复合培养:传播学研究生教育媒介融合的可行之路

社会转型为传播学研究生培养提出了新的挑战,铸造媒介人才的全媒体意识,探索富有专业特质和创新精神的复合型人才培养新路,已成为传播学研究生教育亟待解决的现实问题。为此,应以学校特色学科为背景,优化课程设置,张扬“平台+专业”的复合人才培养特质;依托校外的实践教育基地,整合资源,改善知识结构,建立协同培养机制;构建“大传播”视野下综合性的激励、评价和考核机制。

加强国有企业年轻干部人才队伍复合培养的思考

本课题对国有企业复合型年轻干部的培养进行研究,从国有企业年轻干部的培养目标入手,阐明了培养复合型年轻干部的时代意义,揭示了当前复合型年轻干部培养过程中存在的问题,分析了复合型年轻干部应具备的基本素质,进而提出了复合型年轻干部的培养路径。研究表明:当前复合型年轻干部培养工作在观念、措施、机制上还存在着短板弱项,持续改进年轻干部教育培训体系,优化“之”型成长路径,完善选任机制,才能助力年轻干部加快成长成才,让更多复合型年轻干部充分涌现,有利于加强和改进国有企业年轻干部复合培养工作,为党和国家事业发展注入新的生机活力。

“历史学+地理科学复合培养” 专业学生自我提升路径探索

福建师范大学“历史学+地理科学复合培养”专业试点的设立是学科融合背景下发展我国教育事业的重要一环。中学教学要求学生有丰富的专业知识、有效的教学方法以及宽广的教育视野,而专业目前存在学习压力较大、学科融合理念落地困难、实践效果不理想等问题,复合专业学生应树立学科融合意识、合理确定主次学科、主动参与教学实践、积极参与专业建设管理,以促进专业的持续发展和学生能力的不断提高。

口腔黏膜上皮细胞与猪小肠黏膜下层体外复合培养的实验研究

目的探讨体外快速培养犬口腔黏膜上皮细胞(OMECs)及其与猪小肠黏膜下层(SIS)体外复合培养的方法,为组织工程化黏膜研究提供实验依据。方法采用混合酶消化法,于6%胎牛血清的上皮细胞无血清培养基(DKSFM)中培养OMECs,观察OMECs的形态特征、绘制生长曲线并进行细胞表面标志物检测。将第2代犬OMECs接种在SIS上,行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、扫描电镜等观察OMECs在SIS上的生长状况。结果OMECs在DKSFM中生长良好,CK19细胞角蛋白免疫组化染色阳性。OMECs接种在SIS上呈单层生长,多角形,铺路石样排列,复合培养8d呈多层生长。结论采用混合酶消化法,用含6%胎牛血清的DKSFM培养犬OMECs,方法简便,适合推广应用。SIS与OMECs有良好的相容性,可作为构建组织工程化黏膜的理想支架材料。

低氧刺激复合培养的平滑肌细胞表达Janus激酶

目的 研究低氧对复合培养的平滑肌细胞中Janus激酶 (JAK)基因表达的作用。方法 鼠肺微血管内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞复合培养 ,采用半定量RT PCR技术检测常氧组、低氧 2、6、12h组的JAK1、JAK2和JAK3基因的表达水平 ,并对PCR产物进行测序。结果 低氧复合培养 2h组肺动脉平滑肌细胞中JAK1、JAK2、JAK3mRNA表达水平升高 ,在低氧 6h组达最高 ,与正常组比较均有明显差别。低氧 12h组的表达量低于 6h组 ,但高于正常组。RT PCR产物直接测序证实扩增产物片断与Genebank中相应序列相同。结论 低氧增强复合培养的肺动脉平滑肌细胞中JAK基因的表达 ,而JAK基因在低氧所致的肺动脉收缩和低氧肺动脉高压的信号转导中可能发挥重要作用。

食管黏膜上皮细胞与SIS复合培养及生物学特性研究

目的探讨体外快速培养犬食管黏膜上皮细胞(esophageal mucosa epithelial cells,EMECs)及其与SIS体外复合培养的方法,为组织工程食管研究提供实验依据。方法取2～5周龄幼犬5只,无菌获取其食管组织,采用混合酶消化法,分离培养EMECs,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,取第2代细胞培养1～5 d绘制生长曲线并进行细胞表面标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK-19)检测。取第2代EMECs与SIS复合培养4、8 d,行形态学、组织学及扫描电镜观察。结果倒置相差显微镜下EMSCs呈典型铺路石样。CK-19免疫组织化学染色可见细胞胞浆呈阳性染色。MTT法测定第2代细胞在传代培养2 d生长达高峰。EMECs与SIS复合培养4 d,细胞呈多角形,细胞间连接紧密,呈铺路石样排列;SIS表面形成1～2层细胞组成的复层上皮样结构。8 d时,细胞密度增大,SIS表面形成2～3层细胞组成的复层上皮样结构;扫描电镜见细胞在材料上已大量增长,呈层状排列。结论采用混合酶消化法,用含6%FBS的DKSFM培养犬EMECs,方法简便,适合推广应用。SIS与EMECs有良好的相容性,可作为构建组织工程食管的理想支架材料。

脉冲电磁场对成骨细胞-破骨细胞复合培养体系中成骨细胞膜电位及细胞内钙离子的影响

目的:探讨脉冲电磁场(pulsedelectric-magneticfields,PEMF)对体外培养成骨细胞-破骨细胞复合体系中成骨细胞膜电位及细胞内游离钙离子浓度的影响,为脉冲电磁场治疗骨质疏松寻找理论依据。方法:体外分离、培养1d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞,利用共育培养板将两者培育在同一环境中;实验分空白组、维拉帕米组、河豚毒素组及维拉帕米+河豚毒素组,根据荧光探针DiBAC4(3)及Fluo-3/AM能与活细胞细胞膜及胞内钙离子特异性动态结合后发出荧光的特性,分别对各组成骨细胞进行膜电位和钙离子荧光染色,染色后利用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)技术分别测量各组行PEMF处理前后荧光强度的改变,以间接反应细胞膜电位、细胞内钙离子浓度的变化。结果:在行PEMF处理前各组细胞细胞膜电位及细胞内钙离子浓度稳定在一定基线水平(空白组细胞膜电位及细胞内钙离子浓度的荧光基准值分别为:(37.68±1.81)和(164.24±2.82),而在PEMF作用后,空白组细胞胞内膜电位荧光值于40s后开始升高,150s左右达峰值(75.05±2.27),表明细胞膜电位出现了去极化;而钙荧光值的升高出现在PEMF作用后约60s时,120s后达到峰值(237.22±2.67),且升高后在PEMF作用过程中一直稳定在一定水平。PEMF使细胞出现去极化的效应能被钠通道阻断剂河豚毒?

小鼠骨髓基质干细胞与人耳脱细胞软骨复合培养的研究

目的 探讨以小鼠骨髓基质干细胞 (MSCs)作为组织工程软骨的种子细胞 ,在人耳脱细胞软骨支架上生长的可行性。 方法 将人耳软骨经脱细胞处理 ,得到脱细胞软骨支架。抽取鼠的骨髓 ,经离心得到单个核细胞 ,进行体外分离培养得到 MSCs。将鼠的第 2代 MSCs种植于脱细胞软骨支架上 ,体外立体培养 10天 ,在光镜及电镜下观察细胞生长及胶原纤维排列情况。 结果 MSCs在人耳脱细胞软骨支架上能立体培养成活 ,细胞分布不均 ,靠近培养液的一面细胞分布较多 ,其中大部分细胞进入已脱细胞的软骨陷窝内 ,每个陷窝内的细胞数为 1～ 2个。 结论 以鼠 MSCs为种子细胞 ,可在人耳脱细胞软骨支架上良好生长 ,构建组织工程软骨。

脱细胞基质与颌下腺细胞体外复合培养的实验研究

目的 :颌下腺细胞与脱细胞生物衍生支架材料复合培养 ,观察细胞在支架材料上的生长情况。方法 :用传代培养第 2代的颌下腺细胞与颌下腺脱细胞基质在体外复合培养 ,扫描电镜下观察不同时间细胞在支架材料上的生长情况。结果 :颌下腺细胞多数附着在支架材料的孔隙内或其边缘 ,细胞大小不等、形态各异 ,部分细胞之间分泌基质相互连接 ,细胞表面凸凹不平、突起丰富、数目不等、长短不一 ,表面结构似“银耳”状。结论 :颌下腺脱细胞基质支架材料具有良好的生物相容性 。

骨髓基质干细胞与聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇体外复合培养的实验研究

目的探讨骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs)与聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇[poly(lacticacid/glycolicacid/asparagicacid-co-polyethyleneglycol),PLGA-ASP-PEG]的生物相容性,为构建组织工程骨进行骨缺损修复提供理论基础,以及为组织工程支架材料的优化提供实验依据。方法本体开环共聚法合成PLGA-ASP-PEG三嵌段共聚物。取4周龄新西兰大白兔骨髓,体外分离培养MSCs。将第3代MSCs以1.0×106/ml接种到PLGA-ASP-PEG材料上,测定细胞黏附力和黏附率;扫描电镜观察细胞的形态学特征;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期、增殖指数、DNA指数及凋亡;通过考马斯亮蓝测定法和3H-脯氨酸掺入实验观察细胞的蛋白合成和胶原合成情况。以PLGA支架材料作为对照。结果MSCs在PLGA-ASP-PEG支架材料上贴附、生长良好,其黏附、增殖和蛋白、胶原合成能力均显著高于PLGA组(P<0.05),细胞凋亡率显著低于PLGA组(P<0.05)。DNA指数显示两组细胞均为正常的二倍体细胞。结论PLGA-ASP-PEG的生物学性能与PLGA相比得到显著改善和提高,可作为MSCs的理想载体构建组织工程骨进行骨缺损修复研究。

脂多糖对复合培养的微血管内皮细胞Janus激酶表达的影响

目的 研究脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)对复合培养的微血管内皮细胞中Janus激酶 (Januskinase ,JAK)基因表达的影响。方法 与肺动脉平滑肌细胞复合培养鼠肺微血管内皮细胞 ,采用半定量RT PCR技术检测正常组、LPS2、8、16h组的JAK2和TYK2基因的表达水平。结果 LPS复合培养 2h组肺微血管内皮细胞中JAK2mRNA表达水平升高 ,在LPS 8h组达最高 ,与正常组比较均有明显差别。在正常组和LPS刺激组均未见肺微血管内皮细胞表达TYK2基因。结论 肺微血管内皮细胞不表达TYK2基因 ;

谷物复合培养基栽培金针菇试验及其菌糠的营养价值分析

用谷物复合培养基栽培金针菇可获得较高的产量。且菌糠可替代玉米配制畜禽饲料,为养殖业的饲料来源开辟一条新途径,节省大量粮食和资金,取得较好的经济效益。

丝素-壳聚糖共混膜与颌下腺细胞体外复合培养的实验研究

目的探讨丝素-壳聚糖共混膜(silkfibroin-chitosan blend,SFCS)与颌下腺细胞体外复合培养的可行性。方法体外原代培养SD大鼠颌下腺细胞(Rat submandibular gland cells RSMG-cell)并传代,将浓度为2.0×104个/ml的第2代颌下腺细胞接种于5mm×5mm×2mm丝素-壳聚糖共混膜上体外复合培养。观察颌下腺细胞附着率和增殖情况,扫描电镜观察细胞超微结构,分别取复合培养1～10d的培养上清液,测定淀粉酶含量。结果颌下腺细胞24h附着率大于90%,生长、增殖情况良好。扫描电镜下可见复合培养7d的颌下腺细胞在丝素-壳聚糖共混膜上伸展充分,表面有许多分泌颗粒。随着复合培养时间的延长,细胞上清液中淀粉酶含量有不同程度的增加。结论颌下腺细胞与丝素-壳聚糖共混膜复合培养,颌下腺细胞附着、增殖能力及分泌功能良好,丝素-壳聚糖共混膜可以作为颌下腺组织工程的支架材料进行进一步的研究。

兔骨髓基质细胞体外成骨分化鉴定及与煅烧骨复合培养的实验研究

目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的细胞行VonKossa染色观察钙结节形成;另制备细胞煅烧骨复合物,继续培养1、7、14d后取出,扫描电镜观察及X射线衍射仪检测。结果体外诱导培养2、4周后,兔骨髓基质细胞成功表达ALT和I型胶原,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜及X射线衍射分析证实细胞在煅烧骨表面大量贴附成活,14d后细胞铺满支架表面,合成并分泌胶原纤维及钙盐。结论兔骨髓基质细胞体外可成功向成骨细胞诱导分化,成骨特性表达佳;与牛煅烧骨体外复合培养显示良好的生物相容性。

优选人脱细胞真皮基质及荧光标记示踪与其复合培养的成纤维细胞

目的优选人脱细胞真皮基质（ADM）并评价其生物学特性。方法通过高渗盐-NaOH消蚀法（A组）、高渗盐-十二烷基硫酸钠（SDS）法（B组）和DispaseⅡ-Triton X-100法（C组）制作人脱细胞真皮基质,以特殊染色、免疫组织化学观察3种方法制作ADM的组成成分;四甲基偶氮唑盐（MTT）细胞毒性实验评价3种方法制作ADM的细胞毒性反应;细胞培养法评价其细胞相容性,优选ADM。重组腺病毒绿色荧光表达载体（Ad-GFP）转染的人成纤维细胞（FB）接种在优选ADM上,荧光显微镜观察FB的生长情况。结果3种方法均能够保留胶原纤维、弹性纤维,A组和C组能够完全脱去细胞,B组未能完全脱去细胞;A组和B组制备ADM细胞毒性反应小于1级;C组制备ADM细胞毒性反应大于1级。A组与B组24h 3T3细胞贴壁数有统计学意义（P＆lt;0.05）,3T3细胞能够在A组ADM表面贴附;优选A组ADM。转染Ad-GFP的FB在优选ADM上生长和增殖良好。结论高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM蕴涵丰富的生物信息,细胞毒性小,生物相容性好,是一种很好的生物支架材料。

组织工程颌下腺细胞与胶原海绵复合培养的实验研究

目的研究大鼠颌下腺细胞在胶原海绵材料支架上的生长情况。方法取8d龄Wistar大鼠颌下腺细胞,传代培养至第2代细胞,按2×104/ml注射法接种于5mm×5mm×2mm胶原海绵表面进行培养。术后1、2、3周行组织学观察、扫描电镜观察胶原海绵上接种颌下腺细胞形态结构特点;取复合培养3周的颌下腺细胞行免疫组织化学细胞角蛋白(cytokratin8.13,CK8.13)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscular actin,α-SMA)染色,透射电镜观察细胞超微结构,鉴定细胞来源。分别取复合培养1d,1、2、3周的培养上清,用Amano法测定淀粉酶含量,检测与胶原海绵复合培养的颌下腺细胞功能。结果细胞接种后第1周细胞分散于材料表面,无细胞突起形成;第2周细胞数量有所增加、细胞突起形成并锚定于胶原海绵表面;第3周时附着的细胞数目增多,可见细胞表层有丝状纤维形成。免疫组织化学染色观察复合培养的颌下腺细胞上皮细胞特异性抗体CK8.13呈强阳性,肌上皮细胞特异性抗体α-SMA染色呈阳性。透射电镜下颌下腺上皮细胞表面可见微绒毛、胞浆皱褶和细胞顶部的酶原颗粒,胞核大卵圆形,胞质内见线粒体和粗面内质网。随着接种后培养时间的延长,与胶原海绵复合培养的颌下腺细胞分泌的淀粉酶含量有不同程度的增加。结论胶原海绵具有良好的细胞相容性,颌下腺细胞与胶原海绵复合培养,细胞可保持增殖分化能力及分泌功能,有望成为颌下腺细胞的载体应用于组织工程支架材料。

猪小肠黏膜下层与兔骨髓间充质干细胞的体外复合培养

背景:小肠黏膜下层细胞外基质材料免疫原性低,具有良好生物相容性,是构建单一结构工程化组织的较好支架材料。目的:观察体外兔骨髓间充质干细胞与猪小肠黏膜下层复合培养的生物相容性。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化培养兔骨髓间充质干细胞,在其接种前用红色免疫荧光标记,然后将第2代已标记的兔骨髓间充质干细胞接种在猪小肠黏膜下层上。结果与结论:①组织学观察:骨髓间充质干细胞与小肠黏膜下层上复合培养1周时细胞呈单层生长,荧光显微镜下观察标记的骨髓间充质干细胞显示均匀红色荧光,复合培养2周细胞呈多层生长,并显示更密集的红色荧光。②扫描电镜观察:复合培养2d,骨髓间充质干细胞黏附于材料表面并伸展;复合培养1周,小肠黏膜下层被骨髓间充质干细胞分泌的胶原覆盖;2周后细胞在材料上已大量增殖形成融合,细胞连接紧密,细胞分泌大量基质,并分层。表明小肠黏膜下层与骨髓间充质干细胞具有良好的相容性。

低氧对复合培养的平滑肌细胞中白细胞介素-6表达的影响

目的 研究低氧对复合培养的平滑肌细胞中白细胞介素 6(IL 6)表达的影响。方法 低氧处理与肺微血管内皮细胞复合培养的鼠肺动脉平滑肌细胞 ,采用RT PCR方法检测常氧组、低氧 2、6、12h组IL 6基因的表达水平 ,并测定细胞培养上清中IL 6的活性。结果 低氧复合培养 2h组肺动脉平滑肌细胞中IL 6mRNA表达水平升高 ,在低氧 6h组达最高 ,低氧 12h组有所降低 ,但与常氧组比较有明显差别。低氧复合培养 2h组肺动脉平滑肌细胞上清中IL 6的活性明显升高 ,6h组细胞上清中IL 6的活性水平最高 ,12h组的活性降低 ,2 4h组的水平低于 2h组。IL 6活性水平与其基因表达的水平一致。结论 低氧可以增强复合培养的肺动脉平滑肌细胞中IL 6基因的表达 ,使细胞培养上清中IL 6活性升高 。

大鼠成骨细胞与TCP/HA支架材料复合培养的实验研究

目的 为开展骨组织工程研究 ,建立成骨细胞与支架材料的体外复合培养模型。方法 取SD新生大鼠颅骨 ,组织块法培养成骨细胞 ,形态学结合免疫细胞化学鉴定其生物学特征 ,矿化液诱导后 ,茜素红染色显示钙结节形成 ;以磷酸三钙 /羟基磷灰石 (tricalcium phosphate/hydroxyapatite,TCP/HA)为支架 ,相差显微镜下观察纤粘连蛋白对细胞在支架材料上粘附的影响。结果 培养的成骨细胞呈短梭形或多角形 ,抗碱性磷酸酶单抗染色阳性 ;矿化液诱导后 2 0d茜素红染色 ,见红色着色的钙结节 ;纤粘连蛋白能促进成骨细胞在TCP/HA支架上的粘附。结论 本实验成功地建立体外成骨细胞培养方法 ,细胞外基质活性分子的加入能促进细胞与支架材料的粘附。

大鼠骨骼肌干细胞与胶原海绵复合培养并回植体内

目的:探讨组织工程化骨骼肌干细胞治疗压力性尿失禁的可行性。方法:取成年雌性SD大鼠前肢肱三头肌,用胶原酶和Dispase进行消化,采用差速贴壁的方法纯化骨骼肌干细胞并与胶原海绵体外复合培养,构建组织工程化骨骼肌干细胞/胶原海绵复合体并回植体内,6周后取出植入组织行HE染色及α-骨骼肌肌动蛋白的免疫组织化学染色。结果:成功地分离培养了成年大鼠的骨骼肌干细胞,骨骼肌干细胞在胶原海绵上生长良好、增殖迅速,回植体内6周后植入组织α-骨骼肌肌动蛋白免疫组织化学染色阳性。结论:采用差速贴壁的方法可以纯化骨骼肌干细胞,骨骼肌干细胞与胶原海绵有良好的细胞相容性,骨骼肌干细胞/胶原海绵复合体回植体内可以存活,本实验为组织工程化骨骼肌干细胞治疗压力性尿失禁的研究打下基础。