ,加入不同浓度的灯盏花素作用一定时间后 ,通过MTT法测定灯盏花素对血管平滑肌细胞生长的抑制率 ,流式细胞技术测定细胞周期和核因子κB活性以及用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果发现 ,灯盏花素能明显抑制胎牛血清刺激的血管平滑肌细胞增殖 (IC5 0为 17.9mg L) ,并改变细胞的超微结构 ,包括使细胞电子密度增大 ,部分胞膜断裂 ,粗面内质网和高尔基体呈空泡状扩张 ,部分线粒体呈凝固性变化 ,嵴减少或消失 ,或呈凝固性坏死。灯盏花素还以浓度依赖方式减少S期细胞 ,阻滞细胞于G0 G1 期 ,并下调核因子κB活性。结果提示 ,灯盏花素能显著抑制血管平滑肌细胞的增殖生长 ,可能具有抗动脉粥样硬化的作用 ,其作用机理可能部分是通过调控血管平滑肌细胞核因子κB活性来实现的。

大黄素对人血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察大黄素对人血管平滑肌细胞周期时相和cyclin D1表达的影响,探讨大黄素抑制平滑肌细胞增殖的作用机制。方法 取对数增长期的平滑肌细胞同步于G0期,药物组:加入含37.5mg·L-1大黄素10％胎牛血清的培养液,对照组:仅加入10％胎牛血清的培养液;作用12、24、36、48 h后分别用流式细胞仪和Westemblot法进行细胞周期时相和cyclin D1表达的测定。结果 与对照组比较,药物组在各相同时间点C0/G1期细胞百分比升高,S期细胞百分比下降,且随着时间的延长差值增大,cyclin D1表达高峰延迟,表达量下调,细胞周期受阻于G0/G1期。结论 大黄素在抑制平滑肌细胞增殖的过程中通过下调,cyclin D1表达,从而阻滞细胞周期进程。

海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究海带多糖硫酸酯WPS、WPS-1、WPS-2和WPS-3对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法:采用组织贴块法培养VSMC并用免疫组织化学染色法对VSMC进行鉴定;采用bFGF诱导VSMC增殖;以MTT法检测海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的VSMC增殖的影响;黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶产超氧阴离子自由基(O2-.)体系测定海带多糖硫酸酯对O2-.的清除力。结果:在0.1～1mg/mL质量浓度范围内,WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖具有抑制作用,其中WPS的增殖抑制性表现显著。WPS-2则对VSMC增殖基本无影响。在O2-.清除力上,WPS-2对O2-.清除率仅为34%,而其他组分自由基清除率均超过70%。结论:WPS、WPS-1和WPS-3对bFGF诱导的VSMC增殖均有显著抑制作用,且抑制作用可能与它们的自由基清除能力相关。

胰岛素影响自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及肌动蛋白分布的丝裂原激酶的机制探讨

血管平滑肌细胞增殖的同时伴有细胞内肌动蛋白分布的改变 ,这种改变受PKC MAPK信号转导途径调控 ,但目前机制尚不清楚。为探讨胰岛素对PKC MAPK信号转导途径参与调控血管平滑肌细胞增殖及细胞内肌动蛋白分布的影响 ,本研究用PKC抑制剂预处理SHR大鼠体外培养的血管平滑肌细胞 ,观察预处理的血管平滑肌细胞经胰岛素刺激后细胞内DNA的合成、MAPK的活性、表达及细胞内肌动蛋白的分布。发现 ,胰岛素刺激后可使血管平滑肌细胞增殖 ,同时伴有 [3 H]TdR掺入增加、MAPK活性及表达与对照组比较明显升高。这些作用可被PKC抑制剂阻断。胰岛素在刺激血管平滑肌细胞增殖的同时也使细胞内肌动蛋白重新分布 ,这一效应也可被PKC抑制剂阻断。上述结果提示 。

Ang Ⅱ促进大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移

血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的增殖、迁移和细胞外基质的合成是高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等血管重塑性疾病发生、发展的重要细胞病理学基础[1]。血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）的促生长作用参与了高血压、动脉粥样硬化、血管再狭窄等血管增殖性疾病的发生和发展。