聚壳糖改性甘蔗基生物炭对铅锌污染土壤稳定化的研究

以甘蔗为原料制备生物炭,以NaOH、NaCl、稀HNO3为活化剂进行活化,对聚壳糖进行改性制得土壤稳定化材料聚壳糖改性甘蔗基生物炭,探究聚壳糖改性甘蔗基生物炭制备过程中不同活化剂、不同聚壳糖负载量对污染土壤中铅、锌的稳定化效果。结果表明,活化生物炭效果最优的活化剂为稀HNO3;聚壳糖改性剂最优添加量在0.5%~0.75%之间,且少量聚壳糖即可显著提升生物炭对污染土壤中铅、锌的稳定化效果;炭材料的最佳添加剂量为稳定性实验土壤质量的8%。

壳聚糖金属配合物催化剂和壳糖载体的研究进展

天然高分子壳聚糖与金属离子具有良好的螯合能力 ,其配合物可作为氢化、开环聚合、烯类单体聚合、氧化偶合、酯化等反应的催化剂和引发剂。对以壳聚糖与贵金属、稀土元素。

反相高效液相色谱法测定壳糖止血海绵中诺氟沙星和盐酸利多卡因的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定壳糖止血海绵中诺氟沙星和盐酸利多卡因含量的测定方法。方法采用Hedera—ODS-3 C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），以乙腈-1％磷酸溶液（12：88）为流动相，三乙胺调节pH3．0±0．1，检测波长为254nm。结果诺氟沙星和盐酸利多卡因在0．025—0．100mg／ml浓度范围内均有良好线性关系。诺氟沙星平均回收率为98．84％，RSD为1．72％，盐酸利多卡因平均回收率为100．24％，RSD为1．86％。结论该法简便准确，稳定无干扰，重现性好，可用作壳糖止血海绵中诺氟沙星和盐酸利多卡因的含量测定。

壳糖体外介导血管平滑肌细胞内皮型一氧化氮合酶基因转移的初步研究

目的探讨壳糖作为非病毒载体介导质粒体外转染哺乳动物平滑肌细胞的可行性、转染效率及影响转染效率的因素。方法用壳糖包被携带绿色荧光蛋白(GFP)基因和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的质粒PAdTrack-CMV-eNOS,制备壳糖/质粒复合体(CPC-eNOS),在不同条件下将其和Wistar大鼠血管平滑肌细胞孵育,通过检测靶细胞是否表达GFP和eNOS,评价壳糖介导质粒转染的效率。并以裸质粒PAdTrack-CMV- eNOS和重组腺病毒表达载体Ad-eNOS分别作为对照。结果荧光显微镜下472nm观察,CPC-eNOS和重组腺病毒表达载体Ad-eNOS孵育的血管平滑肌细胞均观察到绿色荧光,Western印迹法检测均有eNOS蛋白表达,但裸质粒PAdTrack-CMV-eNOS组均为阴性。CPC-eNOS中氨基/磷酸基比值(N/P比值)为5、pH值为7.0时,对平滑肌细胞的转染效率最高。结论CPC-eNOS能够体外介导转染哺乳动物的血管平滑肌细胞。转染效率与CPC-eNOS的N/P比值和转染介质pH值有关。

以低窄壳糖为载体的磁共振/荧光双功能成像分子探针的合成及性质研究

通过微波辅助氧化法降解壳聚糖制得低聚窄分子量分布壳聚糖(低窄壳糖),LNCS6(聚合度为6,Mw/Mn=1.08),并以LNCS6为载体,键接7-羟基-8-醛基香豆素(CA)为荧光基团、二乙烯三胺五乙酸(DTPA)为络合基团,络合三价钆离子最终制得一种潜在的核磁共振(MR)/荧光双功能成像分子探针Gd[DTPA/CA-LNCS6]。研究了其磁共振成像效果以及荧光特性,并通过等温微量热滴定法(ITC)测定了产物与牛血清蛋白(BSA)之间的结合常数及热力学参数。结果表明,所得产物具有较高的体外磁共振成像效果〔r1=13.71 L/(mmol·s)〕,远高于目前临床使用的马根维显〔r1=3.63 L/(mmol·s)〕。同时,其具有显著的荧光特性(λmax=438 nm),与牛血清蛋白之间结合常数Ka>104,适用于血液输送,对这类探针精细化工中间体的合成具有较好的参考与借鉴作用。

壳三糖对帕金森病小鼠氧化应激的影响

帕金森病(Parkinson′s disease,PD)的重要发病机制之一是氧化应激,而壳寡糖具有较好的抗氧化活性且在PD等神经性疾病中具有良好的保护效果。将小鼠分为空白组、模型组、低剂量组(35 mg/kg)、中剂量组(70 mg/kg)和高剂量组(140 mg/kg),利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)对小鼠腹腔注射诱导PD模型,并通过行为学、病理指标和氧化应激相关指标对各组小鼠进行评估,探究了壳三糖对于PD小鼠保护效果的量效关系及保护机制。结果显示,低中高3个剂量组壳三糖均能缓解PD小鼠的行为学障碍和纹状体中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达量的减少,且中剂量组效果最佳。壳三糖干预显著降低了PD小鼠纹状体中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,提高了还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的表达,上调了核因子E2相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧化酶(heme oxygenase,HO-1)信号通路。结果表明,中剂量壳三糖对MPTP诱导的PD有更明显的缓解作用,其作用机制可能是通过提高抗氧化酶表达和上调Nrf2/HO-1信号通路,降低PD小鼠氧化应激从而缓解PD。

核桃壳低聚木糖阿魏酸接枝化与抗氧化研究

为提高核桃果壳的经济价值,本研究以其为原料制备阿魏酸接枝化的低聚木糖。首先以核桃皮粉为原料提取木聚糖;在无氧条件下,对木聚糖进行阿魏酸接枝化;再利用木聚糖酶对阿魏酸木聚糖(FXL)进行酶解得到阿魏酸低聚木糖(FXO);在制备过程中分别采用紫外可见分光光度计(UV-Vis)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)分别对产物进行鉴定;最后将FXO用于抗氧化的研究。紫外可见分析结果表明,木聚糖中核酸与蛋白质已经被去除干净;通过FT-IR分析表明,已经合成了FXL;经过氢谱与碳谱分析,获得了FXO。抗氧化结果显示,木聚糖、FXL和FXO均表现出抗氧化活性;并且,阿魏酸接枝化能够提高多糖的抗氧化性能。相比木聚糖、阿魏酸、FXL,FXO的抗氧化活性与还原能力最强。本研究为核桃皮的利用提供了一定的研究基础。

壳寡糖改善HepG2细胞胰岛素抵抗作用及机制研究

壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)是一种具有多种生物活性的低聚寡糖,该文探究了COS对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响作用。通过胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,评估COS及其单体组分(聚合度2~4)对其缓解作用。结果显示,COS显著提高产生胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量,促进其葡萄糖代谢。进一步评估不同聚合度的COS单体发现,壳二糖和壳四糖对胰岛素抵抗的肝细胞无显著改善效果,而壳三糖显著提高胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量。另外,COS及壳三糖显著提高胰岛素受体(insulin receptor,IR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白水平,活化蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)以及改善相关基因转录水平。综上,COS通过介导Akt/GLUT4通路改善HepG2细胞的胰岛素抵抗,壳三糖在促进糖代谢中表现最优。

蒸汽爆破预处理联合壳聚糖酶制备壳三糖

为解除壳聚糖底物的不溶解性对壳聚糖酶的限制,并实现单一聚合度壳寡糖的绿色制备,该研究对壳聚糖进行蒸汽爆破预处理,随后使用在枯草芽孢杆菌WB800中高效表达的壳聚糖酶Csn-But进行酶解。扫描电镜结果显示,经过2.4 MPa蒸汽爆破处理的壳聚糖显示多刺的纤维状细枝排列,且表面被明显撕裂,分离和暴露的纤维中含有多个空腔。傅里叶变换衰减全反射红外光谱结果显示蒸汽爆破处理后壳聚糖的化学键未被破坏,氢键网络被破坏。使用壳聚糖酶Csn-But酶解在2.4 MPa蒸汽爆破压力下处理的壳聚糖48 h后,壳寡糖含量较未预处理对照组提高5.4倍,产物浓度达到2.0 mg/mL。并通过调控底物浓度,在作用6%浓度的底物时,实现了高纯度壳三糖的制备。

壳聚糖稀溶液性质的研究

本文在前工作基础上.对不同脱乙酰度壳聚糖在0.2mol/l CH_3COOH+0.1mol/l CH_3COONa的缓冲溶液中进行了分子量、特性粘数、分子尺寸、第二维利系数和扩张因子等稀溶液性质的深入研究.发现Mark-Houwink方程常数K和α有规律地依赖于壳聚糖的脱乙酰度而变化.而且相同分子量时,随着脱乙酰度的增加,壳聚糖在稀溶液中的分子尺寸、特性粘数和扩张因子等增加,而特性比和空间位阻因子随着脱乙酰度的增加而减小.

壳聚糖杀虫与壳低聚糖抑菌活性研究

对以壳聚糖及壳低聚糖为有效成分的天然农药 ,分别进行室内杀虫和抑菌活性实验。结果表明 ,壳聚糖对鳞翅目和同翅目害虫均存在一定的杀虫活性。在相同浓度下 ,对小菜蛾的杀虫活性高于棉铃虫 ;对不同蚜虫的杀虫活性 ,一般在 6 0 %～ 80 %之间 ,最高可达 99%。并用室内离体平皿法检验测定了以壳低聚糖为有效成分的药剂对 17种植物病原菌生长的抑制作用。结果表明 ,壳低聚糖对其中 16种病原菌都有抑制作用 ,且随着浓度提高作用增强。药剂对芦笋茎枯病原菌的最佳抑制率可达 95 1% ,对黄瓜枯萎病、水稻纹枯病及棉花枯萎病等重要植物病害的病原菌也可达 80 %以上的抑制效果。

壳寡聚糖对变形链球菌黏附的影响

目的:研究壳寡聚糖对变形链球菌蔗糖依赖性黏附的影响。方法:使用不同浓度的壳寡聚糖与变形链球菌S.mutansATCC25175共同培养,计算壳寡聚糖对变形链球菌的黏附抑制率的影响,同时扫描电镜下观察变形链球菌在玻片的形态学特征。结果:变形链球菌对玻片的黏附率随培养基中壳寡聚糖浓度的升高而下降。扫描电镜图片显示壳寡聚糖组细菌间基质少,菌细胞清晰。而空白组细菌则包裹有较多的胶冻状基质。结论:壳寡聚糖可以有效抑制变形链球菌的蔗糖依赖性黏附。

通过酶促反应制备壳寡糖

用酶降解法对壳聚糖进行降解 ,研究了温度、pH值、金属离子等对酶促反应的影响 ,降解的最佳温度和pH值分别为 5 0℃和 5 0 ,Mg2 + 和Ca2 + 对酶降解具有一定的促进作用 ,而重金属离子Cu2 + ,Ni2 + 和Zn2 + 对酶降解有强烈的抑制作用。通过降解过程中壳聚糖溶液粘度的变化可以得出 ,该壳聚糖酶是以内切方式作用于壳聚糖。采用离子交换色谱柱对降解产物进行分离 ,得到了聚合度为 2～ 9的壳寡聚糖。该酶促反应符合米氏动力学方程 ,米氏常数Km 值为 2 60 1g/L ,Vmax 值为 3 5 79× 10 - 2 g/min·L。

壳低聚糖处理对苗期甘蔗抗旱性的影响

采用三种不同分子量(Mw<3 000;3 000<Mw<5 000;5 000<Mw<10 000)相同浓度(50 mg/L)的壳低聚糖分别叶面喷施苗期甘蔗,并测定土壤相对含水量和甘蔗叶片抗旱性生理指标(水势、脯氨酸含量、可溶性蛋白质),以期了解不同分子量壳低聚糖对甘蔗苗期抵御土壤不同程度水分胁迫的影响。结果表明,壳低聚糖叶面喷施可以延缓干旱胁迫下叶片水势下降,提高叶片脯氨酸含量和可溶性蛋白质含量。壳低聚糖有望成为一种新型的甘蔗抗旱调节剂。

壳低聚糖-海藻酸钠微胶囊的制备与表征

目的:探索了壳低聚糖-海藻酸钠微胶囊的制备方法和工艺条件,分析了微胶囊膜的厚度、机械强度、通透性等性能,对比得出性能最佳的壳低聚糖-海藻酸钠微胶囊。方法:改变壳低聚糖溶液pH值和成膜反应时间来制备微胶囊,用倒置相差显微镜观察并计算膜厚,用回旋式振荡器、AG-10TA万能测试仪对微胶囊膜力学强度进行检测,用牛血清白蛋白做蛋白释放对膜通透性等性能进行检测。结果:壳低聚糖溶液pH值为7时制备的微胶囊膜厚随反应时间的增加而增加。该条件下制备的微胶囊的压缩模量在成膜反应10min时已达到5.12kPa,通过回旋式振荡器振荡6h无一破损。微胶囊的蛋白释放随成膜时间的增加而减小。当成膜反应10min时,微胶囊的蛋白释放率随盐离子浓度增加而减小。当成膜时间延长后,微胶囊的蛋白释放率随盐离子浓度的增加而增加。结论:用壳低聚糖在溶液pH值为7时制备出的微胶囊力学性能较好。此种微胶囊膜的通透性在较短成膜时间下主要受到膜厚的影响;当成膜时间延长,膜的致密度则成为其主要影响因素。

印迹壳低聚糖在小鼠体内的代谢与组织分布

目的测定印迹水溶性壳低聚糖(CTS)在小鼠体内的代谢和分布。方法制备异硫氰酸荧光素标记的CTS(FITC-CTS),小鼠尾静脉iv给予FITC-CTS100 mg·kg-1,于10 min,0.5,1,4,8,12,24和48 h后行高效液相凝胶排阻色谱法(HPGPC)检测FITC-CTS在小鼠体内的含量,荧光分光光度法测定FITC-CTS在小鼠体内各组织中的分布。结果 FITC-CTS在血浆中快速清除,4 h其血浆浓度降低68%;在组织中60%分布到肾,30%分布到肝,几乎不分布到其他组织;24 h内体内90%通过尿液排出体外,主要为CTS原型。结论 CTS生物降解度低,主要分布到肾和肝,并原型快速通过尿液排出,体内基本无蓄积。

壳寡聚糖对菌斑生物膜形成的影响

[目的]通过体外实验,就壳寡聚糖对口腔细菌形成菌斑生物膜的影响进行研究,探讨壳寡聚糖防龋作用的可能机制,为进一步研究和开发、应用防龋新材料和方法提供实验依据。[方法]利用口腔常见细菌在釉质表面构建多细菌混合菌斑生物膜,分别在d1、3、5、7使用1.25g/L壳寡聚糖溶液处理实验组菌斑生物膜,应用扫描电镜观察了解壳寡聚糖处理对致龋细菌在具有获得性膜的牙釉质面上形成菌斑生物膜的影响。[结果]扫描电镜观察显示壳寡聚糖处理后使菌斑生物膜形成受阻,粘附的细菌显著减少。[结论]本实验结果提示壳寡聚糖对菌斑生物膜形成有抑制作用,可作为一类有效的天然防龋药物作进一步研究。

关于端基分析法测定壳低聚糖的相对数均分子质量问题的探讨

为使端基分析法更具合理性 ,文中以铁氰化钾为显色剂 ,以盐酸氨基葡萄糖和N 乙酰基 D 葡萄糖胺为还原糖的标准品 ,建立了端基分析法测定低聚糖相对数均分子质量的标准曲线。实验结果证明 :通过不同浓度的标准溶液绘制的标准曲线 ,测得壳低聚糖的相对数均分子质量差别比较大。以凝胶色谱法测定的相对数均分子质量为对照 ,经分析得 :以盐酸氨基葡萄糖为标准品建立的标准曲线方程和以N 乙酰基 D 葡萄糖胺为标准品建立的标准曲线方程更为合理。