拟南芥复制因子C亚基1在胚胎发生中起重要作用(英文)

复制因子C包含1个大亚基和4个小亚基,在DNA复制、损伤修复和细胞增殖中起重要作用,拟南芥复制因子C亚基1(AtRFC1)是人类复制因子C大亚基p140的同源蛋白。在对3个复制因子C亚基1的T-DNA插入突变株系rfc1-1、rfc1-2和rfc1-3的检验中,证实插入位点分别位于第16、19号外显子和启动子区域。T-DNA在外显子中的插入突变引起胚胎发育异常并导致胚胎和种子败育。将野生型拟南芥复制因子C亚基1基因转化到突变株系rfc1-1和rfc1-2后恢复了突变株的野生型表型,证明胚胎发生异常表型是由拟南芥复制因子C亚基1基因突变所引起的,AtRFC1在拟南芥胚胎发生中起重要作用。

细胞色素P450同工酶2C9及维生素K环氧化物还原酶亚单位1基因多态性对华法林用量的影响

目的探讨细胞色素P450同工酶2C9(CYP2C9)及维生素K环氧化物还原酶亚单位1(VKORC1)基因多态性分布情况及对华法林用量的影响。方法收集2014年3月至2016年10月宁波大学医学院附属医院临床口服华法林患者70例,应用PCR-荧光探针法检测CYP2C9和VKORC1基因多态性,记录患者年龄、体重、身高、凝血酶原时间、国际标准化比值、华法林剂量等指标。结果 VKORC1AA+CYP2C9*1/*1基因型58例(82.9%)、VKORC1AA+CYP2C9*1/*3基因型5例(7.1%)、VKORC1AG+CYP2C9*1/*1基因型5例(7.1%)、VKORC1GG+CYP2C 9*1/*1基因型2例(2.9%),服用华法林平均剂量分别为(3.1±0.5)mg/d、(1.6±0.1)mg/d、(4.4±0.4)mg/d、(5.5±0.4)mg/d。结论患者中CYP2C9和VKORC1基因存在多态性,且不同基因型患者间华法林用量差别较大。

子痫前期孕妇血清补体C1亚单位、C8 β链及H因子相关蛋白5变化及意义

目的探讨子痫前期孕妇血清补体C1亚单位(C1q)、C8β链(C8β)及H因子相关蛋白5(CFHRP5)变化及意义。方法选取2020年2月至2021年2月在本院首次进行产检的120例孕妇。收集孕妇的一般相关资料,在20~24周对患者进行血压监测,根据妊娠期高血压诊断标准将孕妇分为子痫前期组(n=48)和单纯高血压组(n=72),根据子痫前期组病情程度分为非重度组(n=32)和重度组(n=16),检测入试者血清补体C1q、C8β、CFHRP5、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮生长因子(VEGF),分析各指标在孕妇机体变化的意义。结果子痫前期组中年龄≥35岁、有家族遗传史以及BMI≥24 kg/m2的人数占比均大于单纯高血压组,收缩压和舒张压均高于单纯高血压组(P<0.05);子痫前期组血清C1q、C8β、VEGF水平均低于单纯高血压组,CFHRP5、hs-CRP水平均高于单纯高血压组(P<0.05);非重度组血清C1q、C8β、VEGF表达水平均高于重度组,CFHRP5、hs-CRP水平均低于重度组(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,C1q、C8β、CFHRP5、hs-CRP、VEGF及其联合检测均有预测子痫前期的价值(P<0.05);血清C1q、C8β、VEGF水平与子痫前期严重程度均呈负相关(P值均<0.05),CFHRP5、hs-CRP水平与子痫前期严重程度均呈正相关(P值均<0.05)。结论血清C1q、C8β、CFHRP5与hs-CRP、VEGF联合检测均具有预测子痫前期的价值,且与子痫前期的发展具有相关性。

G蛋白β_3亚单位C825T基因多态性与代谢综合征的关系——附253例报告

目的:探讨原发性高血压家族成员的G蛋白β3亚单位C825T基因多态性与代谢综合征的关系。方法:应用PCR和PCR-限制性片段长度多态性技术(PCR-restriction fragment length polymor-phism,PCR-RFLP)对原发性高血压家族成员中的148例代谢综合征患者(代谢综合征组)和105例非代谢综合征者(对照组)进行G蛋白β3亚单位C825T基因多态性分析。结果:T等位基因频率在代谢综合征组显著高于对照组(57%比41%,P(0·05)。回归分析结果显示,调整其他危险因素影响后,825CT/TT基因型与代谢综合征呈正相关。结论:G蛋白β3亚单位C825T基因多态性与原发性高血压家族成员的代谢综合征发病有关,T等位基因可能是原发性高血压家族成员发生代谢综合征的遗传危险因素之一。

小鼠肿瘤致死因子α诱导的TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶δ亚单位的相互作用

人类B12蛋白是第一个被鉴定受肿瘤坏死因子α的诱导的蛋白,在小鼠中又称为TNFAIP1,其功能尚未见报导.采用蛋白质pull down、荧光定位和免疫共沉淀分析一系列实验证明小鼠TNFAIP1蛋白与DNA聚合酶δ的亚单位P50发生直接相互作用.由此推测TNFAIP1蛋白参与DNA复制过程,并为研究人TNFAIP1基因的功能提供参考.

上调HBO1基因对亚溶解型C5b-9刺激大鼠GMCs生成CCL5的作用机制研究

目的研究上调乙酰基转移酶(HBO1)基因对亚溶解型C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)生成趋化因子CCL5的作用机制。方法构建外源性真核表达重组质粒pIRES2-HBO1,利用NeonTM电转仪将重组质粒转染至体外培养的GMCs中,免疫印迹(WB)实验鉴定外源性过表达HBO1的结果。再进行分组实验(MEM组、pIRES2组、亚溶解型C5b-9组,以及pIRES2-HBO1+亚溶解型C5b-9组)。分别用实时PCR和ELISA法检查不同分组处理后CCL5的mRNA和蛋白水平,并用荧光素酶报告实验检测CCL5的启动子活性情况。结果WB实验表明,真核表达重组质粒pIRES2-HBO1构建成功。用pIRES2-HBO1转染GMCs后,GMCs在亚溶解型C5b-9复合物的刺激下生成CCL5基因的水平及其启动子活性均显著升高。结论成功构建了pIRES2-HBO1真核表达重组质粒,并初步证实HBO1基因表达能够正向调控亚溶解型C5b-9诱导大鼠GMCs生成趋化因子CCL5。

C型产气荚膜梭菌α、β_1毒素基因的融合

利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体DNA中扩增出α和β1 毒素基因,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建了含αβ1 融合基因表达质粒重组菌株BL2 1 (DE3) (pETXAB1 )。经酶切鉴定和核苷酸序列测定证实,构建的重组质粒pETXAB1含有αβ1 融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经ELISA检测,重组菌株表达的αβ1 融合蛋白能够被α、β1 毒素抗体识别。免疫实验结果表明,αβ1 融合蛋白免疫的小鼠可以抵抗1MLD的C型产气荚膜梭菌C5 9 44毒素攻击,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪红痢基因工程亚单位苗的候选菌株。

四种靶向因子与柯萨奇病毒B3 VP1融合基因疫苗免疫效果的比较

目的:比较巨噬细胞源趋化因子(MDC)、补体片段C3d3、志贺毒素B亚单位(STxB)和小鼠β-防御素2(mBD2)分别与柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1构建的融合基因疫苗及VP1基因疫苗对小鼠的免疫效果。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为6组,每组22只,分别于股四头肌注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3、pcD-NA3/STxB-VP1和pcDNA3/mBD2-VP1,接种剂量为每次100μg/只,3周免疫1次,共3次。每次免疫后第14天内眦静脉取血,用微量中和试验滴定血清中和抗体滴度。第3次免疫后第21天,每组随机取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,用CCK-8细胞计数法检测特异性CTL的杀伤活性;每组取3只小鼠以3LDLD50CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血清病毒滴度;其余小鼠以5LDLD50的CVB3攻击,观察各组的生存情况。结果:除了pcDNA3对照组,其他各组的中和抗体滴度均随免疫次数的增加而提高(P<0.01),第3次免疫后,pcD-NA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3和pcDNA3/mBD2-VP1组的抗体滴度明显高于pcDNA3/VP1组(P<0.01);pcDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/mBD2-VP1组CTL杀伤活性显著高于其他各组(P<0.01)。致死量病毒攻击后,pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3和pcDNA3/mBD2-VP1组小鼠血中病毒滴度显著低于其他组(P<0.01);pcDNA3/MDC-VP1和pcD-NA3/VP1-C3d3组小鼠生存率显著高于其他各组(P<0.05)。结论:pcDNA3/MDC-VP1和pcDNA3/VP1-C3d3能诱导出较强的体液免疫和细胞免疫,能有效降低血中病毒滴度,获得较高的小鼠生存率;整体效果优于其他组。

CYP2C9、VKORC1基因多态性在PTE患者华法林抗凝治疗中的应用分析

目的探讨细胞色素P450氧化酶2C9(CYP2C9)、维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因多态性在肺血栓栓塞症(PTE)患者华法林抗凝治疗中的应用效果。方法选取2017年1月至2020年6月河北医科大学第二医院收治的163例PTE患者作为研究对象,根据华法林用药方式不同分为研究组(82例)和对照组(81例),研究组患者根据CYP2C9、VKORC1基因类型计算华法林初始剂量进行治疗,对照组患者以常规3 mg/d为初始剂量进行治疗。比较两组患者华法林起始剂量、维持剂量、国际标准化比值(INR)首次达标时华法林总剂量和日平均华法林剂量,INR达标时间、INR检测次数、住院时间、总医疗费用,以及不良反应发生情况。结果研究组82例患者CYP2C9的基因型为*1/*1(*2CC/*3AA)野生型74例、*1/*3(*2CC/*3AC)突变型7例、*3/*3(*2CC/*3CC)突变型1例,VKORC1基因型为AA野生型67例、GA突变型12例、GG突变型3例。研究组华法林起始剂量、维持剂量、INR首次达标时华法林总剂量和日平均华法林剂量均明显少于对照组[(1.91±0.72)mg/d比(3.00±0.00)mg/d、(2.33±0.64)mg/d比(3.24±0.98)mg/d、(24.96±5.17)mg比(42.50±9.85)mg、(2.51±0.70)mg比(3.47±1.06)mg](P<0.01);研究组INR达标时间、住院时间明显短于对照组[(12.54±2.20)d比(15.03±2.62)d、(12.67±5.87)d比(15.82±6.41)d](P<0.01),INR检测次数及总医疗费用明显少于对照组[(3.23±0.66)次比(4.57±1.06)次、(1.24±0.37)万元比(1.57±0.34)万元](P<0.01)。两组总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论以CYP2C9、VKORC1基因类型为指导计算华法林起始剂量,制订华法林个体化治疗方案,可有效减少华法林无效抗凝及过度抗凝。

CYP2C9和VKORC1基因多态性与华法林个体化用药的临床研究

目的：探讨细胞色素P450同工酶2C9（CYP2C9）及维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1（VKORC1）基因多态性对华法林个体化用药的影响。方法110例临床初次和维持口服华法林抗凝治疗的患者，记录患者的年龄、性别、身高、体重和服用华法林5-7 d后每次国际标准化比值（INR）的测定值， INR达到目标值时华法林的总用量以及华法林的日均用量。同时检测CYP2C9＊1、＊2、＊3位点和VKORC1-1639 AA、AG、GG位点基因型。结果对于初次口服华法林的患者， CYP2C9＊2或＊3基因型患者在抗凝治疗初期易发生INR值超过治疗窗（INR〉3.0）；而VKORC1-1639 AG或GG基因型患者INR达标时间明显延长，并且INR达标时所服用的华法林总剂量和日均剂量均高于AA基因型患者。结论 CYP2C9和VKORC1基因检测对于指导患者华法林的个体化用药具有一定的临床意义。

EGFR基因突变晚期非小细胞肺癌患者TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白的表达及意义

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)基因突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中胸苷酸合成酶(TS)、切除修复交叉互补蛋白1(ERCC1)、β微管蛋白3(β-tubulin-Ⅲ,TUBB3)和核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1)蛋白的表达,为临床上EGFR基因突变晚期NSCLC患者的个体化化疗方案选择提供参考。方法选取2015年1月至2017年6月陕西中医药大学第二附属医院呼吸内科收治的晚期NSCLC患者进行研究,依据EGFR基因的29种突变情况检测结果筛选出发生EGFR基因突变的128例晚期NSCLC患者。应用免疫组织化学法检测所选患者肿瘤组织中TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白的表达水平,通过观察各蛋白表达水平的差异情况、相关性以及与生存期的关系,来评估其在晚期NSCLC患者选择个体化化疗方案中的应用价值。结果EGFR基因突变晚期NSCLC患者肿瘤组织中TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白的表达阳性率分别为65.63%、60.16%、54.69%和50.78%;TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白表达的阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤组织分型均无关(P>0.05);患者肿瘤组织中的TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白表达之间均呈正相关(P<0.05);TS、ERCC1和RRM1表达阴性患者的平均生存期和2年存活率分别为(23.33±1.22)个月、(22.97±1.41)个月、(18.57±2.03)个月和72.73%、68.63%、65.08%,均明显高于表达阳性患者的平均生存期[(17.43±1.68)个月、(17.63±0.97)个月、(15.93±1.87)个月]和2年存活率(51.19%、49.35%、46.15%),差异均有统计学意义(P<0.05);β-tubulin-Ⅲ表达阴性患者的平均生存期和2年存活率分别为(17.03±1.55)个月和58.62%,与表达阳性患者的(16.87±1.36)个月和48.57%比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论临床上可以通过检测TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白的表达程度来筛选效能较好的化疗药物,指导EGFR基因突变晚期NSCLC患者选择个体化化疗方案。同时,TS、ERCC1、β-tubulin-Ⅲ和RRM1蛋白在判断预后方面也有很高的应用价值。

皖南某地汉族人群CYP2C9 1075A>C和VKORC1 1639G>A基因多态性研究

目的探讨CYP2C9和VKORC1基因在皖南地区汉族人群中多态性分布。方法选取皖南医学院弋矶山医院2013年8月至2014年8月135例需接受华法林抗凝治疗的患者,采用原位杂交荧光染色分析技术检测患者CYP2C9 1075A>C和VKORC1 1639G>A基因型。结果患者CYP2C9 1075AA基因型94.07%,AC基因型为5.19%,CC基因型为0.74%;VKORC1 1639基因AA型83.71%,GA型14.81%,GG型1.48%。CYP2C91075A等位基因分布频率为96.67%,C等位基因频率为3.33%;VKORC1 1639A等位基因和G等位基因分布频率分别为91.11%和8.89%。CYP2C9 1075AA/VKORC1 1639AA基因组合分布频率为78.52%。结论皖南地区汉族人群CYP2C9和VKORC1基因存在多态性分布,可为华法林个体化抗凝提供用药参考。

CYP2C9和VKORC1基因多态性对华法林稳定剂量的影响

目的探讨细胞色素P450 2C9基因(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因(VKORC1)多态性及年龄、性别、体重指数对中国汉族人群华法林稳定剂量的影响。方法收集山西地区口服华法林抗凝患者病理组179例,健康对照组150例,采用扩增阻滞突变体系-聚合酶链式反应技术(ARMS-PCR)检测CYP2C9*3(1075A>C)、VKORC1(-1639G>A)基因多态性,并比较不同基因型间华法林稳定剂量以及年龄、性别和体重指数对华法林稳定剂量的影响。结果病例组检出CYP2C9*3(1075A>C)AA、AC、CC型分别为158例(88.3%)、19例(10.6%)、2例(1.1%),AC+CC型华法林稳定剂量(2.35±1.13)mg/d明显低于AA型(2.92±1.11)mg/d(P<0.05)。VKORC1(-1639G>A)GG、GA、AA型分别为0例、22例(12.3%)、157例(87.7%),AA型华法林稳定剂量(2.72±1.00)mg/d明显低于GA型(3.84±1.46)mg/d(P<0.05)。非遗传因素中年龄与华法林日均稳定剂量呈负相关(r=-0.186,P<0.05)。性别及体重指数与华法林日均稳定剂量无明显相关(P>0.05)。结论年龄及CYP2C9*3(1075A>C)和VKORC1(-1639G>A)基因多态性对华法林日均稳定剂量有影响,临床医生可以参考这些变量指导患者个体化华法林的使用,对临床提高华法林的安全使用具有潜在的意义。

CYP2C19和VKORC1基因多态性在指导华法林个体化用药中的价值

探讨CYP2C19、VKORC1基因多态性对华法林个体化用药的影响。方法 2019年1月~2020 年12月选取我院服用华法林抗凝的100例住院患者,检测 CYP2C19 *1、*2、*3 位点和VKOR C1-1639 AA 、AG 、GG 位点基因型,对患者的年龄、性别、身高、基础INR值、ALB值、ALT值和INR首次达标的时间,INR达标后华法林的总用量以及日均用量的信息进行收集整理。结果 VKORC1基因方面:排除CYP2C19基因型差异的干扰,VKORC1-1639AA与VKORC1-1639 AG /GG 基因型患者相比, INR首次达标的天数短(P<0.05),且基因型AA患者INR指标合格时,需要的华法林的总量高以及日平均用量均少于基因型AG/GG患者(P<0.05);CYP2C19方面:排除VKORC1基因型差异的干扰, CYP2C19*2/*3基因患者相比CYP2C19*1基因患者,无论是首次达标天数还是华法林总量均是最低;若两种基因型同时变异的患者与基因型为野生型患者比较,INR初次达标天数略有延长,所需的华法林总量也有所增加。结论 CYP2C19 和 VKORC1基因检测对于指导患者华法林的临床个体化用药具有一定价值,减少不良出血事件的发生概率,增加患者使用华法林的安全性。

荧光PCR-熔解曲线法检测新疆回族人群CYP2C9和VKORC1基因多态性研究

目的应用荧光PCR-熔解曲线法检测新疆回族人群细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因多态性,研究新疆回族人群CYP2C9和VKORC1基因分布及基因突变频率情况,并评价荧光PCR-熔解曲线法临床使用的适用性。方法采用荧光PCR-熔解曲线法和测序法对比检测CYP2C9*2、CYP2C9*3和VKORC1(-1639G/A)的基因多态性。结果 228例新疆回族人群中,共检测出CYP2C9*1/*1标本199例,CYP2C9*1/*2标本2例,CYP2C9*1/*3标本26例,CYP2C9*3/*3标本1例,未检测出CYP2C9*2/*2和CYP2C9*2/*3标本。VKORC1(-1639G/A)检测出2种等位基因G和A,其中VKORC1-1639G/G型标本检出2例,VKORC1-1639G/A型标本检出39例,VKORC1-1639A/A型标本检出187例,与测序法对比检测比较,荧光PCR-熔解曲线法与测序法检测结果完全一致。结论新疆回族人群同样具有CYP2C9基因*2、*3位点和VKORC1基因-1639位点的多态性,其发生频率与新疆维吾尔族及其他地域人群的具有一定差异,所采用的荧光PCR-熔解曲线法用于基因多态性检测可满足临床检测要求。

CYP2C9和VKORC1基因多态性指导临床华法林初始抗凝的研究

目的评价细胞色素P450酶2C9基因（CYP2C9）和维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因（VKORC1）多态性对郑州地区进行华法林初始抗凝疗效的影响。方法 200例初次服用华法林的患者,随机分成基因组和对照组,各100例。基因组根据CYP2C9和VKORC1基因检测结果推荐剂量范围,从低推荐剂量开始服药,对照组按照常规方式给药。计算服用华法林后国际标准化比值（INR）达2~2.5时两组所需的时间及INR首次达标时华法林日平均剂量等指标。结果基因组INR首次达标时所需时间少于对照组（P〈0.05）。基因组VKORC1-1639AG或GG患者INR达标时华法林日平均剂量比AA型多（P〈0.05）。INR达标时华法林日平均剂量与基因检测推荐范围相近。结论 VKORC1和CYP2C9基因检测指导可以缩短INR达标时间,对华法林日均剂量的确定有一定作用,对指导初始抗凝个体化应用华法林有一定的临床意义。

妊娠期高血压患者钙电压门控通道亚单位α1c基因与疾病易感性的关系

目的探究妊娠期高血压患者钙电压门控通道亚单位α1c基因(CACNA1C)多态性与疾病易感性的关系。方法选取2020年1月到2022年6月于海口市妇幼保健院建档的375例妊娠期高血压孕妇和303名正常孕妇,分别作为妊娠期高血压组和对照组,收集两组孕妇孕晚期生化指标检测结果,采用聚合酶链反应-限制性酶切片断长度多态性(PCR-RFLP)法检测两组孕妇CACNA1C基因rs2238032、rs10848683、rs2299661位点等位基因,多因素logistic回归分析CACNA1C基因与妊娠期高血压发生的关系。结果两组CACNA1C rs2238032位点基因型构成比差异具有统计学意义(P<0.05),而rs10848683及rs2299661位点基因型构成比差异无统计学意义(P>0.05)。对照组中rs2238032位点不同基因型患者年龄、体重指数、孕周、孕次、24 h平均收缩压、24 h平均舒张压差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠期高血压组中rs2238032位点TT型患者体重指数、24 h平均收缩压、24 h平均舒张压高于GT型、GG型患者(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,rs2238032基因型多态性是影响妊娠期高血压发生的相关因素(P<0.05)。结论妊娠期高血压患者CACNA1C基因rs2238032位点TT型突变与血压水平变化有关,且会增加妊娠期高血压易感性。

乳腺癌组织中HIF-1α及VEGF-C蛋白表达分析

目的:分析乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子-C(VEGFC)的表达及二者的相关性,探讨其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中HIF-1α、VEGF-C蛋白的表达,并进行统计学分析。结果:HIF-1α蛋白在乳腺癌中阳性率(52.08%)明显高于在乳腺纤维腺瘤中的阳性率(20.00%);VEGF-C蛋白在乳腺癌中的阳性率(66.67%)明显高于在乳腺纤维腺瘤中的阳性率(33.33%)。HIF-1α、VEGF-C的表达均与临床分期、组织学分级及淋巴结转移呈正相关,与肿块大小、PR、ER无关,HIF-1α的表达还与VEGF-C呈正相关。结论:HIF-1α及VEGF-C在乳腺癌组织中表达明显上调且呈正相关,提示二者在乳腺癌的生长,淋巴管的生成及淋巴结的转移中可能有协同作用。

GNB3基因C825T多态同哈萨克族人群肥胖的关联分析

目的探讨鸟苷酸结合蛋白基因β3亚单位(G-proteinβ3Subunit,GNB3)第10外显子C825T多态同中国哈萨克族人群肥胖的关系。方法应用PCR技术及限制性长度多态(RFLP)技术在277例哈萨克族正常体重者,121例超重者及102例肥胖者中检测GNB3基因C825T多态性。结果GNB3基因C825T多态3种基因型分别为TT、CT及CC。其中CT、TT基因型分布频率在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,54.5%,54.9%,23.4%,16.6%,20.6%,基因型分布在组间无显著性差异(P=0.39)。T等位基因分布在正常体重组、超重组及肥胖组分别为46.9%,43.8%,48.0%,组间也无显著性差异(P=0.63)。将正常体重及超重者按高血压及正常血压分层,发现超重及肥胖的高血压者TT基因型频率(26.2%)较正常体重的高血压者(14.7%)有增高趋势(P=0.061)。结论GNB3基因825T等位基因可能不是中国哈萨克族肥胖的主要遗传易感因子,但TT基因型可能在超重的高血压者中有一定作用,此基因在中国其他人群肥胖合并高血压中的作用有必要进行深入研究。

基于线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1基因鉴别华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的双重PCR法的建立

分别提取华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的基因组DNA,针对两种吸虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1(COX1)基因设计引物,进行单重和双重PCR扩增。用针对华支睾吸虫的3对引物进行单重PCR扩增,FC1/RC1和FC3/RC3引物分别扩增出328 bp和356 bp的特异性目的条带,而FC2/RC2引物未扩增出任何条带;用针对扇棘单睾吸虫的FH1/RH1和FH2/RH2引物进行单重PCR扩增,分别扩增出200 bp和190 bp的特异性目的条带。用华支睾吸虫FC1/RC1引物,结合扇棘单睾吸虫的FH1/RH1和FH2/RH2引物,分别进行双重PCR扩增,均能扩增出特异性条带,彼此间无干扰。