间充质干细胞在复发性自然流产中治疗潜能的研究进展

复发性自然流产(RSA)是妊娠早期最常见的并发症之一,影响2%~5%的育龄期女性,其发病率呈逐年上升趋势,不仅对女性的身心健康造成了影响,也给社会和家庭造成沉重的经济负担。间充质干细胞(MSCs)是一类源于多种组织的中胚层间充质的非造血成体多能干细胞,具有多向分化和自我更新等特性,对于RSA患者的生育结局具有改善作用,已成为近年研究的热点。因此,本文探明了不同来源的MSCs改善RSA患者妊娠结局的作用与机制,并分析其研究现状及存在的问题。

子宫自然杀伤细胞在复发性流产中的研究进展

复发性流产(RSA)是一种早期妊娠并发症,其病因复杂,包括遗传、内分泌、解剖异常、感染和免疫等因素。其中,T淋巴细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)等免疫因子在RSA发生发展中的作用受到广泛关注,尤其是NK细胞,是人体免疫系统的重要组成部分。子宫NK细胞(uNK细胞)是着床时子宫内膜中数量最多的免疫细胞,在妊娠早期蜕膜血管生成、滋养层侵袭和胎盘螺旋动脉重塑中发挥重要作用。随着研究的进展,了解uNK细胞的起源、分类、功能及与RSA的关系可能为RSA的治疗和预防提供靶点。

养血安胎方对复发性自然流产小鼠胎盘血管生成与自噬的调控作用研究

目的探讨养血安胎方治疗复发性自然流产(RSA)的分子机制。方法构建肾虚血瘀型RSA小鼠模型,养血安胎方干预后收集小鼠胎盘,苏木素伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察小鼠胎盘病理变化、免疫组化法测定小鼠胎盘增殖细胞核抗原(PCNA)、纤维蛋白原(Fibrinogen)及CD34蛋白的表达,Western blot法测定小鼠胎盘血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体2(p-VEGFR2)、p62,Beclin 1,LC3Ⅰ和LC3Ⅱ的蛋白表达,透射电镜观察小鼠胎盘的超微结构。结果与RSA组比较,RSA+养血安胎组小鼠取材时体重显著增加,胚胎吸收率显著降低;HE染色、Masson染色及PCNA、Fibrinogen蛋白表达显示小鼠胎盘发育状况明显改善,透射电镜结果与p62、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的蛋白表达显示小鼠胎盘自噬水平明显降低,CD34、VEGFA和p-VEGFR2蛋白表达显示胎盘血管生成明显增加。结论养血安胎方能够改善RSA小鼠的胎盘发育状况,促进胎盘血管生成,其方式可能与抑制自噬体与溶酶体的融合,从而抑制自噬有关。

养血安胎方调节自噬治疗复发性自然流产小鼠的机制研究

目的探讨养血安胎方调节自噬影响胎盘血管生成进而治疗复发性自然流产(RSA)的机制。方法对妊娠小鼠分别使用雷帕霉素、3-甲基腺嘌呤及养血安胎方进行干预,收集小鼠胎盘,苏木素伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察妊娠小鼠的病理改变,免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA)、Fibrinogen及CD34蛋白的表达,Western blot法测定血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体2(p-VEGFR2)、p62、Beclin1、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白的表达,透射电镜观察胎盘的超微结构。结果与正常妊娠组比较,雷帕霉素(Rapa)组小鼠取材时体重明显减轻,胚胎吸收率明显增加,HE染色、Masson染色及PCNA与Fibrinogen蛋白表达显示小鼠胎盘发育变差;透射电镜结果与p62、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达显示小鼠胎盘自噬水平明显增加;CD34、VEGFA和p-VEGFR2蛋白表达显示胎盘血管生成异常;与Rapa组比较,Rapa+养血安胎组小鼠取材时体重明显增加,胚胎吸收率明显降低,HE染色、Masson染色及PCNA与Fibrinogen蛋白表达显示小鼠胎盘发育得到明显改善,透射电镜结果与p62、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达显示小鼠胎盘自噬水平明显降低,CD34、VEGFA和p-VEGFR2蛋白表达显示胎盘血管生成增加。结论养血安胎方通过抑制自噬体和溶酶体的融合,从而抑制自噬,改善妊娠小鼠的胎盘发育状况,促进胎盘的血管生成,从而降低了流产率。

养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产小鼠子宫内膜上皮细胞间质转化及蜕膜化的作用研究

目的探讨养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产(RSA)小鼠子宫内膜上皮细胞-间质转化(EMT)及蜕膜化的作用。方法构建肾虚血瘀型RSA小鼠以及正常妊娠小鼠,正常妊娠小鼠分别腹腔注射2 mg·kg^(-1)雷帕霉素(Rapa)溶液或15 mg·kg^(-1)3-甲基腺嘌呤(3-MA)溶液进行干预;另设置相同方法处理的RSA小鼠、Rapa及3-MA干预的小鼠组,并同时灌胃给药浓度为28.08 g·kg^(-1)的养血安胎溶液进行干预,收集小鼠子宫内膜。通过Western blot法测定小鼠子宫内膜EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Fibronectin的表达,以及蜕膜化相关蛋白BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的表达。结果与正常妊娠组比较,RSA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;Rapa组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;3-MA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,HOXA10的蛋白表达显著增加。与RSA组比较,RSA+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。与Rapa组比较,Rapa+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。结论养血安胎方能够抑制自噬,从而促进妊娠小鼠子宫内膜的EMT及蜕膜化过程,降低流产率。

血清miR-199、miR-21对复发性自然流产患者流产再发生的预测价值分析

目的探讨miRNA-199、miR-21对复发性自然流产(RSA)患者流产再发生的预测价值。方法回顾性选取2021年7月至2023年5月湖州市第三人民医院妇科诊治的RSA患者95例,根据是否再发生流产分为再发生组和未发生组。收集患者临床资料,抽取患者肘静脉血检测血清miR-199、miR-21水平。随访观察95例RSA患者孕28周流产再发生率。比较再发生组与未发生组患者临床资料及血清miR-199、miR-21水平;分析RSA患者流产再发生的影响因素;分析血清miR-199、miR-21对RSA患者流产再发生的预测效能。结果95例RSA患者均无失访,其中孕28周流产再发生24例,发生率为25.26%(24/95),71例未发生。再发生组年龄≥35岁、自然流产次数≥4次患者比例均高于未发生组(均P<0.05),孕酮水平及超声多模态评分均低于未发生组(均P<0.05)。再发生组血清miR-199、miR-21水平均高于未发生组(P<0.05)。自然流产次数≥4次(OR=2.984)及血清miR-199(OR=4.141)、miR-21(OR=4.926)水平升高是RSA患者流产再发生的独立危险因素(均P<0.05),超声多模态评分(OR=0.206)是保护因素(P<0.05)。血清miR-199、miR-21水平预测RSA患者流产再发生的AUC分别为0.779、0.804,最佳截断值分别为3.57、2.95;两者联合预测AUC为0.907,明显高于各指标单独预测。结论RSA患者血清miR-199、miR-21均呈高表达,与流产再发生密切相关,两者联合预测流产再发生的价值较高,有助于指导临床做进一步决策与治疗。

复发性自然流产患者再妊娠早期血清miR-146b、miR-184水平与妊娠结局的关系

目的探讨复发性自然流产(RSA)患者再妊娠后早期血清微小RNA-146b(miR-146b)、微小RNA-184(miR-184)水平与妊娠结局的关系。方法选取2019年5月至2022年5月沧州市人民医院收治的146例RSA再妊娠患者作为RSA组,选取同期146例身体正常且无流产史的孕妇作为对照组。根据患者妊娠情况,以流产、畸形儿、低体重儿、死胎、产褥出血等为不良妊娠结局,将患者分为不良妊娠结局组(n=49)和正常妊娠结局组(n=97)。比较血清miR-146b、miR-184表达水平,以及不良妊娠结局组和正常妊娠结局组临床资料,采用Pearson法分析血清miR-146b、miR-184水平的相关性,采用Logistic回归分析不良妊娠结局的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-146b、miR-184对不良妊娠结局的预测效能。结果RSA组血清miR-146b低于对照组,miR-184高于对照组(P<0.05)。不良妊娠结局组孕次、舒张压、收缩压均高于正常妊娠结局组,产次低于正常妊娠结局组(P<0.05)。不良妊娠结局组血清miR-146b低于正常妊娠结局组,miR-184高于正常妊娠结局组(P<0.05)。不良妊娠结局组血清miR-146b与miR-184水平呈负相关(r=-0.566,P<0.001)。miR-146b和miR-184均为RSA患者再妊娠后不良妊娠结局的独立影响因素(P<0.05)。血清miR-146b、miR-184联合预测效能高于单独预测(P<0.05)。结论RSA患者血清miR-146b显著下调,miR-184显著上调,两者水平与RSA及RSA患者再妊娠后的不良妊娠结局具有相关性。

GnRH-a联合糖皮质激素治疗子宫内膜异位症合并复发性自然流产患者的效果

目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合糖皮质激素在子宫内膜异位症(EMT)合并复发性自然流产(RSA)患者中的应用效果。方法:选取2019年10月至2020年10月于医院妇科就诊的120例EMT合并RSA患者为研究对象,使用随机数字表法分为对照组和观察组各60例。对照组给予GnRH-a治疗,观察组在对照组基础上联合糖皮质激素治疗,比较两组炎症介质水平、血清性激素水平、妊娠情况及复发情况。结果:治疗后,两组患者C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平均低于治疗前,且观察组各炎症介质水平均低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者促黄体生成素(LH)水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05);观察组活产率(46.67%)高于对照组(26.67%),复发率(3.33%)低于对照组(15.00%)(P<0.05);两组患者不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GnRH-a联合糖皮质激素应用于EMT合并RSA患者中可以有效调节血清性激素水平,改善妊娠情况,降低复发率,且不会增加用药不良反应。

不明原因复发性自然流产应用孕激素治疗的研究进展

当前临床对不明原因复发性自然流产治疗不具备一定针对性,缺少有效的治疗方法,成为医学领域的研究难点。孕激素在维持妊娠中极为重要,但妊娠12周前,是否需要增加孕激素还有待分析。本文对不明原因复发性自然流产的孕激素治疗进展进行分析。

习惯性流产警惕抗磷脂综合征

临床上一般将连续发生3次或者以上的自然流产称为习惯性流产,在妊娠女性中,习惯性流产的发生率高达15%~20%,大部分患者之前有过多次流产。普遍认为该疾病的发生和较多因素相关,例如长期处于高温环境、伴有抽烟嗜酒等不良嗜好、内分泌失调、感染、遗传及免疫因素等。

中成药治疗复发性流产的临床研究概况性综述

目的系统梳理中成药治疗复发性流产(RSA)的药品信息和临床研究现状,为临床合理用药提供参考证据,为临床实践和医疗卫生决策提供依据。方法检索中英文数据库中对中成药治疗RSA的临床文献进行系统回顾,利用相关软件进行文献管理,并对药品及研究的基本信息进行提取,以文字描述和图表的形式开展可视化对比分析。结果共纳入95篇文献,包括系统评价和Meta分析2篇,临床研究93篇;涉及11种中成药,包括1种中药注射剂。临床研究数量较多的药品是滋肾育胎丸、固肾安胎丸和保胎灵制剂;2005年起相关研究数量整体呈升高趋势,已在全国24个地区开展;样本量为51~100例的研究最多,包括67项(72.04%);研究数量最多的比较类型是中成药联合西药与西药比较,研究总量达75项(80.65%)。目前临床无统一的治疗方案及疗效判断标准,部分研究(43.01%)记录了患者用药过程中不良反应发生情况。结论临床上中成药治疗RSA具有较好的适宜性,其与西药联用的效果明确。但存在药品说明书内容缺乏、用药时机疗程和结局评价指标未标准化、用药安全的重视程度不够、中医特色体现度不足等问题有待未来改善。

复发性自然流产1 101例病因分析

目的分析复发性自然流产的病因,为临床诊断、治疗提供依据。方法对2010年1月—2014年10月在上海交通大学医学院附属仁济医院妇科门诊就诊,确诊为复发性自然流产患者1 101例进行病因分析。结果 1 101例患者中,母体因素分析发现:单因素病因者有551例,占50.05%;多因素病因者有148例,占13.44%;另有402例原因不明,占36.51%。结论复发性自然流产的病因复杂,包括母体因素如夫妻染色体异常、生殖道解剖异常、自身免疫因素、内分泌异常和血栓前状态等,胚胎因素如胚胎染色体异常以及母胎间妊娠免疫耐受失衡等多种因素。对复发性流产患者再次妊娠前进行全面系统而规范的病因筛查,并且针对病因进行个体化综合治疗,对于提高再次妊娠治疗的成功率有非常重要的意义。

复发性自然流产危险因素的研究进展

近年来复发性自然流产已经成为一个全球性医学领域的重要话题,其有着复杂的危险因素,目前人们越来越多的聚焦于对其危险因素的研究。遗传因素是最常见的危险因素,免疫因素、感染因素、男性特有因素及女性特有因素在其中也起着重要的作用。环境污染和一些未知因素同样能导致复发性自然流产。本文将对复发性自然流产的危险因素作一综述,希望能给复发性流产的治疗带来帮助。

不明原因复发性自然流产胚胎绒毛组织MiRNAs的表达研究

利用miRCURY LNATMmicroRNA Arrays 10.0对不明原因复发性自然流产胚胎绒毛和正常胚胎绒毛组织miRNAs进行了检测.结果显示流产绒毛和正常绒毛组织有43个miRNAs存在明显表达差异(ratios≥2.0或ratios≤0.5),其中上调表达33个,下调表达10个.文献检索显示有12个差异表达miRNAs(上调10个,下调2个)已有功能研究报道,主要与细胞侵袭、离子转运和信号转导相关,另外31个尚无功能研究报道.该研究结果提示自然流产绒毛组织中某些差异表达的miRNAs可能与不明原因复发性自然流产的发生有关.

复发性自然流产患者自身抗体和甲状腺功能的检测及临床意义

目的分析复发性自然流产(RSA)患者血清抗核抗体(ANA)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、抗甲状腺球蛋白抗体(Tg-Ab)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)的检测结果及临床意义。方法选取2015年3~12月北京大学深圳医院妇产科门诊确诊为RSA的患者46例为疾病组,健康对照(health control,HC)组选择同期无任何不良孕产史的20例女性,采用间接免疫荧光法(IIF)和ELISA方法检测46例RSA患者和50例正常对照血清ANA,采用化学发光法检测TPO-Ab,Tg-Ab,TSH,FT3,FT4。结果 RSA组和对照组血清ANA(IIF),TPO-Ab,Tg-Ab阳性率分别是24%,24%,15%和15%,5%,5%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。RSA组和对照组血清TSH,TPO-Ab,Tg-Ab水平分别是2.70±1.38 mIU/L,38.99±10.18 IU/ml,3.07±1.69 IU/ml和2.14±1.32 mIU/L,4.04±1.32 IU/ml,0.64±0.53 IU/ml,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ANA和甲状腺抗体阳性可能和RSA发生相关,检测两者水平对于寻找不孕原因及采取适宜干预措施具有重要意义。

人脐带间充质干细胞移植治疗小鼠复发性自然流产效果及其机制探讨

目的观察人脐带华通氏胶间充质干细胞(WJ-MSCs)移植治疗复发性自然流产小鼠的效果,并探讨其机制。方法雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/c小鼠按1∶1比例合笼交配,制作正常妊娠小鼠模型(对照组,5只)。雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠按1∶1比例合笼交配,制作复发性自然流产小鼠模型20只,分为模型组、实验1组、实验2组、实验3组,每组各5只。模型组于孕1天经尾静脉注射DMEM/F12培养基0.2 mL;各实验组于孕第1天经尾静脉注射WJ-MSCs 0.2 mL(6×107个/mL),其中实验1组仅注射1次,实验2组隔天注射1次、连续2次,实验3组隔天注射1次、连续3次。分别于孕第14天处死各组小鼠,计算胚胎吸收率;取小鼠蜕膜及胎盘组织,采用Western blotting法检测IL-10、IL-17、IFN-γ蛋白,qRT-PCR法检测IL-10、IL-17、IFN-γmRNA。结果模型组及实验1组胚胎吸收率高于对照组,实验3组胚胎吸收率均低于模型组和实验1组(P均<0.05)。实验1、2组IL-17蛋白相对表达量高于对照组,实验3组低于对照组(P均<0.05)。实验1组蜕膜及胎盘组织中IFN-γmRNA相对表达量高于对照组,实验2、3组低于对照组(P均<0.05)。实验1、2、3组蜕膜及胎盘组织中IL-10 mRNA和蛋白相对表达量高于模型组,IL-17、IFN-γmRNA和蛋白相对表达量低于模型组(P均<0.05)。实验1、2、3组蜕膜及胎盘组织中的IL-10 mRNA和蛋白相对表达量递增,IL-17 mRNA和蛋白、IFN-γ蛋白相对表达量递减,除实验2、3组IFN-γmRNA表达差异无统计学意义外,各组其余指标相比,P均<0.05。结论 WJ-MSCs移植后复发性自然流产模型小鼠的胚胎吸收率降低,其机制可能与上调母-胎界面IL-10表达、下调IL-17及IFN-γ表达有关。

探讨 BA，EMAb 及 ACA与不明原因复发性自然流产的相关性

目的：探讨封闭抗体（BA），抗子宫磷脂抗体（EMAb）及抗心磷脂抗体（ACA）联合检测与不明原因复发性自然流产（UPSA）的相关性。方法选取不明原因复发性自然流产144例，偶发性自然流产166例和正常体检孕妇188例，检测其 BA，EMAb 和 ACA 并行统计学分析。结果 URSA 组分别与偶发性自然流产组及对照组相比较，BA 阴性率（74.31％，25.30％和50.53％），EMAb 阳性率（35.42％，7.23％和6.91％）和 ACA 阳性率（26.39％，5.42％和5.32％）差异均有统计学意义（χ2＝19.344～74.180，P 值均＜0.05；χ2＝37.837～42.586，P 值均＜0.05；χ2＝26.355～29.270，P 值均＜0.05）。URSA 组的 BA，EMAb 和 ACA 联合检测阳性率（84.72％）明显高于偶发性自然流产组及对照组（χ2＝35.532～93.076，P 值均＜0.05）。结论BA 的缺乏，EMAb 和 ACA 的产生与不明原因复发性自然流产存在密切的关系，联合检测对辅助诊断 URSA 及其预后判断具有重要的临床指导意义。

复发性自然流产育龄期妇女母-胎界面中细胞因子表达分析

目的:分析复发性自然流产(RSA)育龄期妇女母-胎界面中相关细胞因子表达水平变化。方法:连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女21例,收集流产蜕膜组织,采用酶联免疫吸附法进行蜕膜组织液中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ浓度等指标检测,并与同期早孕并行人工流产终止妊娠妇女(对照组,20例)相同测试结果比较。结果:RSA组蜕膜组织液IL-2和IFN-γ浓度均明显高于对照组,而IL-4和IL-10浓度则显著低于后者(P均<0.01)。结论:RSA育龄期妇女母-胎界面上存在着明确的Th1优势状态表达。

不明原因习惯性流产患者蜕膜自然杀伤细胞活性及表型的研究

目的 :探讨原因不明习惯性流产 (UHA)患者蜕膜自然杀伤 (NK)细胞的数量、表型特征及杀伤活性 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取确定妊娠并难免流产的UHA 32例 ,选取 2 0例正常妊娠行人工流产者作为对照组 ,用流式细胞仪检测两组蜕膜组织中NK细胞数量及表型 ,用改进的乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞杀伤活性。结果 :正常早孕蜕膜中CD5 6+CD3- NK细胞占蜕膜单个核细胞的 60 .73± 13.2 4 % ,为蜕膜组织的优势细胞群 ,UHA患者蜕膜中CD5 6+CD3- NK细胞总量与正常妊娠蜕膜组织中相同 ,而其CD5 6+CD16- 亚群却明显低于正常妊娠组 (P <0 .0 5 ) ,CD5 6+CD16+亚群含量及CD5 6+CD16+/CD5 6+CD16- 比值均异常增高 (P均 <0 .0 5 )。UHA组蜕膜组织中NK细胞杀伤活性及其异常增高率均高于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 )。结论 :NK细胞是孕早期蜕膜组织中的优势细胞群 。

转录因子FOXP3基因多态性与不明原因复发性自然流产的易感性研究

目的:基于不明原因复发性自然流产(URSA)的免疫耐受学说,探讨转录因子FOXP3基因多态性与URSA的易感性。方法:采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应(PCR-SSP)法检测FOXP3基因rs2232365A/G和rs5902434del/ATT多态性在146例URSA患者(URSA组)和112例健康体检者(对照组)中的基因型分布。结果:①rs2232365A/G的3种基因型在URSA组和对照组的分布差异具有统计学意义(P<0.05),且携带G等位基因明显增加URSA的风险(P=0.01,OR=1.61)。②rs59024343种基因型在两组的分布差异无统计学意义(χ2=4.62,P=0.10),但等位基因del缺失型频率URSA组较对照组高(χ2=4.40,P=0.036)。③单倍体型分析:G/del单体型明显增加URSA的发病风险(P=0.02,OR=1.53),而A/ATT单体型则对URSA的发病具有保护作用(P=0.02,OR=0.63)。结论:转录因子FOXP3基因启动子区rs2232365和rs5902434多态性与URSA的遗传易感性有关,携带G和del等位基因明显增加URSA的发病风险。