PBC患者中医证型、EB病毒壳抗原IgA抗体表达情况与临床特征及病理分期的研究

目的:分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者中医证型及EB病毒壳抗原IgA抗体(EB VCA-IgA)阳性表达情况,了解不同证型与EB病毒(EBV)感染对PBC患者病情影响及其与病理分期的关系。方法:分析2019年12月至2022年6月于江苏省中医院感染科住院的87例PBC确诊患者的临床资料,采集患者的症状体征等四诊资料进行辨证分型。同时行肝穿刺活组织检查、完善实验室检查包括血清EB VCA-IgA等检测。根据血清EB VCA-IgA是否阳性表达,将患者分为EB VCA IgA(+)组和EB VCA IgA(-)组,比较两组患者临床及病理资料差异。同时分析患者中医证型与血清EB VCA-IgA阳性表达、肝脏病理分期的关系。结果:气阴两虚证组中肝脏病理为进展期的EB VCA IgA(+)患者比例较肝郁脾虚证组显著升高(P<0.05)。与EB VCA IgA(-)组患者比较,EB VCA-IgA(+)组患者血清IgG、IgA水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肝脏病理为进展期、炎症活动等级较高(G3)EBV VCA-IgA(+)患者比率高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析提示,中医证型为气阴两虚、肝脏病理分期为进展期、高IgG、高IgA水平是影响PBC患者EB VCA-IgA阳性表达的独立危险因素。结论:气阴两虚证PBC患者存在更严重的肝脏炎症及纤维化,更易合并EBV感染;气阴两虚证、肝脏病理进展期、高IgG、高IgA水平是PBC患者EB VCA-IgA阳性表达的独立危险因素。

12种广东地产清热解毒中药对EB病毒壳抗原表达的抑制作用及其细胞毒作用

目的:观察12种广东地产清热解毒药抑制EB病毒(EBV)壳抗原在体外细胞中表达的作用及对B95-8细胞的细胞毒作用。方法:应用间接免疫酶法研究12种中药对B95-8细胞壳抗原表达的抑制作用;采用台盼蓝拒染试验,观察中药对B95-8细胞在激发培养环境下的细胞毒作用。结果:12种广东地产清热解毒药在无细胞毒浓度下对激发条件下培养的B95-8细胞具有明显的抑制其VCA表达的作用,大部分药物呈现出药量依赖性;相应药物增加药量1 000倍,12种中药均对B95-8细胞有明显的细胞毒性作用,呈显著的药量依赖性。结论:12种广东地产清热解毒药抑制EBV壳抗原表达效果较好,高浓度时均对B95-8细胞具有细胞毒作用。

黄芪抑制EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的作用

目的 :探讨黄芪抑制 EB病毒 (EBV)壳抗原在体外细胞中表达的作用。方法 :采用间接免疫酶法研究黄芪提取液对B95- 8细胞壳抗原表达的抑制作用。结果 :无毒性浓度的黄芪提取液对巴豆油、正丁酸联合激发的 EB病毒壳抗原表达有明显抑制作用 ,抑制率随药物浓度增加而提高。结论 :黄芪抑制 EBV壳抗原表达效果好 。

EB病毒壳抗原抗体定性检测在鼻咽癌筛查中的作用

目的研究EB病毒壳抗原抗体定性检测在鼻咽癌筛查中的作用。方法选取我院2011年1月具有广州市户籍健康查体者血清2107份,采用酶联免疫法定性检测EB病毒壳抗原抗体表达,对于EB病毒壳抗原抗体阳性者行间接鼻咽镜检查,必要时行鼻内镜下鼻咽活检。结果 EB病毒壳抗原抗体阳性血清601份,阳性率为28.5%;其中男性388份,阳性率为30.3%;女性213份,阳性率为25.8%。189人完成间接鼻咽镜检查,2人经活检证实为鼻咽癌。结论定性检测EB病毒壳抗原抗体诊断价值有限,不适合用于鼻咽癌筛查。

表达Epstein-Barr病毒壳抗原gp125重组痘苗病毒的免疫原性

目的研究基因重组ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒ病毒ｇｐ１２５蛋白的免疫原性。方法用表达ｇｐ１２５的重组痘苗病毒免疫中国本兔，用免疫荧光法检测免疫血清的抗体效价并研究其特异性。结果重组痘苗病毒在感染细胞内特异性地表达ｇｐ１２５，活病毒能够刺激兔产生高滴度的特异性抗体，经２次免疫，免疫荧光效价达１∶３２０。结论基因重组ｇｐ１２５和天然的该蛋白一样，有较强的免疫原性。

微量元素亚硒酸钠与硫酸镍对Epstein—Barr病毒壳抗原表达影响的研究

本文报告应用间接免疫荧光技术,研究了亚硒酸钠与硫酸镍对EB病毒壳抗原(VCA)表达的影响及其相互关系,0.1-1.0μg/ml亚硒酸钠1-20μg/ml硫酸镍,各自对VCA表达呈抑制和促进的相反效应。适当浓度的亚硒酸钠不仅能抵消各剂量硫酸镍对病毒抗原表达的促进作用,而且还明显抑制抗原自身的表达。时经镍预处理24小时后的靶细胞,硒仍显示出强烈的抑制效应:外一方面,硒一次预处理后,仍保持其对镍激发抗原能力的抑制。这些结果提示,硒对EBV-VCA表达的抑制作用远较镍的促进作用为强,而且持久。 本文还讨论了鼻咽癌患者体内的高镍低硒状态与EBV感染的相互关系及其可能在鼻咽癌发生、发展中所起的作用。

中草药抑制EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的实验研究

目的 :探讨中草药对EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的抑制作用。方法 :采用间接免疫酶法检测广西常见的300余种中草药对B95 8细胞壳抗原表达的抑制作用。结果 :发现其中20种中草药有抑制EB病毒抗原表达的作用。结论 :抑制EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的中草药有望在鼻咽癌预防方面起一定作用。

EB病毒壳抗原在大肠杆菌中的表达及纯化

本文报告对EB病毒壳抗原(VCA)带有抗原决定簇的蛋白质在大肠杆菌中的表达及其纯化。以纯化后的蛋白为抗原检测人血清中VCA/IgA抗体,鼻咽癌病人及某些急性EB病毒感染人群呈抗体阳性.而对照组呈阴性。这一结果提示VCA蛋白在鼻咽癌的普查中有应用价值。

500例EB病毒EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体与白细胞计数和分类的分析

目的 EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体与白细胞检测结果的相互关系。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体、半导体激光流式细胞技术检测白细胞计数和分类,回顾性分析500例EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体与白细胞检测的结果,采用SPSS 11.5对检验数据进行χ~2检验、t检验进行分析。结果 EB病毒抗原(VCA)IgM抗体阳性的白细胞计数低于生物参考区间范围下限。白细胞分类中淋巴细胞分类结果增高,中性粒细胞分类结果在生物参考区间上限,其余三类结果正常。结论 EB病毒壳抗原(VCA)IgM抗体与白细胞检测结果有一定的相关性,有助于EBV感染的早期诊断,联合检测两类指标可提高EBV现症感染的检出率。

多层螺旋CT增强扫描联合血清免疫球蛋白A/EB病毒壳抗原水平检测在鼻咽癌诊断中的应用价值

目的分析多层螺旋CT(MSCT)增强扫描联合血清免疫球蛋白A/EB病毒壳抗原(VCA-IgA)水平检测在鼻咽癌诊断中的应用价值。方法选取2012年5月至2018年12月黄河中心医院收治的124例疑似鼻咽癌患者作为研究对象,术后最终经鼻咽部病理活检确诊的患者作为观察组(n=76),鼻咽部良性病变的患者作为对照组(n=48)。术前均实施MSCT增强扫描及血清VCA-IgA检查。比较两组血清VCA-IgA阳性率及MSCT增强扫描阳性率、病理分化阳性检出情况及诊断灵敏度、特异度、准确度。结果观察组MSCT增强扫描阳性率、血清VCA-IgA阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。未分化型非角化性鼻咽癌血清VCA-IgA阳性检出率高于分化型非角化性鼻咽癌,差异有统计学意义(P<0.05);分化型非角化性鼻咽癌MSCT增强扫描、两者联合阳性检出率与分化型非角化性鼻咽癌比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合诊断敏感度、准确度高于血清VCA-IgA、MSCT增强扫描单一检测诊断结果,差异有统计学意义(P<0.05);血清VCA-IgA、MSCT增强扫描联合诊断特异度与两者单一诊断比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MSCT增强扫描联合血清VCA-IgA水平检测能进一步提高诊断敏感度,可为鼻咽癌临床治疗提供参考依据。

重组EBV壳抗原BALF4蛋白的制备及其在鼻咽癌患者检测中的应用

目的:制备重组EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)壳抗原(viral capsid antigen,VCA)BALF4蛋白,并探讨其在鼻咽癌检测中的应用价值。方法:采用PCR法从EBV DNA序列中扩增BALF4基因,酵母表达载体pPICZaA连接,重组pPICZαA-BALF4载体转染GS115酵母菌,甲醇诱导重组BALF4蛋白表达并纯化。重组BALF4蛋白经SDS-PAGE、Western blotting鉴定后作为包被抗原,制备ELISA试剂,检测鼻咽癌患者EBV-IgA抗体。结果:成功构建pPICZαA-BALF4表达载体,并在GS115酵母菌中高效地表达重组BALF4蛋白。重组BALF4蛋白相对分子质量为52000,经Western blotting证实重组BALF4蛋白具有免疫原性。重组BALF4蛋白作为包被抗原,检测鼻咽癌患者和正常对照血清(各300份)中EBV-IgA抗体的灵敏度和特异性分别为81%和94%。结论:成功制备重组EB病毒壳抗原BALF4蛋白,该蛋白在鼻咽癌血清筛选具有较高的敏感度及特异性。

1300例抗EB病毒壳抗原抗体测定对早期诊断鼻咽癌的价值

Hemer等1976年首先报告了EB病毒壳抗原(VcA)的免疫球蛋白对鼻咽癌的特异诊断意义(阳性率达93%),后经国内曾氏证实可提前4～5年发现鼻咽癌,深受临床工作者的欢迎.本文报道我院门诊1300例鼻咽疾病患者血清中抗EBVcA—IgA抗体测定,阳性例取病理活检对照观察.结果证实此种对照检测对早期发现鼻咽癌甚为有效可靠.现将结果报告如下:

几种药物抑制EB病毒壳抗原在体外细胞中表达的作用

ＥＢＶ和ＮＰＣ有密切的关系，用三氮唑核苷、聚肌胞、柴胡、鱼金、板兰根、抗毒清咽合剂按不同浓度加入到能自发产生ＥＢＶ的Ｂ９５－８细胞悬液中，这几种药物均有一定的抑制细胞中ＥＢＶ－ＶＣＡ表达的能力，其中三氮唑核苷（１０μｇ／ｍｌ）、板兰根（１０ｍｇ／ｍｌ）和抗毒清咽合剂（１：１０００）则有较强的抗ＥＢＶ作用，抑制率分别达到了５５．５６％、５７．８９％和５４．１７％，而聚肌胞、柴胡、鱼金的抑制作用较弱。实验结果表明，用药物抑制ＥＢＶ的复制和表达，有可能作为控制ＮＰＣ的方法之一。

细小病毒B19壳抗原VP2在大肠杆菌中的表达及血清学检测

为了进行B19感染临床的血清学诊断,利用原核表达载体PQE31克隆和表达B19壳蛋白VP2,酶切鉴定PCR产物及PQE31-VP2克隆的正确性,Western-blot证明表达蛋白的特异性,并对其表达条件和纯化条件进行了优选。在D600为0.7,诱导时间为5h时表达量最高。Ni2+亲和色谱,用0.5mol/L咪唑洗脱液洗脱,获得纯化蛋白。利用纯化蛋白检测100份人群血清,免疫斑点法结果为阳性94例,阴性6例;ELISA结果为阳性84例,阴性16例,两种方法结果一致(0.25>P>0.1)。

蛇炮簕对EB病毒壳抗原在体外细胞表达的抑制作用

目的:观察蛇炮簕对EB病毒壳抗原(EBV-VCA)在体外细胞表达的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法证实蛇炮簕提取液对B95-8细胞无毒性后,采用免疫酶法研究蛇炮簕提取液对B95-8细胞EBV-VCA表达的抑制作用。结果:无毒性浓度的蛇炮簕提取液对正丁酸钠、巴豆油联合激发的EBV-VCA表达有较明显抑制作用,且随浓度增加而抑制作用加强。结论:蛇炮簕有较强的体外抑制鼻咽癌EBV-VCA表达的作用,值得进一步研究。

EB病毒壳抗原抗体、异型淋巴细胞形态计数及SAA对儿童传染性单核细胞增多症的价值

目的分析EB病毒壳抗原(VCA)抗体、异型淋巴细胞形态计数及血清淀粉样蛋白(SAA)对儿童传染性单核细胞增多症(IM)的价值。方法选取2019年9月至2021年9月在安徽省儿童医院就诊并经临床确诊的93例IM患儿作为研究对象,从中选取66例同时检测VCA-免疫球蛋白(Ig)G、VCA-IgM、VCA-IgA抗体、异形淋巴细胞计数和SAA,比较VCA-IgG、VCA-IgM、VCA-IgA抗体与EB病毒(EBV)-DNA检测能力的一致性,酶联免疫吸附测定法(ELISA)和手工复检异型淋巴细胞计数两种检测方法的阳性率,以及不同异型淋巴细胞数量的SAA水平变化。结果VCA-IgA、VCA-IgM、VCA-IgG抗体与EBV-DNA检测结果的阳性符合率、阴性符合率和总符合率及其95%置信区间(CI)分别为75.0%(24/32)(69.3%~85.6%)、71.8%(56/78)(59.4%~83.1%)、70.0%(7/10)(53.4%~84.1%),72.1%(44/61)(56.3%~83.6%)、20.0%(3/15)(10.0%~19.9%)、26.5%(22/83)(18.4%~36.5%),73.1%(68/93)(56.1%~87.7%)、63.4%(59/93)(48.3%~81.2%)、31.1%(29/93)(19.9%~46.6%)。VCA-IgA、VCA-IgM、VCA-IgG抗体与EBV-DNA检测结果一致性检验的Kappa值分别为0.387(95%CI 0.256~0.518)、-0.108(95%CI-0.219~0.009)、0.624(95%CI 0.513~0.735)。ELISA检测VCA-IgA和VCA-IgM抗体的阳性率高于手工复检异型淋巴细胞计数的阳性率[83.3%(55/66)比63.6%(42/66)](P<0.05)。异型淋巴细胞计数阳性组与阴性者的SAA水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论VCA-IgA、VCA-IgM和VCA-IgG抗体对IM具有诊断价值,其中,VCA-IgM抗体对IM的诊断价值最高,VCA-IgG抗体对IM晚期EBV感染的诊断价值较高。而SAA在区分IM感染损伤中变化不明显。

Bmi-1自身抗体与EB病毒衣壳抗原IgA抗体联合检测诊断鼻咽癌的价值

目的探讨联合检测Bmi-1自身抗体与EB病毒衣壳抗原(viral capsid antigen,VCA)-IgA抗体在鼻咽癌诊断中的意义。方法鼻咽癌患者200例为鼻咽癌组,其中Ⅰ+Ⅱ期33例,Ⅲ+Ⅳ期167例,同期体检健康者216例为对照组,采用ELISA法检测血清Bmi-1自身抗体和EB病毒VCA-IgA表达情况,比较Bmi-1自身抗体、VCA-IgA、Bmi-1自身抗体+VCA-IgA阳性率,分析Bmi-1自身抗体、VCA-IgA单独及联合诊断鼻咽癌的效能。结果鼻咽癌Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期Bmi-1自身抗体阳性率(27.3%、30.5%)、VCA-IgA阳性率(33.3%、51.5%)、Bmi-1自身抗体+VCA-IgA阳性率(51.5%、65.3%)均高于对照组(5.6%、4.6%、9.3%)(P<0.05);Bmi-1自身抗体、VCA-IgA、Bmi-1自身抗体+VCA-IgA阳性率在性别、年龄、T分期、N分期和临床分期上差异无统计学意义(P>0.05);Bmi-1自身抗体诊断鼻咽癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为30.0%、94.4%、83.3%、59.3%,VCA-IgA分别为49.0%、95.4%、90.7%、66.9%,Bmi-1自身抗体+VCA-IgA分别为63.0%、90.7%、86.3%、72.6%,联合检测诊断鼻咽癌的敏感性高于Bmi-1自身抗体、VCA-IgA单独检测(P<0.05)。结论血清Bmi-1自身抗体及VCA-IgA在鼻咽癌尤其是早期鼻咽癌诊断中有较高价值,二者联合检测可提高鼻咽癌的诊断效能。

EB病毒壳抗原、核心抗原重组蛋白的制备及在鼻咽癌血清学诊断中的应用

目的探讨EB病毒（EBV）壳抗原（VCA）-BFRF3和核心抗原（NA）1—BKRF1重组蛋白在鼻咽癌（NPC）血清学诊断中的应用。方法以EBVDNA为模版，用PCR扩增目的基因BFRF3和BKRF1，插入大肠杆菌表达载体pET．51b后转染大肠杆菌JM109，诱导重组蛋白表达。表达产物经SDS—PAGE、免疫印迹分析鉴定，金属螯合亲和层析纯化后，分别制备用BFRF3、BKRF1及BFRF3／BKRF1作为包被抗原的ELISA试剂，检测NPC患者和正常人群EBV—I外抗体。结果大肠杆菌高效表达BFRF3和BKRF1重组蛋白，表达产物相对分子质量分别为20000和29000，均有良好免疫反应性；BKRF1的NPC诊断灵敏度（71．20％，178，250）明显高于BFRF3（64．80％，162／250）（P〈0．01），但两者NPC诊断特异性差异无统计学意义（P〉0．05）。相对于单独应用1种抗原，联合2种重组抗原的方法诊断NPC具有高灵敏度（84．80％，212／250）和相对低的特异性（82．00％，328／400）俨〈0．01）。结论NA1-BKRFI诊断NPC的灵敏度高于VCA—BFRF3，两种抗原联合使用，可提高诊断灵敏度，但特异性明显降低。

丙型肝炎病毒核壳蛋白抗原的化学合成及其在病毒学诊断中的应用

丙型肝炎病毒(HCV)是单股正链RNA病毒,1991年正式归人黄病毒科丙型肝炎病毒属国内外的流行病学研究表明,大约90%的输血后肝炎均由HCV引起,而HCV的慢性感染者则为原发性肝细胞癌的高危人群另据调查,在我国的肝病患者以及某些采血点的供血员特别是单采血浆献血员当中,HCV感染十分严重.因此,丙型肝炎的防治是我国的重大卫生保健问题,而在目前,HCV诊断试剂的研制又是丙型肝炎防治研究的首要课题. 美国Chiron公司首先利用HCV基因组的C-100区段(估计编码NS3/NS4蛋白)在酵母细胞中表达融合蛋白,制成第一代的HCV诊断试剂,可检出约70%的HCV感染者.随着越来越多的HCV基因组全序列得到阐明,HCV核壳蛋白在病毒学诊断中的作用也受到广泛注意.

血清组织多肽抗原在鼻咽癌中的表达

目的评价组织多肽抗原(TPA)在鼻咽癌诊断和监测中的临床价值。方法鼻咽癌病人28例,健康对照组10例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TPA、EAIgA、VCAIgA三项指标并比较分析其检测结果。结果鼻咽癌组三项指标均明显高于健康对照组(P<0.05)。TPA与鼻咽癌分期、淋巴结转移和远处转移有关,病人经放射治疗后TPA值下降,TPA值一定程度上可以反映鼻咽癌转归。结论TPA和EAIgA、VCAIgA联合应用对鼻咽癌的诊治有一定价值。