泽泻叶多糖复合酶辅助提取工艺的优化及其益生元活性研究

目的优化泽泻叶多糖复合酶辅助提取工艺,并评价其益生元活性。方法在单因素试验基础上,以料液比、酶解温度、酶解时间为影响因素,多糖提取率为评价指标,响应面法优化提取工艺。DEAE-52纤维素柱分离纯化粗多糖,分析其组成,HPGPC法测定其分子量。考察多糖对L.plantarum、L.buchneri、Weissella confuse X1、L.gasseri密度、pH值的影响,以及对菌群失调小鼠肠道的调节作用。结果最佳条件为复合酶(纤维素酶-木瓜蛋白酶)比例1∶2,酶用量1.20%,料液比1∶25,酶解温度55℃,酶解时间60 min,多糖提取率为2.57%。粗多糖中的中性多糖重均分子量为37187 Da,含量为72.64%;酸性多糖重均分子量为33134 Da,含量为62.22%。中性多糖、酸性多糖促进4种乳杆菌增殖,降低培养基pH值。与自然恢复组比较,中性多糖中剂量组、酸性多糖低剂量组LPS水平降低(P<0.05),中性多糖各剂量组SOD活性升高(P<0.05),中性多糖各剂量组及酸性多糖中、高剂量组MDA水平降低(P<0.05)。多糖减少肠道中有害菌数量,增加有益菌数量,降低盲肠、结肠内容物pH值;除酸性多糖低剂量组外,各多糖组结肠氨含量低于自然恢复组(P<0.05)。结论该方法稳定可行,可用于复合酶辅助提取具有益生元活性的泽泻叶多糖,其机制可能为改善肠黏膜通透性和氧化应激反应,调节肠道菌群。