建立增菌PCR方法对痰涂片阴性肺结核早期诊断

目的 建立增菌PCR方法，以达到对涂片阴性痰标本中结核菌早期检定和确认活菌的目的。方法 采用7H12半流体培养和PCR扩增相结合的增菌PCR方法，对46份初治肺结核患者痰标本进行检测，并对杂交结果进行凝胶呈像灰度分析。结果 应用增菌PCR检测涂片阴性痰标本，其中86.21%的标本在增菌7d内得到阳性结果，于4周时得到最大阳性率，较培养法的阳性检出时间明显缩短（P＜0.01)，较普通痰标本PCR阳性率明显提高（P＜0．05）；有63．04％的标本增菌7d时的杂交结果凝胶灰度值与0d时相比＞1：并有62.07%的增菌PCR7d内得到阳性的标本得到同一样本7H12半流培养阳性结果的支持和活菌判定。结论 增菌PCR不是单纯的PCR，增菌7d后PCR阳性率明显增加，且有杂交结果凝胶灰比值的增加和随后的培养结果对其进行支持和活菌判断，会有助于临床诊断的准确性。

四种结核分枝杆菌检测方法临床诊断准确性探讨

探讨四种结核分枝杆菌检测方法的临床诊断效果。方法 择取2020年1月-2023年1月间,到我院来就诊的肺结核、疑似肺结核、非肺结核患者作为研究的对象,每类各45例。所有的患者均收集清晨的痰液当做标本,行涂片、培养、荧光聚合酶链反应技术、增菌聚合酶链反应技术(4d、7d)检测,就这四种检测方法在检测结核分枝杆菌的诊断准确性方面展开分析。结果 涂片、培养、荧光聚合酶链反应技术、4d的增菌聚合酶链反应技术、7d的增菌聚合酶链反应技术在肺结核患者中的结核分枝杆菌阳性检出率依次升高(P<0.05);在疑似肺结核、非肺结核患者中的阳性检出率无明显差异(P>0.05)。在肺结核和疑似肺结核患者中,荧光聚合酶链反应技术、4d和7d增菌聚合酶链反应技术对涂阳培阳患者的阳性检出率为100.00%;但在涂阳培阴、涂阴培阳、涂阴培阴患者中4d增菌聚合酶链反应技术、7d增菌聚合酶链反应技术的阳性检出率高于荧光聚合酶链反应技术,而且7d增菌聚合酶链反应技术的阳性检出率高于4d增菌聚合酶链反应技术(P<0.05)。结论 增菌聚合酶链反应技术在结核分枝杆菌中的阳性检出率比较高,尤其是7d技术,操作非常简单,结果准确可靠,而且不容易受到外界的影响,可作为临床检出结核分枝杆菌的重要手段。