正交设计法确定士的宁氮氧化物半合成最佳条件的研究

目的对士的宁氮氧化物半合成的最佳制备工艺进行了正交设计研究。方法在合成士的宁氮氧化物过程中,将士的宁作为前体,采用涉及氮原子的氧化反应,在一定温度下,以无水乙醇为溶剂、30%H2O2为氧化剂,由士的宁19位N氧化合成具半极性配位键的士的宁氮氧化物。用正交实验法对士的宁氮氧化物的半合成工艺条件进行优选,以士的宁氮氧化物的得率(%)结合HPLC归一化测定其纯度(%)所得综合评价指数作为观察指标,对H2O2液量A(mL)、水浴温度B(℃)、反应时间C(min)3个反应因素的3种影响水平进行L9(33)实验。结果①从直观分析结合方差分析结果可知,半合成士的宁氮氧化物的最佳制备工艺为A1B1C2,即取士的宁0.4 g,使溶解于30 mL无水乙醇中,加H2O2液量0.5mL,水浴温度为50℃,反应时间为90 min,但3因素各水平间并无显著性差异(P>0.05)。②对最优工艺组合(A1B1C2)进行了3次平行验证,结果表明,其士的宁氮氧化物得率(%)为(106.1±0.1),纯度(%)为(98.4±0.2),综合评价指数为(10 437±17);与参试最优工艺搭配(A1B2C2)相比,无论是得率(108.9%)或纯度(98.5%)还是综合评价指数(10 727),二者都相差不大。结论提示通过本正交实验得到士的宁氮氧化物的较最佳半合成工艺条件重现性好、可信度高。

士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物的半合成研究

用乙醇和过氧化氢，从士的宁和马钱子碱半合成了士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物，半合成的化合物根据^1H NMR,^13C NMR,MS和^1H ^13C NMR得以确证，从士的宁半合成士的宁氮氧化物的得率为93.56%；从马钱子碱半合成马钱子碱氮氧化物的得率为92.02%。

马钱子炮制前后士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量变化研究

目的:用RF-HPLC法测定并考察马钱子炮制前后士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量变化。方法:Lichrospher C18柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈(A):0.2%乙酸-0.2%三乙胺(B)为流动相,采用梯度洗脱的方法(0min:8∶92;10min:91.5∶8.5;30min:79∶21;60min:40∶60),流速为1mL/min,检测波长为254nm。结果:经炮制以后,士的宁氮氧化物由0.0033上升到0.0044,上升率为133%,马钱子碱氮氧化物由0.0025上升到0.0033,上升率为132%。结论:马钱子经砂烫后,士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量有所增加,实验结果为制定马钱子饮片的质量标准提供了一定依据。

HPLC测定马钱子炮制品中士的宁和马钱子碱氮氧化物的含量

目的用HPLC法测定马钱子膨化前后士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量。方法 Diamonsil TM-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)∶0.2%乙酸-0.2%三乙胺(B)为流动相,采用梯度洗脱的方法(0 min 8∶92;10 min 92∶8;30 min 79∶21;60 min 40∶60),流速为1 mL/min,检测波长为254 nm。结果经膨化后,士的宁氮氧化物由0.0015上升到0.0035,上升率为233%,马钱子碱氮氧化物由0.0009上升到0.0025,上升率为278%。结论马钱子经膨化后,士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量有所增加,实验结果为制定马钱子饮片的质量标准提供了一定的依据。

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中士的宁及其代谢物

目的建立LC-MS/MS法同时测定士的宁及其代谢物士的宁氮氧化物在大鼠血浆中的浓度。方法以盐酸麻黄碱为内标,甲醇沉淀法处理血浆样品。采用ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(2.1 mm×150 mm,3.5μm)分离,以甲醇-10 mmol·L-1乙酸铵(用甲酸调p H=4)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 m L·min-1,用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测士的宁和士的宁氮氧化物。结果士的宁及其氮氧化物的线性范围分别为0.510~306.3 ng·m L-1和0.102~306.0 ng·m L-1,定量下限分别为0.510,0.102 ng·m L-1,日内、日间相对标准偏差(RSD)均<15%,准确度分别为(89.44±3.43)%^(97.45±6.25)%和(95.86±5.19)%^(106.41±7.43)%。结论该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于血浆中士的宁及其代谢物士的宁氮氧化物含量的同时测定。

LC-MS/MS法同时测定大鼠组织中士的宁、马钱子碱及其代谢物

目的建立大鼠组织中士的宁(strychnine,STR)、马钱子碱(brucine,BRU)、士的宁氮氧化物(strychnine N-oxide,SNO)与马钱子碱氮氧化物(brucine N-oxide,BNO)的含量测定方法,考察马钱子总碱正常及毒性灌胃剂量下,4种成分在大鼠组织的分布特征。方法盐酸麻黄碱为内标,组织样品采用氯仿液液萃取的处理方法。以ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(2. 1 mm×150 mm,3. 5μm)为色谱柱,10 mmol·L^(-1)乙酸铵(用甲酸调p H 4. 0-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0. 2 m L·min^(-1),柱温30℃,在电喷雾离子化和正离子多离子反应模式下,运用API4000^+型三重四级杆质谱联用仪进行测定。结果在线性范围内,STR、BRU、SNO及BNO的线性关系良好; 4种成分的日内、日间精密度均≤14. 90%,准确度为(85. 94±1. 43)%～(113. 77±5. 19)%。两种给药剂量下,STR、BRU、SNO在组织中均有分布,其中肾、肝的分布量最多,STR、BRU在脑中有少量分布。结论该方法简单、灵敏、特异、可靠,适用于同时测定大鼠组织中STR、BRU、SNO和BNO。

不同炮制方法对马钱子中4种生物碱的影响

应用薄层扫描法测定了中药马钱子不同炮制品中４－羟基依卡精（ｖｏｍｉｃｉｎｅ）、依卡精（ｉｃａｊｉｎｅ）、士的宁氮氧化物（ｂｒｕｃｉｎｅＮ－ｏｘｉｄｅ）４种生物碱的含量，并就生物碱的含量分布与其炮制方法之间的关系进行了讨论。

马钱子中两种微量生物碱异构体的电喷雾多级串联质谱分析

采用电喷雾多级串联质谱方法,通过分子量和多级串联质谱的信息对马钱子总生物碱提取物中微量生物碱异构体伪士的宁、士的宁氮氧化物进行了分析研究;并研究了异构体质谱碎裂规律与结构之间的关系.建立了马钱子中生物碱同分异构体区分的简便、快速、灵敏的新方法.

马钱子膨化炮制工艺优选

目的优选马钱子膨化炮制的最佳工艺。方法选用L_9(3~4)正交试验表安排试验,以膨化压强和保温时间为考察因素,以士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物的含量为指标考察工艺条件。结果最佳膨化条件为,膨化压强2. 0 kg/cm2,膨化保温时间4 min。结论经验证,优选出的膨化工艺条件结果稳定,士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物含量均处于较高水平,且较之生品及砂炒品均有较大增加。

马钱子生物碱在大鼠体内的药代动力学研究

目的 用反相高效液相色谱法研究马钱子砂烫炮制品中生物碱在大鼠体内的药代动力学。方法 HPLC法 ,色谱柱为HypersilBDSC1 8,流动相为乙腈 水 ,流速 0 8mL·min-1 ,检测波长 2 54nm。结果 大鼠iv本品后 ,其主要成分士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物的代谢均符合二室开放模型 ,主要药代动力学参数分别如下 :T1 2 α为 (8± 5) ,(4± 3) ,(6 2± 1 7)和 (3 0± 0 8)min ,T1 2 β为 (2 62± 1 2 5) ,(41 6± 1 31 ) ,(2 85± 50 )和 (342±1 4 1 )min ,CL为 (1 7± 4) ,(2 1± 1 2 ) ,(1 9± 1 8)和 (2 8± 1 1 )mL·min-1 ,Vc 为 (1 4± 0 5) ,(1 7± 1 1 ) ,(0 2 4± 0 1 6)和 (0 2 3± 0 0 6)L·kg-1 ,Vd 为 (6 0± 1 2 ) ,(1 2± 7) ,(0 8± 0 6)和 (1 5± 0 6)L·kg-1 ,AUC为 (57578± 2 5 578) ,(35 2 4 0± 1 5 61 6) ,(93 0 88± 2 2 375)和 (1 7771 2± 1 2 0 1 1 0 )h·μg·L-1 。结论 此法为人体内的药代动力学研究提供参考。

Semisynthesis of Strychnine N-oxide and Brucine N-oxide

用乙醇和过氧化氢，从士的宁和马钱子碱半合成了士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物。半合成的化合物根据１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和１Ｈ１３ＣＮＭＲ得以确证。从士的宁半合成士的宁氮氧化物的得率为９３．５６％；从马钱子碱半合成马钱子碱氮氧化物的得率为９２．０２％。

反相离子对HPLC同时测定制马钱子中4种生物碱的含量

目的建立同时测定制马钱子中4种生物碱士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物含量的反相离子对HPLC法。方法应用Lichrospher S C18色谱柱(4.6mm×300mm,5μm),以乙腈-水(38:62,每1000mL加入磷酸二氢钾3.4g和十二烷基硫酸钠1.7g)为流动相,流速:1.0mL.min-1,柱温:30℃,检测波长:260nm。结果4种生物碱士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物和马钱子碱氮氧化物的线性范围分别为13.7～219.1,12.55～200.8,0.3743～5.988和0.6225～9.96mg.L-1(r>0.9999),平均回收率分别为98.0%,102.2%,103.3%和99.9%(RSD均小于2.5%)。结论该方法简便、准确,重复性好,适用于制马钱子中士的宁、马钱子碱、士的宁氮氧化物、马钱子碱氮氧化物的含量测定。

毛细管区带电泳法同时测定制马钱子中4种生物碱的含量

建立了同时测定制马钱子中4种生物碱士的宁(S)、马钱子碱(B)、士的宁氮氧化物(SNO)和马钱子碱氮氧化物(BNO)含量的毛细管区带电泳法(CZE)。考察了缓冲溶液的种类、浓度和pH值以及分离电压等因素对分离结果的影响。以盐酸麻黄碱(EP)为内标,在缓冲溶液为40 mmol/L醋酸铵(以200 mmol/L醋酸溶液调pH 3.64)、分离电压25 kV及检测波长203 nm的优化条件下,7 min内即可实现分离测试。S、B、SNO和BNO分别在13.7～109.8μg/mL、13.4～107.5μg/mL、13.6～108.5μg/mL和3.3～106.2μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.998 2、0.994 2、0.996 5和0.996 5;最低检出限分别为0.83、0.96、2.1和2.5μg/mL(信噪比为3);加标回收率分别为95.1%～102.5%、95.3%～102.0%、96.7%～102.9%和97.2%～104.2%,相对标准偏差3.75%、3.82%、3.55%和3.51%。