线粒体呼吸链酶复合物V缺陷与线粒体病

线粒体呼吸链酶复合物V,也称为ATP合酶,是位于线粒体内膜上的大蛋白复合体,由2个功能性蛋白复合物F0及F1构成。复合物V是线粒体呼吸链的最后一个复合物,在线粒体中通过电化学梯度传递质子,以ADP、Pi及Mg2+为原料合成ATP,为细胞供能。大多数患者新生儿期发病,导致严重脑损害或多脏器损害,病死率很高。主要临床表现为神经肌肉病、心肌病、高乳酸血症及3-甲基戊烯二酸尿症等,因受累器官的不同导致显著的临床异质性。复合物V由16个亚基组成,由线粒体基因与核基因共同编码。迄今,国内外已报道了MT-ATP6、MT-ATP8、ATPAF2、TMEM70、ATP5E基因突变导致的复合物V缺陷。本文总结了线粒体呼吸链复合物V的结构及功能,并对复合物V缺陷的病理、临床表现、诊断、治疗及分子遗传学研究进展进行了综述。

V型直链淀粉-正己醇复合物的制备及表征

以B型微晶淀粉作为原料,分别在水和醇作溶剂的情况下,与正己醇络合制备得到V型复合物。应用扫描电镜(SEM)、X-射线衍射仪(XRD)、差式扫描量热仪(DSC)、傅里叶红外光谱仪等对两种条件下得到的V型直链淀粉-正己醇复合物的晶体结构进行了表征。应用红外光谱对水及醇溶剂法制备得到的V型直链淀粉-正己醇复合物进行测定,定性确定了V型复合物中正己醇配体的存在;进一步应用主成分分析方法(PCA)对红外吸收光谱进行分析。结果表明:水及醇溶剂法制备得到V型直链淀粉-正己醇复合物的水化物和无水形式晶体。水化物形式晶体颗粒间粘连较严重,无水形式晶体的颗粒直径均为0.5～1μm,二者的结晶度均达到70%以上。V型直链淀粉-正己醇复合物的水化物与无水形式晶体的熔化温度几乎相同,且其复合物中醇类配体的含量分别为9.79%和4.3%。

V型直链淀粉-醇类复合物定性定量分析

以B型微晶淀粉为原料,在一定的条件下,分别与乙醇、正丁醇、正己醇和正辛醇复合,制备得到系列的V型直链淀粉-醇类复合物。应用红外光谱对得到的V乙醇、V正丁醇、V正己醇、V正辛醇进行测定,定性确定了V型复合物中醇类配体的存在;进一步应用主成分分析方法(PCA)结合SPSS13.0、DPS7.05统计软件对红外吸收光谱进行分析计算。结果表明,制备得到的V乙醇、V正丁醇、V正己醇和V正辛醇复合物中醇类配体的含量分别为:19.8%、14.1%、9.79%、8.3%。

脓毒症与线粒体呼吸链酶复合物V研究进展

脓毒症是一种复杂的病理生理功能紊乱性疾病，是由病原微生物感染机体导致的全身性炎性反应，是ICU重症患者的主要死因之一。脓毒症患者发病过程中存在线粒体功能失调以及氧化磷酸化功能受损。线粒体呼吸链酶复合物V是线粒体氧化磷酸化的关键酶，在脓毒症前期主要促进ATP合成且酶活性降低；在脓毒症后期即局部缺血的条件下，主要发挥水解功能且活性上调。该文就脓毒症患者复合物V活性变化、变化机制以及治疗的研究进展进行阐述。

V型直链淀粉-正辛醇复合物的制备及结晶结构的研究

以B型微晶淀粉为原料、正辛醇为配体,在Et OH/H2O体系中采用加热回流的方法制备得到了直链淀粉-正辛醇复合物。通过单因素实验,探讨了淀粉/辛醇的配比、乙醇浓度、结晶冷却条件、保温温度和保温时间对复合物形成的影响。运用X射线衍射对复合物的结晶结构进行对比分析,确定制备直链淀粉-正辛醇复合物的最佳工艺条件为淀粉/辛醇的配比10∶1,乙醇浓度为35%,保温温度80℃,保温时间60 min,结晶冷却速率是5℃/h。在此条件下,制得的复合物为V型结构,其结晶度可达到61.29%。

V型小麦直链淀粉-正癸醇复合物的制备及其表征

为了探究改性淀粉及其制备条件,以小麦淀粉为原料,经酸解得到小麦直链淀粉,加入溶于无水乙醇的正癸醇制备小麦直链淀粉-正癸醇复合物,考察无水乙醇体积分数、结晶温度、正癸醇体积及淀粉质量浓度对复合物结晶结构的影响,并以小麦直链淀粉为对照,对该复合物进行表征测定。通过正交试验确定最优制备条件为乙醇体积分数38%,结晶温度为40℃,正癸醇0.3 mL,淀粉质量浓度50 g·L^-1,经X-射线衍射(diffraction of X-rays,XRD)谱图显示该复合物为V型结晶结构,结晶度最高为57.9%。傅里叶红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)结果表明正癸醇与小麦直链淀粉发生复合。便携式拉曼光谱(Raman)结果表明V型复合物比小麦直链淀粉更加短程有序。差示扫描量热(differential scanning calorimetry,DSC)结果显示V型复合物的结构更加稳定。此外,通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)观察到V型复合物的形貌为无规则碎片状。

大米淀粉-多酚复合物的制备与消化特性研究

多酚可与淀粉发生相互作用,从而影响淀粉的消化性。为探究淀粉与多酚相互作用对淀粉消化性的影响,作者以金雀异黄酮、槲皮素、柚皮苷、没食子酸、阿魏酸和咖啡酸等6种多酚以及大米淀粉为原料制备淀粉-多酚复合物,并测定复合物的消化性。大米淀粉-多酚复合物的X射线衍射图在13.0°、20.0°出现衍射峰,表明大米淀粉与上述6种多酚均形成了V型包合物。差示扫描量热分析表明,复合物在104~113℃出现吸热峰,进一步证明淀粉-多酚V型包合物的形成。淀粉-多酚复合物为球形颗粒结构、颗粒松散聚集。大米淀粉-金雀异黄酮复合物、大米淀粉-槲皮素复合物、大米淀粉-柚皮苷复合物、大米淀粉-没食子酸复合物、大米淀粉-阿魏酸复合物和大米淀粉-咖啡酸复合物中多酚质量摩尔浓度分别为5.59、1.72、5.40、5.57、2.77、6.52mmol/g,这表明咖啡酸是最易与淀粉形成复合物的多酚。然而,6种大米淀粉-多酚复合物中抗性淀粉质量分数约为32%,无显著性差异。上述结果表明,淀粉-多酚复合物的抗性不仅仅取决于复合物中多酚的含量。

V型直链淀粉-正己醇复合物制备工艺的研究

以B型微晶淀粉为原料、正己醇为配体,采用非水溶剂法制备得到了V型直链淀粉-正己醇复合物。研究了反应温度、滴加时间和冷却温度等对V型复合物结晶度的影响。通过单因素及正交试验得到最佳工艺条件为:反应温度为70℃、滴加速率为2mL/min、室温冷却制备条件,此时所得到的V型复合物的结晶度为70.7%,且具有优异的结晶性。

V型直链淀粉—十二醇复合物的制备工艺研究

以B型微晶淀粉为原料、十二醇为配体,水作为溶剂,制备得到了V型直链淀粉-十二醇复合物。通过单因素变量分析了不同乙醇浓度、保温温度、淀粉/十二醇比例对V型复合物结构的影响,从而得出最佳工艺条件。结果表明:乙醇浓度40%、保温温度为50℃、淀粉/十二醇配比为11:1时,衍射峰峰型尖锐,合成效果最好,相对结晶度达到63.72%。

V型直链淀粉-月桂酸钠复合物的制备方法研究

以B型淀粉和月桂酸钠为原料,分别采用热溶液复合-冷却沉淀法(A)、热溶液复合-乙醇脱淀法(B)和混合溶剂复合法(C)制备得到了V型直链淀粉-月桂酸钠复合物.应用扫描电子显微镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)、差示扫描量热法(DSC)和红外光谱(IR)进行测试分析,结果表明:3种方法均能得到V型直链淀粉-月桂酸钠复合物,产品形态均为细小颗粒聚集体,方法 A得到的复合物中残余的月桂酸钠较少,其他两种方法得到的产物中未复合的月桂酸钠较多,三者的结晶度分别为45%、38%和42%.

V-型淀粉复合物稳定性研究

系统研究了NaCl溶液浓度、盐的种类、缓冲溶液pH值以及搅拌时间对V型淀粉复合物稳定性的影响规律,结果表明:NaCl溶液对复合物结构的影响随着浓度的增加而增加,浓度为5%时影响最小,饱和时影响最大,使得淀粉结晶结构几乎完全被破坏;不同盐溶液对淀粉的结晶结构影响不同,C_6H_5CO_2Na溶液对晶体结构影响最小,KCl溶液影响最大;用不同pH缓冲溶液处理复合物时,发现碱性溶液对晶体结构几乎没有影响,酸性溶液有影响,并且影响力随着pH的降低而增加;搅拌时间对复合物晶体结构影响不大,但略有差别,影响力随着时间的增加而增加,当时间为3 h和4 h时,趋于平衡。

直链淀粉-正癸醇复合物的制备及表征

以B型微晶淀粉为原料、正癸醇为配体,制备得到了V型直链淀粉-正癸醇复合物。研究了配体添加量、乙醇浓度、结晶温度等因素对复合物形成的影响,通过X-射线衍射图谱(XRD)分析得到最佳复合条件,并对最优的V型复合物进行扫描电镜(SEM)、红外(IR),差示扫描量热分析(DSC)表征,研究结果表明,最优的制备条件为:淀粉/正癸醇配比为10:2.5、溶剂中乙醇溶度为9.10%、结晶温度为50℃,最优条件下制得的V型复合物的结晶度最高,为61.28%;SEM图片显示B型淀粉为球状颗粒,而V型淀粉为圆饼状颗粒;IR图谱中,由于V型复合物中淀粉和正癸醇发生叠加,其特征吸收峰的峰强度比B型淀粉特征吸收峰的峰强度大;DSC图谱显示V型复合物的吸收峰峰值温度比B型低。

不同结晶结构淀粉的拉曼光谱分析

为了研究不同晶型淀粉结构变化规律,对马铃薯淀粉进行酸解、重结晶,分别制备酸解淀粉、B型微晶淀粉及马铃薯直链淀粉-正癸醇,马铃薯直链淀粉-十二醇复合物,使用拉曼光谱仪检测并分析其结构变化规律。结果表明:经过不同处理后淀粉及其复合物的拉曼光谱特征峰强度逐步降低,相对峰面积也发生变化。马铃薯淀粉与配体复合时,双螺旋解旋为单螺旋结构,不同复合物的特征峰位置基本一致,但强度相差较大。

高锰酸钾光氧化六氟苯脱氟的研究

尝试利用KMnO4光氧化C6F6脱氟,获得较好的脱氟效果.研究表明,溶液的pH值、激光脉冲次数、KMnO4的初始浓度、C6F6的初始浓度等因素均会影响F-的生成率.酸性条件更有利于KMnO4光氧化C6F6脱氟.F-生成率随激光脉冲数的增加而单调上升.受到消光系数的影响,KMnO4的浓度达到3.0×10-4mol/L时,脱氟效率达到最佳.pH值为0.5的2.0×10-4mol/LC6F6与6.0×10-4mol/LKMnO4的混合溶液在接受脉冲激光照射9000次后,F-生成率可达1.61mol/molC6F6.C6F6的降解与MnO4-受激后产生的Mn(V)过氧复合物有关.

巨大血小板综合征的分子机制与临床研究进展

巨大血小板综合征是一种常染色体隐性遗传性出血性疾病 ,以出血时间延长、血小板减少、血小板巨大为特征 ,其分子基础是编码血小板膜糖蛋白Ib IX V(GPIb IX V)复合物的基因缺陷 ,导致GPIb IX V表达降低或功能异常。患者的出血症状表现为异质性。输注血小板及高剂量因子Ⅶα或重组因子Ⅶα(rFⅦα)是控制出血的有效方法。

短直链淀粉-正辛醇复合物的制备及结构表征

以B型淀粉为原料,溶于乙醇/水溶液中,在加热回流下加入一定比例正辛醇的乙醇溶液,通过单因素实验,探讨了淀粉/辛醇的配比、乙醇浓度、结晶冷却条件对复合物形成的影响,得到V型直链淀粉-正辛醇最佳制备条件。采用XRD、IR、SEM、DSC和GPC对复合物的结构与性能进行表征。结果表明,制备直链淀粉-正辛醇复合物的工艺条件为:淀粉/辛醇的配比10:1,乙醇浓度为35%,结晶冷却速率是5℃/h。在该工艺条件下,制得的复合物为V型结构,其结晶度可达到57.85%;SEM测试表明复合物颗粒直径约为3μm;IR显示复合物键的相关特征;DSC分析表明V型复合物的稳定性小于B型微晶淀粉;凝胶渗透色谱表明复合物的相对分子量及分布,复合物的重均分子量为3243。

直链淀粉和六氟异丙醇的复合物制备研究

以B型淀粉为原料、六氟异丙醇(HFIP)为配体,采用高温复合的方法制备得到V型直链淀粉-六氟异丙醇复合物。通过单因素实验,系统研究了复合温度、配体用量、乙醇用量及结晶温度对复合物形成的影响,得到了复合物最优制备条件。其最优条件为复合温度110℃,配体的用量1.2 m L,无水乙醇用量3 m L,结晶温度为室温,所得复合物相对结晶度为59.49%。红外波谱分析显示V-型淀粉谱图中吸收峰强度相比B型淀粉有所增强且波数发生变化,这都是因为淀粉与醇复合所致。扫描电镜分析显示B型淀粉与六氟异丙醇复合后,其自身球形形貌消失,呈现碎片状。

多酚与玉米淀粉相互作用研究

多酚能够与淀粉发生相互作用,从而对淀粉特性产生影响。研究了7种常见食源多酚(原花青素单聚体、儿茶素、咖啡酸、单宁酸、没食子酸、绿原酸和阿魏酸)与高直链和蜡质玉米淀粉的相互作用。粒径分析结果表明,7种多酚主要与直链淀粉发生显著相互作用,能使高直链玉米淀粉的粒径增大,但对蜡质玉米淀粉粒径则有不同影响,其中,咖啡酸和绿原酸能减小它的平均粒径;淀粉-碘结合力分析结果表明,7种多酚均减小了两种淀粉溶液的淀粉-碘结合力,其中咖啡酸和阿魏酸对高直链玉米淀粉影响最为显著,咖啡酸和绿原酸对蜡质玉米淀粉影响较显著;红外分析结果表明,7种多酚能与两种玉米淀粉通过非共价键发生相互作用,其中阿魏酸、咖啡酸和绿原酸与直链淀粉作用最强;X-射线衍射结果表明,除原花青素和单宁酸外,其他多酚均能与高直链玉米淀粉形成V型复合物,但能与蜡质玉米淀粉形成V型复合物的只有阿魏酸。总体来说,多酚可通过非共价作用与淀粉分子结合,形成分子间或者分子内复合物。

线粒体细胞色素氧化酶3基因mRNA表达与支气管哮喘母系遗传的关系

目的探讨线粒体细胞色素氧化酶基因亚基Ⅲ（COX3）mRNA表达水平与支气管哮喘母系遗传的关系。方法入选2009年1至12月于昆明医学院第一附属医院重症呼吸科及儿科住院的220例支气管哮喘患者作为哮喘组；其近亲家属（其父母或子女）162名作为近亲组，同期行健康体检的健康人群260名为对照组。测定所有入选者肺功能及血清IgE水平，通过实时荧光定量-PCR技术，检测外周血线粒体COX3mRNA表达水平并进行对比分析。结果哮喘组、近亲组、对照组年龄、性别差异均无统计学意义（均P〉0．05）；3组第1秒用力呼气量（FEV，）／用力肺活量（FVC）分别为90．6±6．2、92．3±2．3、102．3±2．3，FEV，占预计值的百分比分别为（82．9±10．8）％、（94．8±5．4）％、（98．3±8．6）％，组间差异均无统计学意义（均P〉0．05）；3组血液中线粒体COX3mRNA的表达水平分别为0．357±0．217、0．637±0．473和0．975±0．260，组间差异均有统计学意义（F=21．45，P=0．012）；哮喘组、近亲组IgE水平均显著高于对照组[（283．6±62．4）、（116．4±57．5）比（52．3±13．7）μg/L，均P〈0．05]；3组血液中COX3mRNA表达与IgE水平均呈负相关（r=-0．73、-0．56、-0．61，P=0．013、0．035、0．028）。结论哮喘患者线粒体COX3基因mRNA表达下调，可能通过影响机体IgE水平，参与了哮喘过敏性炎症反应，与哮喘母系遗传有关。

拉曼光谱在淀粉结晶结构表征中的应用研究

以酸解淀粉为原料,经重结晶制得B型微晶淀粉,再将B型微晶淀粉与正辛醇复合得到V型淀粉-正辛醇复合物。分别采用X-射线衍射和拉曼光谱对马铃薯原淀粉、B型微晶淀粉和V型复合物进行表征。结果表明,所得B型和V型样品的结晶度分别为50.75%和60.51%;与原淀粉相比,B型微晶淀粉的拉曼光谱峰强度降低很多,峰位置在1378、1259、1124、475 cm-1处有所偏移;与B型微晶淀粉相比,V型复合物峰强度增强,峰位置发生改变较大,只有1122、1079 cm-1处没有改变。