复序橐吾组培再生体系研究

用复序橐吾(Ligularia jaluensis Kom.)种子获得无菌苗,取其叶片为外植体,以MS培养基为基础,通过添加不同浓度和种类的细胞分裂素及生长素,目的是筛选出叶片组织培养的最适培养基。结果表明:种子较好的灭菌时间为75%酒精30 s+1‰升汞4 min;初代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,由此获得的愈伤组织致密、颜色绿,具有很好的诱导效果,其诱导率达到90%;继代增殖的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其增殖倍数高达3.9,并且苗生长状况良好;生根最适培养基为:1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率达100%。

复序橐吾的光合特性及其影响因子

采用C IRAS—2光合仪对1年生复序橐吾(Ligularia jaluensisKom.)的光合作用日变化、光响应曲线进行测定,光响应曲线采用叶子飘新模型进行拟合;对影响其光合作用的生理因子和环境因子进行相关分析。结果表明:复序橐吾净光合速率日变化在夏季呈双峰型,有光合"午休"现象,午休现象主要受非气孔因素限制。复序橐吾净光合速率与叶片温度呈极显著正相关,与外界CO2摩尔分数呈极显著负相关,与胞间CO2摩尔分数呈显著负相关。复序橐吾光饱和点为747.49μmol.m-2.s-1、光补偿点为19.06μmol.m-2.s-1、最大净光合速率为4.95μmol.m-2.s-1及表观量子效率为0.067 mol/mol,表现出阴生植物特性。

长白山复序橐吾和全缘橐吾叶片挥发油成分分析

以复序橐吾(Ligularia jaluensis Kom.)和全缘橐吾(L.mongolica(Turcz.)DC.)叶片为材料,采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS法鉴定其化学成分。结果表明:首次从2种橐吾中鉴定22种化合物,复序橐吾15种,全缘橐吾11种,分别占总挥发油的94.75%和87.08%。其中复序橐吾主要化学成分为4-蒈烯(27.09%),其次是金合欢醇乙酸酯,β-蒎烯,D-柠檬烯及顺-2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-2-环己烯-1-醇,其单萜和倍半萜类各4种,占总挥发油的43.80%和10.25%,酯类和醇类分别占16.03%和13.76%;全缘橐吾的主要成分为z-9-十八烷烯醛(23.93%),其次是α-法呢烯,α-金合欢烯,石竹烯,[1aα-[1aα-4aα,7β,7αβ,7bα]]1,1,4,7-四甲基-1H-十氢环丙奥-4-醇及α-杜松醇,其4种倍半萜类占35.8%,醇占22.9%。挥发油中萜类、醇类及酯类决定了2种橐吾食疗价值和香气特征。

长白山复序橐吾花挥发油化学成分的分析

以复序橐吾花为试验材料,采用水蒸气蒸馏法对挥发油进行提取,通过GC-MS联用技术对其挥发性成分进行分析鉴定,利用峰面积归一化法计算各化合物的相对质量分数。结果表明,从复序橐吾花挥发油中分离得到49个色谱峰,共鉴定出39个化合物,占挥发油总量的94.80%,主要化学成分为4-蒈烯(26.534%)、D-柠檬烯(13.325%)、1-甲苯基-乙酮(7.231%)、α,α,4-三甲基-3-环己烯-1-甲醇(6.379%)、β-水芹烯(5.700%)。

长白山复序橐吾多糖的提取及其免疫活性研究

经90%乙醇浸泡处理的复序橐吾叶,热水煮提,乙醇沉淀,常规干燥,得粗多糖,由理化性质分析表明,粗多糖为不含淀粉的酸性杂多糖;粗多糖经冻融法和酶-Sevag法联合脱蛋白及透析处理后,通过DEAE-纤维素离子交换层析、Sepharose CL-6B凝胶柱层析分级纯化,得到6个多糖级分;采用高效液相色谱法测定各级分的单糖,组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖;进一步利用高效凝胶渗透色谱法对各多糖级分的分子量分布进行了分析;应用MTT法对复序橐吾多糖免疫活性进行测定,结果表明其对小鼠脾脏T淋巴细胞的体外增殖有一定的促进作用。

长白山复序橐吾和狭苞橐吾花的脂溶性成分分析

采用索氏提取法提取长白山野生复序橐吾、狭苞橐吾花的脂溶性成分,经甲酯化处理后,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其脂肪酸及其它脂溶性成分进行了分析和鉴定,采用面积归一化法进行定量分析。结果,从2种橐吾花的脂溶性成分中共鉴定了52种成分,其中脂肪酸成分,复序橐吾有7种,狭苞橐吾有13种,分别占色谱总馏分出峰面积的70.54%和55.15%。复序橐吾和狭苞橐吾花共有的主要脂肪酸为(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸(24.59%,6.29%)、n-十六酸(19.12%,22.32%)、(E)-9-十八(碳)烯酸(7.05%,4.46%)、n-十四酸(6.89%,8.30%)、(Z,Z,Z)-9,12,15-十八烷三烯酸(6.87%,2.50%)、n-十八酸(5.09%,6.77%)。鉴定的非脂肪酸成分中,复序橐吾12种,狭苞橐吾20种,分别占色谱总馏分出峰面积的22.54%和20.19%。

复序橐吾不同溶剂萃取物中黄酮类成分分析

目的分析长白山复序橐吾不同溶剂萃取物中黄酮类成分.方法以复序橐吾叶为材料,选择极性不同的溶剂(溶剂极性:水>乙醇>乙酸乙酯>正丁醇>氯仿>石油醚)进行分级萃取;以黄酮类成分为目标化合物,通过3种显色反应、紫外扫描及总黄酮含量的测定对各溶剂萃取部分进行定性定量分析.结果复序橐吾不同溶剂萃取物都有一定的颜色反应和黄酮类化合物的紫外吸收特征;除水层外,各溶剂萃取物总黄酮含量为0.22%~7.90%.结论复序橐吾叶中含有不同种类的黄酮类成分,本试验可为长白山复序橐吾化学成分的研究提供参考.

复序橐吾乙醇提取物的抗氧化及抑菌活性研究

对长白山野生复序橐吾的乙醇提取物进行了抗氧化及抑菌活性研究。结果表明:复序橐吾乙醇提取物具有较明显的清除羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基作用,清除率与浓度之间存在着量效关系;复序橐吾乙醇提取物对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有明显的抑菌活性,对产气杆菌没有抑制作用。

复序橐吾石油醚提取物的化学成分分析

以长白山复序橐吾叶为材料,石油醚为溶剂,超声提取法制备石油醚提取物,利用相色谱——质谱联用技术(GC-MS)对其脂溶性成分进行分离鉴定,按峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果显示,从复序橐吾石油醚提取物中检测到59个色谱峰,鉴定出59个化合物,占脂溶性成分的100%,主要成分为萜烯类和醇类等,其中萜烯类含量最高。

异硫氰酸苯酯柱前衍生反相高效液相色谱法测定复序橐吾中21种氨基酸的含量

目的:测定复序橐吾中游离和水解氨基酸的含量。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定复序橐吾中氨基酸的含量。结果:21种氨基酸的检测浓度线性范围为0.0022-2.1000μmol/L,精密度RSD在0.38%-1.05%之间;稳定性RSD在0.46%-1.28%之间;游离氨基酸和水解氨基酸的重复性RSD在1.20%-2.38%和0.86%-2.43%之间;游离氨基酸和水解氨基酸的加样平均回收率分别在97.89%-101.05%和98.04%-103.03%之间且RSD均小于4%,游离和水解氨基酸的含量分别为0.2307%和8.7943%。结论:复序橐吾中含有21种氨基酸,并确定了其含量。

长白山3种橐吾的核型研究

采用常规压片法对长白山主产的复序橐吾、全缘橐吾、狭苞橐吾进行了核型研究。结果表明,3种橐吾的染色体数目均为2n=58,核型除全缘橐吾为2A外,其他2种均为2B。核型不对称系数介于59.22%～62.89%,核型公式分别为2n=2x=58=42m+16sm,2n=2x=58=44m+12sm+2st,2n=2x=58=32m+26sm。从染色体相对组成来看,复序橐吾为2n=58=2L+20M2+30M1+6S、全缘橐吾为2n=58=28M2+28M1+2S、狭苞橐吾为2n=58=2L+28M2+26M1+2S,供试的3种橐吾的染色体数和核型均为首次报道。

长白山2种橐吾属植物乙醇提取物抗肿瘤作用研究

目的探讨复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提取物体外抗肿瘤作用,为抗肿瘤药物研发以及多途径开发、利用长白山橐吾属植物资源提供参考依据.方法采用MTT法检测复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提取物(FXEt OH、XBEt OH)在体外对2种肿瘤细胞(Hela,A549)增殖的抑制作用;应用流式细胞术检测细胞凋亡;以Vc做对照,采用邻二氮菲法、邻苯三酚自氧化法测定2种橐吾乙醇提取物对羟自由基()、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除率.结果用不同质量浓度的2种橐吾乙醇提取物处理A549,Hela细胞48 h后,对Hela,A549细胞的抑制率均随样品浓度增加而增大;对的清除,FXEt OH,XBEt OH,Vc的IC50值分别为73.34,335.30,79.31μg/m L;对O-2·的清除,FXEt OH,XBEt OH,Vc IC50值分别为64.81,131.89,191.62μg/m L.结论复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提物在体外均具有一定的抗肿瘤活性和较好的综合抗氧化能力,抗氧化可能是其抗肿瘤作用的机制之一.

长白山两种橐吾属植物矿质元素测定与分析

采用电感耦合等离子体发射光谱法测定长白山野生复序橐吾(Ligularia jaluensis Kom.)和狭苞橐吾(Ligularia intermedia Nakai)叶、花中的16种矿质元素含量,为橐吾属植物作为药食同源植物开发利用提供参考数据.结果显示:复序橐吾、狭苞橐吾叶和花中均含有16种矿质元素,常量元素中Ca、K、Mg含量较高;人体必需微量元素中Mn、Fe、B、Zn含量较高,且明显高于常见的蔬菜和野菜.由此可见,复序橐吾和狭苞橐吾的矿质元素种类和含量丰富,具有潜在的药用、食用和饲用价值,开发利用前景广阔.