嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌增菌培养研究

对传统酸奶发酵剂菌种嗜热链球菌 (L N- 6 )和保加利亚乳杆菌 (L N- 8)的基础培养基和生长促进物质分别进行了研究。结果表明 ,无脂乳固体为 110 g/kg的脱脂乳作为基础培养基效果较好 ,L N- 6和 L N- 8的活菌数分别为 2 .8× 10 8和 1.9× 10 8m L- 1。生长促进物质番茄汁、猕猴桃汁、肝浸汁对 L N- 6有一定的抑制作用 ,蜜桔汁和酵母膏则有较明显的促进作用。对 L N-

冻干乳酸菌菌种增菌培养基的优化

发酵剂是影响整个酸奶生产的关键因素之一,冷冻干燥乳酸菌发酵剂的使用简化了乳品企业的生产工艺,提高了企业产品质量,避免了因微生物力量不足而造成的菌种质量不佳等问题。确定的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的增菌配方分别为:胰蛋白胨质量分数0.5％,葡萄糖质量分数1％,酵母粉质量分数0.7,鱼肉蛋白胨质量分数0.5％,乳糖质量分数1％,酵母粉质量分数0.3％;培养后菌数达到108mL-1。

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。

保加利亚乳杆菌番茄复合汁增菌培养基的优选研究

研究了在番茄汁基础培养基中添加不同营养物质对保加利亚乳杆菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了保加利亚乳杆菌L.b-S1的增殖培养基。结果表明,在番茄汁基础培养基中添加胰蛋白胨、酵母膏、碳酸钙可显著促进试验菌株的细胞生长(P<0.01);利用L933正交试验筛选出增殖培养基的最佳配比为:在番茄汁基础培养基中添加0.5%酵母膏、1.0%胰蛋白胨、0.3%碳酸钙;试验菌株在增殖培养基中经37℃培养18h,活菌数可达为2.25×1010mL-1,较液体MRS培养基的活菌数(4.98×108mL-1)提高了45.18倍,成本较液体MRS培养基降低1500元/t。为工业化大规模培养乳酸菌并研制开发直投式酸奶发酵剂提供了经济廉价的增菌培养基。

嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌麦芽复合汁增菌培养基的优化筛选

研究了在麦芽汁中添加不同的营养因子对嗜热链球菌S.t-3的细胞生长量的影响,进一步采用正交试验优化筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基,并对保加利亚乳杆菌L.b-DR和L.b-S1进行了验证性增菌试验。结果表明,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1在麦芽汁中能进行正常的产酸代谢,大豆蛋白胨、牛肉膏、酵母膏可显著促进S.t-3的细胞生长(P<0.05);K2HPO4不仅可以促进菌体增殖,而且还可缓冲基质pH值的变化,避免了低pH值对乳酸菌的伤害;利用L9(33)正交试验,筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基最佳配比为:在10%的麦芽汁中添加0.5%大豆蛋白胨、0.5%酵母膏、1%牛肉膏、0.2%K2HPO4;在麦芽复合汁增菌培养基中,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1,37℃恒温培养16 h,活菌数分别为2.42×109cfu/mL、2.85×109cfu/mL和4.81×109cfu/mL,与液体MRS培养基的活菌数相当,成本较MRS培养基降低1 000元人民币/t。

双歧杆菌麦芽复合汁增菌培养基优选的研究

选择麦芽汁为主要原料,以两歧双歧杆菌Bbm和长双歧杆菌Blm为实验菌株,研究了麦芽汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响,进一步利用正交试验优化筛选出Bbm菌麦芽复合汁增菌培养基;利用优选的麦芽复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明:大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖(p<0.01),而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长,又有缓冲培养基pH值的作用;利用L9(34)筛选出Bbm的麦芽复合汁增菌培养基的最佳配比为:在10°麦芽汁中添加0.3%大豆蛋白胨,0.6%牛肉浸膏,0.5%酵母膏,0.4%玉米浆,0.2%磷酸氢二钾,在麦芽复合汁增菌培养基中,经37℃培养12h,Bbm活菌数3.84×109CFU/ml,Blm活菌数达到3.90×109CFU/ml,较对照麦芽汁培养基的活菌数分别提高了8.17倍和8.14倍,较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低1000元/吨。

直投式乳酸菌发酵剂增菌培养基的优化

为制备直投式乳酸菌发酵剂,本实验通过对碳氮源、营养因子及缓冲盐类进行优化实验,确定了嗜酸乳杆菌ATCC4356增菌培养基的配方为:在改良MRS培养基的基础上,添加10%番茄汁,10%胡萝卜汁,10%平菇汁,0.1g/100mlCaCO3,0.5g/100mlNaAc。将此菌在此增菌培养基上培养,在37℃下培养10h,菌数可达到8.56×109cfu/ml,与普通液体发酵剂相比,获得了显著的浓缩效果。

双歧杆菌胡萝卜复合汁增菌培养基的优化筛选

选择胡萝卜为主要原料,以两歧双歧杆菌(Bbm)和长双歧杆菌(Blm)为试验菌株,研究了胡萝卜汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响,进一步利用正交实验筛选出Bbm菌胡萝卜复合汁增菌培养基;利用优选的胡萝卜复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明:大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖(P<0.01)而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长,又有缓冲培养基pH值的作用;利用L934筛选出Bbm的胡萝卜复合汁增菌培养基的最佳配比为:在胡萝卜汁中添加0.3%大豆蛋白胨,0.6%牛肉浸膏,0.5%酵母膏,0.4%玉米浆,0.2%磷酸氢二钾,将此培养基经37℃培养12 h,Bbm活菌数4.75×109cfu/mL,Blm活菌数4.82×109cfu/mL。

直投式酸奶发酵剂增菌培养基的优化

在基础培养基的基础上确定了嗜热链球菌(S.t)和保加利亚乳杆菌(L.b)的增菌配方分别为:S.t(平菇浸汁14mL、胡萝卜汁10mL,玉米浆0.6mL,Vc0.2g)和L.b(啤酒10mL,番茄汁10mL,胡萝卜汁15mL,平菇浸汁16mL);同时测定了其最佳培养时间。

冻干保加利亚乳杆菌增菌培养基的筛选

本文采用正交实验对冻干保加利亚乳杆菌的增菌培养基进行了筛选,研究了保加利亚乳杆菌在增菌培养基中的活菌数及菌活力,以寻找冻干保加利亚乳杆菌发酵的最适收获期。结果表明:冻干保加利亚乳杆菌的增菌培养基为:MRS基础培养基、麦芽汁体积分数为10%、番茄汁体积分数10%、CaCO3的质量分数为0.05%、乳糖的质量分数为1.0%。保加利亚乳杆菌的最适收获期为发酵18h,此时为对数生长期后期,活菌数为3.96×1011cfu/g,OD值为0.922,菌活力为500T、pH4.46。增菌培养基增菌效果明显,经增菌培养基培养所得活菌数是基础培养基的202倍,且菌活力也较基础培养基强,OD值和滴定酸度分别是基础培养基的5.6倍和1.3倍。

一种能同时富集沙门菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养基

研究设计出一种能同时富集培养沙门菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的缓冲盐水肉汤(buffed saline broth,BSB),主要组分和含量为:蛋白胨10g、牛肉膏3g、磷酸氢二钠9g、磷酸二氢钾1.5g、添加剂50g、蒸馏水定容至1000mL,pH7.2。将1cfu/mL的上述3种菌同时分别接种到97mLBSB、蛋白缓冲水、乳糖肉汤、营养肉汤、大肠杆菌肉汤、氯化镁孔雀绿增菌液、7.5%氯化钠肉汤增菌培养基中,37℃增菌18h。结果表明BSB能使这3种菌以相对一致的速度增殖,分别达到106、106、107cfu/mL,并且多重PCR能同时分别扩增沙门菌invA基因284bp、大肠杆菌phoA基因622bp和金黄色葡萄球菌nuc基因484bp的特异性条带。相反,其他几种培养基则不能同时协调增殖上述3种菌。这些结果表明,BSB有较好的应用前景。

响应面法优化副溶血性弧菌增菌培养基

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是我国食源性疾病的首要致病因素,是海产品上市前的必检微生物.某种意义上讲,检测的增菌时间决定了海产品的质量安全性和市场价值.为缩短增菌时间,采用单因素试验和响应面分析法优化Vp培养条件和增菌培养基.单因素分析确定最适于Vp(ATCC 17802)生长的温度、氧浓度和培养方式分别为37℃、透气胶塞和摇床培养.以混合蛋白胨、牛肉膏、Na Cl为主要影响因素,利用Design-Expert 8.0软件的BoxBehnken设计进行增菌培养基优化,得到的二次回归方程具有很高的拟合性,优化的培养基配方为:酪蛋白胨6.75 g/L、胰蛋白胨3.25 g/L、牛肉膏4.76 g/L、Na Cl 36.75 g/L.利用优化培养基对模型进行验证,培养12 h的Vp菌体密度可达模型最大预测值的98.77%,说明获得的模型可以对ATCC17802的生长动态进行预测和分析.

瑞士乳杆菌增菌培养基的筛选

以冻干后菌体的存活率为依据,首先筛选出存活率最高的瑞士乳杆菌基础培养基为10%的脱脂乳培养基;然后分别采用单因素实验和正交实验,优化培养基成分及用量;最后确定瑞士乳杆菌的增菌培养基配方为:10%脱脂乳+0.1%乳糖+1.0%酵母膏+10%麦芽汁+1.0g/100mL柠檬酸三钠。在此优化培养基中,瑞士乳杆菌培养至10h左右,其活菌数可达8.16×109cfu/mL。

婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌增菌培养对PCR快速检测的影响

通过人工染菌方法,比较添加不同奶粉基质、不同初始菌量、不同增菌培养时间及添加不同干扰菌的情况下,阪崎肠杆菌的生长增殖变化,研究适合阪崎肠杆菌快速检测的最佳增菌时间。随着初始菌量的降低,阪崎肠杆菌生长延滞期延长,当初始菌量为1~9CFU/1 000 mL,阪崎肠杆菌增殖到10^(3)CFU/mL约需要10 h;含有奶粉基质的增菌液中目标菌增殖速度低于未添加奶粉的增菌液中的增殖速度;采用荧光PCR方法检测添加干扰菌后的阪崎肠杆菌的生长情况,含有大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的增菌液在培养10 h可以检出阪崎肠杆菌,而添加阴沟肠杆菌的BPW增菌液需培养12 h能检出阪崎肠杆菌。因此,对幼儿乳粉增菌培养12 h后,对其增菌液进行PCR检测,即可快速且有效地检出阪崎肠杆菌。

中心组合设计优化嗜酸乳杆菌NCU402增菌培养基

为筛选优化适合嗜酸乳杆菌La NCU402高密度培养的增菌培养基,通过单因素法筛选基础优化培养基、二水平部分因子设计(two-level fractional factorial design,FFD)获得最大影响因子、最速上升法(steepest ascent,SA)试验获得最优点区域以及中心组合设计进行响应面分析得到最适增菌培养基。优化培养基配方为:葡萄糖1.5%、蛋白胨1%、牛肉膏1.458 4%、酵母粉0.4%、柠檬酸三铵0.2%、K2HPO4·7H2O 0.2%、Mg SO4·7H2O 0.02%、Mn SO4·4H2O 0.005%、Na Ac·3H2O 0.5%、乳糖1.766 5%、番茄汁31.602 9%、吐温80 0.1%;由此培养得到的活菌浓度可达到2.883 3×109CFU/m L,是最初MRS的5.029倍。该结果可为以后的菌剂制备及工业化生产提供理论依据。

长双歧杆菌增菌培养基的优化

针 对 长 双 歧 杆 菌 的 营 养 需 要 ,分 别 采 用 单 因 素 试 验 和 正 交 试 验 , 优 化 培 养 基 成 分 及 用 量 , 得 出 最 佳 增 菌 培 养 基 (LPT )配 比 :大 豆 蛋 白 胨 1.67%,酪 蛋 白 胨 0.83%,乳 糖 1.0%,酵 母 浸出 粉 0.5%,低聚 糖 0.5%,肝浸 液 15%。最 后 测 定 长 双 歧 杆 菌 在 增 菌 培 养 基 中 的 生 长 曲 线 , 并 同 时 测 定 pH 和 吸光 值 的变 化,确定 增菌 培 养终 止时 间为 12h,此 时 菌 数 可 达 1.3×10cfu /m L。

乳酸菌增菌培养基筛选及干燥保护剂的选择

对促进乳酸菌生长的营养物质及冻干保护剂进行了研究 ,结果保加利亚杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌在液体培养基中菌数增到 1 0 1 0 ～ 1 0 1 1 cfu/g ,经冷冻干燥后活菌数达到 1 0 1 0 cfu/g以上。

鼠棒状杆菌的增菌培养基

鼠棒状杆菌为小鼠和家兔的常见寄生菌,一般对健康动物的致病力较低,偶可引起假结核病。该菌感染多为隐性,但能在多种因素的影响下导致实验动物发病甚至死亡,影响实验结果的解释和评价。为此鼠群中鼠棒状杆菌感染已引起重视,规定除普通级动物外,其余等级的动物均不得检出该菌。

单增李斯特菌选择性增菌培养分离的初步探讨

目的:寻找一种良好的增菌培养分离法,提高食品中单增李斯特菌(Lm)的检出率。方法:对Fraser肉汤增菌法进行改良,在自行配制的第一液Half-Fraser肉汤中添加氯霉素,观察其对Lm及蜡样芽孢杆菌(B.cereus)的影响,确定加入氯霉素的最佳适宜量。160份样品同时采用改良Fraser肉汤法、FDA法、国标法增菌培养后,用传统生化鉴定Lm,比较检出率。结果:在Half-Fraser肉汤中添加3.0μg/ml氯霉素不会对样品中的Lm产生明显的影响,但可有效抑制B.cereus的生长。3种增菌培养法以Fraser肉汤增菌法总检出率最高,尤其对速冻食品的检出率达100%,FDA法对灭菌食品的检出率达100%。结论:Half-Fraser肉汤氯霉素的最佳添加量为3.0μg/ml。不同样品类型要用不同的增菌法,必要时用2种以上方法相结合,提高食品中Lm的检出率。