复方浙贝浸膏联合奥沙利铂对人结肠癌耐奥沙利铂移植瘤及细胞膜耐药相关蛋白表达的影响

目的观察复方浙贝浸膏(CZBE)联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP移植瘤小鼠的抑瘤作用,以及对移植瘤细胞耐药相关蛋白MDR1、MRP1及LRP5表达的影响。方法将人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP细胞接种于Balb/C裸鼠右前腋皮下构建人结肠癌耐L-OHP移植瘤模型,成模后按随机数字表法将移植瘤小鼠分成模型组、L-OHP组(L-OHP 3 mg/kg)、CZBE高剂量(CZBE 10 g/kg)联合L-OHP组、CZBE中剂量(CZBE 5 g/kg)联合L-OHP组、CZBE低剂量(CZBE 2.5 g/kg)联合L-OHP组。分组当日开始给药,CZBE灌胃给药,每日1次;L-OHP腹腔注射,隔日1次。连续给药2周。实验结束后处死小鼠,称重后完整剥离瘤体并称瘤质量,计算肿瘤抑制率。将瘤块组织制成切片,免疫组化检测HCT116/L-OHP移植瘤细胞膜耐药相关蛋白表达。结果各剂量CZBE联合L-OHP均可有效抑制HCT116/L-OHP裸鼠移植瘤的增长。L-OHP组肿瘤抑制率为27.239%,CZBE高剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为45.031%,与L-OHP组比较差异有统计学意义(P<0.05),CZBE中剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为37.669%,CZBE低剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为32.147%。与模型组比较,L-OHP组移植瘤细胞MDR1、MRP1、LRP5的IOD/Area值差异无统计学意义(P>0.05);与模型组及L-OHP组比较,各剂量CZBE联合L-OHP组移植瘤细胞MDR1、MRP1、LRP5蛋白表达量均不同程度降低,其中,CZBE中、高剂量联合L-OHP组移植瘤细胞MDR1、MRP1蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),CZBE高剂量联合L-OHP组移植瘤细胞LRP5蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CZBE联合L-OHP可提高人结肠癌耐L-OHP细胞株移植瘤的肿瘤抑制率,其机制可能是通过减少人结肠癌耐L-OHP细胞膜耐药相关蛋白表达,增加结肠癌细胞对化疗药物的敏感性,从而起到协同增效作用。

复方浙贝浸膏对人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP裸鼠移植瘤及凋亡蛋白表达的影响

目的观察复方浙贝浸膏(Compound Zhebei Extract,CZBE)对人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株(HCT-116/L-OHP)裸鼠移植瘤体内抑制作用,以及对移植瘤细胞相关凋亡蛋白表达的影响。方法将人结肠癌耐L-OHP细胞HCT-116/L-OHP接种于BALB/c裸鼠右腋前皮下构建结肠癌耐L-OHP移植瘤模型,成模后按随机数字表法将其分成肿瘤模型对照组、阳性药L-OHP组(3mg/kg)、CZBE高剂量(CZBE 10 g/kg)联合L-OHP组、CZBE中剂量(CZBE 5 g/kg)联合L-OHP组、CZBE低剂量(CZBE 2.5 g/kg)联合L-OHP组,分组当天给药。给药方法:CZBE,灌胃,每日1次;L-OHP,3 mg/kg,腹腔注射,隔日1次。连续用药2周。实验结束后处死小鼠,称体重后完整剥离瘤体并称瘤重,计算肿瘤抑制率。将瘤块组织制成切片,通过免疫组化结合ImageProPlus7.0彩色图像分析软件及SPSS 21.0软件,分析CZBE对HCT-116/L-OHP移植瘤细胞凋亡蛋白表达的影响。结果CZBE各剂量联合L-OHP均能有效抑制HCT-116/L-OHP裸鼠移植瘤体积的增长。CZBE高剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为45.031%,与阳性药L-OHP组比较差异有统计学意义(P<0.05),CZBE中剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为37.669%,复方浙贝浸膏低剂量联合L-OHP组肿瘤抑制率为32.147%,阳性对照L-OHP组的肿瘤抑制率为27.239%,并延长移植瘤裸鼠的生存期。与阳性药L-OHP组相比,CZBE低剂量联合L-OHP组移植瘤细胞B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的累积光密度/面积(IOD/Area)值降低(P<0.05),CZBE中、高剂量联合L-OHP组移植瘤细胞Bcl-2的IOD/Area值降低(P<0.01)。CZBE中剂量联合L-OHP组移植瘤细胞Bcl-2相关x蛋白(Bax)的IOD/Area值升高(P<0.05),CZBE高剂量联合L-OHP组移植瘤细胞Bax的IOD/Area值升高(P<0.01)。结论CZBE联合L-OHP能提高人结肠癌耐L-OHP细胞株移植瘤的肿瘤抑制率,并延长人结肠癌耐奥沙利铂移植瘤裸鼠的生存期,其机制可能是通过调节Bax/Bcl-2凋亡途径逆转肿瘤多药耐药性,促进肿瘤细胞凋亡。