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蛋白酶体抑制剂对肾间质成纤维细胞凋亡和增殖的影响
被引量:
5
1
作者
朱冰冰
靳远萌
+2 位作者
章慧娣
王伟铭
陈楠
《肾脏病与透析肾移植杂志》
CAS
CSCD
2007年第5期441-446,共6页
目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)及其在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的细胞凋亡和增殖情况,并初步探索其机制。方法:采用5ng/ml的TGF-β1作用于NRK-49F,不同浓度(0~5μM)的蛋白酶体...
目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)及其在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的细胞凋亡和增殖情况,并初步探索其机制。方法:采用5ng/ml的TGF-β1作用于NRK-49F,不同浓度(0~5μM)的蛋白酶体抑制剂MG-132预处理NRK-49F细胞,应用MTT法检测其增殖情况,LDH法检测细胞毒性,应用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态学变化,Westernblot检测p-IKβ1IKB蛋白的变化。结果:TGF-Bl(5ng/m1)能促进NRK-49F的增殖(0.661±0.04猫0.495±0.06),MG-132(O.25—5μM)呈剂量依赖型抑制这种效应;MG-132(0.1—5μM)对NRK-49F有一定的细胞毒性作用,在0.5μM时达高峰;TGF-β1单独不能促使NRK-49F的凋亡[(3.8±0.4)%摊(4.7±1.6)%],但加用MG.132(0.1—2.5μM)干预后呈剂量依赖关系促进细胞凋亡,MG-132单独也有促进细胞凋亡作用;MG-132(0~1斗M)作用于TGF-β1诱导的NRK-49F后,其S期比例呈剂量依赖关系显著减少,G1期细胞比例增加;Hoechst33258染色显示MG.132(0.5μM)+TGF-β1组及MG-132组细胞核均出现核固缩、核碎裂、凋亡小体等凋亡特异形态学改变;Westernblot结果显示,TGF-β1及MG-132(2.5μM)+TGF-β1均能以时间依赖方式诱导p-IKB、IKB蛋白表达增加,且MG-132能上调TGF-β1诱导下的p-Iκβ, IκB蛋白表达。结论:泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对正常及病理状态下的NRK-49F都有促凋亡作用,并可能通过G1期阻滞过程来抑制其增殖作用。其机制可能与MG-132阻断IKB蛋白的泛素化降解有关。
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关键词
蛋白酶体抑制剂
转化生长因子Β
肾间质成纤维细胞
凋亡
增殖iκb
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职称材料
题名
蛋白酶体抑制剂对肾间质成纤维细胞凋亡和增殖的影响
被引量:
5
1
作者
朱冰冰
靳远萌
章慧娣
王伟铭
陈楠
机构
上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科
出处
《肾脏病与透析肾移植杂志》
CAS
CSCD
2007年第5期441-446,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30270613
30771000)
+2 种基金
上海市重点学科(T0201)
上海市卫生局重点课题(2003ZD002)
上海市卫生局重点学科基金(05Ⅲ001)
文摘
目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)及其在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下的细胞凋亡和增殖情况,并初步探索其机制。方法:采用5ng/ml的TGF-β1作用于NRK-49F,不同浓度(0~5μM)的蛋白酶体抑制剂MG-132预处理NRK-49F细胞,应用MTT法检测其增殖情况,LDH法检测细胞毒性,应用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态学变化,Westernblot检测p-IKβ1IKB蛋白的变化。结果:TGF-Bl(5ng/m1)能促进NRK-49F的增殖(0.661±0.04猫0.495±0.06),MG-132(O.25—5μM)呈剂量依赖型抑制这种效应;MG-132(0.1—5μM)对NRK-49F有一定的细胞毒性作用,在0.5μM时达高峰;TGF-β1单独不能促使NRK-49F的凋亡[(3.8±0.4)%摊(4.7±1.6)%],但加用MG.132(0.1—2.5μM)干预后呈剂量依赖关系促进细胞凋亡,MG-132单独也有促进细胞凋亡作用;MG-132(0~1斗M)作用于TGF-β1诱导的NRK-49F后,其S期比例呈剂量依赖关系显著减少,G1期细胞比例增加;Hoechst33258染色显示MG.132(0.5μM)+TGF-β1组及MG-132组细胞核均出现核固缩、核碎裂、凋亡小体等凋亡特异形态学改变;Westernblot结果显示,TGF-β1及MG-132(2.5μM)+TGF-β1均能以时间依赖方式诱导p-IKB、IKB蛋白表达增加,且MG-132能上调TGF-β1诱导下的p-Iκβ, IκB蛋白表达。结论:泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对正常及病理状态下的NRK-49F都有促凋亡作用,并可能通过G1期阻滞过程来抑制其增殖作用。其机制可能与MG-132阻断IKB蛋白的泛素化降解有关。
关键词
蛋白酶体抑制剂
转化生长因子Β
肾间质成纤维细胞
凋亡
增殖iκb
Keywords
proteasome inhi
b
itor transforming growth factor β1 renal interstitial fi
b
ro
b
last apoptosis proliferation
iκb
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
蛋白酶体抑制剂对肾间质成纤维细胞凋亡和增殖的影响
朱冰冰
靳远萌
章慧娣
王伟铭
陈楠
《肾脏病与透析肾移植杂志》
CAS
CSCD
2007
5
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