复方中药免疫球蛋白制剂的研制与应用

【目的】结合中药与免疫球蛋白对仔猪疾病的不同防治机理,进行复方中药免疫球蛋白制剂的制备及其初步应用研究,为猪血的综合利用与兽用免疫球蛋白类制剂的开发应用提供依据。【方法】以健康猪血为原料,从其中分离纯化免疫球蛋白;将免疫球蛋白与白头翁、三颗针、黄柏、苦参、苍术、益母草等6种中药提取物相结合,制备复方中药免疫球蛋白制剂,并对断奶仔猪进行初步应用研究。【结果】免疫球蛋白粗品、纯品中的IgG含量分别为658.33和955.33ng/mL,IgG的效价分别为1∶128与1∶64;纯品的IgG含量和效价与标准品接近,二者无显著差异(P>0.05)。与中药制剂、免疫球蛋白制剂相比,复方中药免疫球蛋白制剂使断奶仔猪的头均日增质量分别提高了20.1%(P<0.05)和19.3%(P<0.05),料质量比分别下降了10.5%(P<0.05)和8.4%(P<0.05);28～42日龄,血清中的IgG含量显著高于其他试验组(P<0.05)。【结论】分离纯化免疫球蛋白的方法可行;复方中药免疫球蛋白制剂能够显著提高断奶仔猪生产性能与机体免疫力。

复方中药免疫球蛋白制剂的研制与应用

目的:结合中药与免疫球蛋白对仔猪疾病的不同防治机理,进行复方中药免疫球蛋白制剂的制备及其初步应用研究,为猪血的综合利用与兽用免疫球蛋白类制剂的开发应用提供依据。方法:以健康猪血为原料,从其中分离纯化免疫球蛋白;将免疫球蛋白与白头翁、三颗针、黄柏、苦参、苍术、益母草等6种中药提取物相结合,制备复方中药免疫球蛋白制剂,

复方中药制剂对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

【目的】探究蛹虫草、灵芝、黄芪、五味子、党参、当归、茯苓复方中药制剂对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。【方法】建立H22荷瘤小鼠模型,随机将小鼠分为模型组、复方中药制剂高(250 mg/(kg·d))、中(50 mg/(kg·d))和低(10 mg/(kg·d))剂量组,各剂量组灌胃给药,1次/d,模型组灌胃同等体积生理盐水,试验期3周,另设置正常组进行常规饲喂。末次给药后采集抗凝全血,检测小鼠血细胞数量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)、细胞因子水平。用流式细胞术检测外周血CD4~+/CD8~+ T细胞亚群;通过小鼠脾淋巴细胞转化试验、碳粒廓清试验考察荷瘤小鼠免疫活性。【结果】与正常组相比,模型组小鼠血液中白细胞(WBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞(W-SCR)数量极显著或显著减少(P<0.01;P<0.05),白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、SOD、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性以及细胞色素C(Cyt C)浓度均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。与模型组相比,高、中和低剂量组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α含量和SOD、Caspase-3活性均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),MDA含量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05);中剂量组小鼠血液中WBC、PLT数量极显著或显著增加(P<0.01;P<0.05);高剂量组小鼠血液中PLT数量极显著增加(P<0.01),Cyt C浓度显著升高(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,模型组小鼠血液T淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群细胞数量较正常组显著减少(P<0.05)。与模型组相比,复方中药制剂高、中剂量组小鼠血液T淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群细胞数量显著增加(P<0.05),高、中剂量组小鼠刺激指数、半数溶血值和吞噬指数均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。【结论】复方中药制剂能提高H22荷瘤小鼠免疫活性,进而促进肝癌细胞凋亡。

中药复方制剂对生长肥育猪生长性能及血清免疫球蛋白的影响

本试验将60头75～80日龄、体重45kg左右的杜长大杂种生长肥育猪随机分为3组,每组20头,对照组猪饲喂基础饲粮,试验1组猪饲喂基础饲粮+1%中药制剂,试验2组猪饲喂基础饲粮+2%中药制剂,试验期60d。结果表明,与对照组相比,中药复方制剂能显著提高猪的生长性能,并能提高肥育猪血清IgG、IgA、IgM的水平,从而增强了生长肥育猪的自身免疫力。

中药复方对免疫抑制模型小鼠细胞因子、免疫球蛋白及红细胞免疫黏附功能的影响

【目的】评价自拟中药复方对免疫抑制小鼠血清细胞因子、免疫球蛋白和红细胞免疫黏附功能的影响。【方法】通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型。试验组免疫抑制小鼠分别按20,10和5g/kg剂量灌胃自拟中药复方,同时设置模型对照组(灌胃等体积生理盐水)、健康对照组(灌胃等体积生理盐水)和黄芪多糖对照组(灌胃剂量66mg/kg),连续7d,试验第0,3,7天采集血样,用血细胞自动分析仪测定小鼠血细胞数,用酶联免疫吸附试验测定血清IL-2、IgG、IgM、IL-4和IFN-γ含量,并计算IL-4/IFN-γ,用红细胞C3b受体花环(C3b RR)及免疫复合物花环(ICR)试验分析红细胞免疫黏附功能。【结果】通过腹腔注射环磷酰胺(80mg/kg,1次/d,连用3d)成功建立了免疫抑制小鼠模型。所用中药复方和黄芪多糖可显著提高免疫抑制模型小鼠WBC,其中以10和20g/kg剂量中药复方效果显著;10和20g/kg剂量中药复方可显著提高免疫抑制模型小鼠血清中IgG和IgM含量,提高或恢复免疫抑制模型小鼠血清中IL-2含量,并可促进免疫抑制模型小鼠血清IL-4和IFN-γ含量、IL-4/IFN-γ、红细胞C3b RR率恢复至健康小鼠水平;所用中药复方和黄芪多糖对免疫抑制模型小鼠红细胞ICR率的影响不明显。【结论】自拟中药复方通过调控细胞因子和免疫球蛋白生成,对环磷酰胺介导免疫抑制模型小鼠的细胞免疫、体液免疫和红细胞免疫黏附功能发挥正向调节作用,其中以10g/kg剂量效果明显。

中药复方S-抗毒合剂对家兔免疫球蛋白的影响研究

目的 观察中药复方S -抗毒合剂对家兔免疫球蛋白IgG、IgM、和IgA的影响。方法 家兔饲喂含3%复方S -抗毒合剂的日粮 ,然后在 1、3、5、7、14、2 1、2 8日时采血进行免疫球蛋白分析。结果 中药实验组与对照组比较 ,IgG和IgA有显著差异 ;且在 1- 14日内中药实验组免疫球蛋白呈明显的双向调节变化 ;在 14 - 2 8日IgG显著增高 ,IgM、和IgA显著降低。结论 中药复方S -抗毒合剂对免疫球蛋白IgG、IgM、和IgA有明显的影响 ;并具有双向调节免疫球蛋白的作用。

中药复方多糖对不同MHCB-LβⅡ基因型鸡新城疫抗体和免疫球蛋白IgG、IgM含量的影响

为探究MHC B-LβⅡ基因多态性对中药复方多糖免疫调节剂量的影响,采用PCR-SSCP方法将500羽黄麻肉鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,再将各组分成高、中、低剂量中药复方多糖组和空白对照组。分别于8日龄皮下注射50.0、25.0、12.5 mg/m L中药复方多糖和生理盐水各0.2 m L/只,连续注射7 d,于21、42、56、70日龄各组随机取5只试验鸡,翅静脉采血分离血清,测定血清中新城疫(newcastle disease,简称ND)抗体和Ig G、Ig M的含量。结果显示,多糖能提高MHC B-LβⅡ不同基因型鸡新城疫抗体和Ig G、Ig M含量,且高剂量组中药复方多糖组中AB基因型个体血清中新城疫抗体含量最高,AA基因型个体血清中Ig G、Ig M含量最高;中、低剂量中药复方多糖组中AB基因型个体血清中新城疫抗体含量和Ig G、Ig M含量最高。表明中药复方多糖能提高不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的免疫力,且中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因鸡的最适免疫调节剂量不同。

复方中药对早期断奶仔猪血清免疫球蛋白及肠黏膜免疫细胞的影响

为研究复方中药对早期断奶仔猪血清免疫球蛋白及肠黏膜免疫细胞的影响,选用28日龄杜长大仔猪120头,随机分为4组,每组30头猪。空白对照组Ⅰ(28日龄不断奶,饲喂基础饲粮),空白对照组Ⅱ(28日龄断奶,饲喂基础饲粮),中草药Ⅰ组(28日龄断奶,饲喂基础饲粮+0.3%组方Ⅰ制得的中药制剂),中草药Ⅱ组(28日龄断奶,饲喂基础饲粮+0.3%组方Ⅱ制得的中药制剂)。试验期为14 d,进行血清中IgG、IgA和IgM的含量测定,并采集十二指肠、空肠、回肠,制作病理切片,分析肠黏膜免疫细胞的数量和分布。结果表明,与空白对照组Ⅱ相比,中草药Ⅰ组极显著提高血清中IgG、IgA和IgM含量(P<0.01),极显著提高肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞数量(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加0.3%组方Ⅰ制得的中药制剂,能够明显提高断奶应激仔猪的体液免疫功能,在一定程度上增强断奶仔猪免疫力。且能促进小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞的增殖,提高肠道的免疫学屏障功能。可有效缓解早期断奶应激对仔猪造成的伤害。

复方中药制剂对仔猪生长性能及免疫机能的影响

在饮水中添加不同剂量的复方中药制剂,研究其对仔猪生长性能及免疫机能的影响。选取48头(15d±2d)"杜×长×大"三元杂交仔猪,按体重和性别随机分为4组,每组12头。在15d,对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组仔猪分别饮用自来水、自来水+0.5g/100mL复方中药制剂、自来水+1.0g/100mL复方中药制剂和自来水+1.5g/100mL复方中药制剂。试验期为30d。所有仔猪于15、29和43d时进行称重,计算平均日采食量、平均日增重和料重比,并观察断奶后腹泻情况。另外,每组选取6头仔猪,于15、28、33、38和43d,经前腔静脉采血,测定部分免疫指标及猪瘟抗体水平。结果显示,饮水中添加不同剂量的复方中药制剂,能显著提高仔猪平均日增重(P<0.01),降低料重比及腹泻率(P<0.01或P<0.05),显著提高T淋巴细胞转化率(P<0.05),同时能够促进猪瘟抗体的产生,提高免疫球蛋白的水平。因此,在饮水中添加适量的复方中药制剂,能够明显改善仔猪的生长性能,增强机体免疫力,促进仔猪的生长。

三种中药复方制剂对雏鸡免疫器官发育及免疫功能的影响

为了探究中药复方对雏鸡免疫功能及免疫器官发育的影响.试验以黄芪、白术、防风、黄芩和五倍子等单味中药组成3种中药复方制剂,将120只1日龄健康雏鸡分为4组(Ⅰ组,"扶正止泄散",未加玉屏风散基础复方组;Ⅱ组,"扶正止泄散"复方组;Ⅲ组,"芪术扶正汤"复方组;Ⅳ组,对照,不加喂药),分别于42、52和62日龄对试验组和对照组鸡进行检测,测定T淋巴细胞、鸡γ-干扰素、抗体效价和免疫器官指数等免疫指标,同时制作组织切片、HE染色,观察其对雏鸡内脏器官发育的影响.结果表明:试验组T淋巴细胞ANAE阳性率、抗体效价和γ-IFN水平显著升高(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ组优于Ⅲ组;免疫器官指数和血细胞数量显著高于对照组(P<0.01或P<0.05),Ⅱ组优于Ⅰ组;镜下观察组织切片,各器官结构良好无明显病变.3种中药复方对雏鸡免疫功能具有正向促进作用,增强机体细胞及体液免疫功能,其中Ⅱ组具有明显优势.

中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响

选取30头健康奶牛和30头隐性乳房炎奶牛进行中药复方制剂饲喂试验,对奶牛的B淋巴细胞EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数和T淋巴细胞转化率进行测定,观察中药复方制剂对奶牛免疫机能的影响。结果显示,健康奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率均显著高于隐性乳房炎奶牛(P<0.01或P<0.05);中药复方制剂可以显著提高健康奶牛和隐性乳房炎奶牛的EAC花环形成率、中性粒细胞吞噬率、中性粒细胞吞噬指数、T淋巴细胞转化率(P<0.01或P<0.05)。试验表明,中药复方制剂可以增强奶牛机体的体液免疫和细胞免疫功能,促使隐性乳房炎奶牛免疫机能的恢复。

复方中药制剂“球宁”对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡红细胞免疫功能的影响

用青蒿、常山等组成复方中药制剂“球宁”,并对其进行超微粉碎加工成微粉制剂。按不同比例添加与饲料中,饲喂人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡,以磺胺喹啉钠为对照,在感染后8d剖杀,检测血浆中红细胞C3b受体(RBC-CR1)花环率和免疫复合物(RBC-IC)花环率,以观察“球宁”及其微粉制剂对人工感染柔嫩艾美耳球虫的雏鸡的红细胞免疫功能的影响。结果,粗粉组(2%)、微粉组(2%)、微粉组(1%)三组的红细胞C3b受体花环形成率比阳性对照组有明显提高(p<0.05);红细胞免疫复合物(RBC-IC)花环形成率比阳性对照组有所降低(p<0.01)。说明所试药物能改善红细胞的免疫粘附功能,显著降低血浆中免疫复合物的含量,降低球虫病对机体的损伤。

中药复方制剂对鸡红细胞免疫功能影响的研究

选择120只健康仔鸡,随机分成8组,每组15只。Ⅰ组为健康对照,Ⅱ组为接毒对照,Ⅲ-Ⅴ组分别是中药免疫对照(剂量为1％,2％,5％饲料添加),Ⅵ组为疫苗应用对照组,Ⅶ组为中药预防对照组,Ⅷ组为疫苗与中药共同免疫,再接种禽流感病毒,中药应用剂量与方法同Ⅲ组。分别在免疫前1天、免疫后第三天、攻毒后第二天,按郭峰法测定各组鸡的红细胞免疫功能状态。结果试验表明:Ⅱ组攻毒后三天,RBC-cR1花环率和RBC-IC花环率显著降低,相对其他各组差异极显著。Ⅵ组在疫苗免疫后第三天,红细胞免疫功能出现短暂性降低,但在第九天恢复正常。Ⅵ组中药预防组虽然RBc—CR1花环率和RBc—IC花环率降低,相对Ⅰ组(正常对照组)差别不显著,且在第九天,升高到正常水平。Ⅷ组疫苗与中药同时应用,该复方制剂能消除红细胞免疫功能短暂性降低的不良反应。Ⅲ～Ⅴ组(免疫增强组)RBC—CR1花环率和RBC—IC花环率,相对Ⅰ组(正常对照组)差别显著,与其他组差别极显著。结论:接种AIV后会引起鸡红细胞免疫功能降低,该中药复方能增强机体免疫功能的同时,且能消除红细胞免疫功能降低所带来的不良反应。

中药复方制剂禽康素对鸡免疫功能的影响试验

将2周龄健康雏鸡,滴鼻免疫新城疫活疫苗,同时肌肉注射新城疫灭活疫苗,随机分为2组,试验组饲料中添加中药复方制剂禽康素,对照组饲料中不添加任何药物,连续给药14d。免疫后7、14、21d,采用β-微量血凝抑制试验检测雏鸡抗体水平,测定鸡的ERFC形成率和EAC花环形成率,计算脾脏、胸腺、法氏囊三种免疫器官指数。试验结果显示,试验组鸡和对照组相比,雏鸡抗体水平、ERFC形成率和EAC花环形成率、三种免疫器官指数均有显著提高。

自拟中药复方制剂对患子宫内膜炎肉母牛外周血淋巴细胞、细胞因子和繁殖激素的影响

自拟配制中药复方制剂,探讨该方对患子宫内膜炎肉母牛外周血淋巴细胞、细胞因子和繁殖激素等的影响。试验选取20头产后患有子宫内膜炎肉母牛,随机分为对照组、中药复方制剂低、中和高3个剂量组。试验组每天分别灌服400 g/头、500 g/头、600 g/头剂量的中药复方制剂,连续给药14 d。试验结束后尾静脉采集血液样本,预处理后对外周血中T淋巴细胞亚群比例、淋巴细胞转化率和凋亡率、血清中细胞因子、免疫球蛋白和生殖激素的含量进行测定。结果表明,复方中药制剂中、高浓度组与对照组相比,CD4^(+)T细胞比例、IL-4、AMH、E2和INHB均极显著升高(P<0.01),IgM和IgA水平显著升高(P<0.05),淋巴细胞转化率显著提升(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05);低浓度组与对照组相比CD4^(+)T细胞比例显著升高(P<0.05),IL-6含量极显著降低(P<0.01);在低、中和高浓度组中CD4^(+)/CD8^(+)T细胞较对照组出现极显著升高(P<0.01),CD8^(+)T细胞比例极显著降低(P<0.01)。与低剂量组相比,高浓度组CD8^(+)T细胞比例显著降低(P<0.05),CD4^(+)/CD8^(+)T细胞和AMH极显著升高(P<0.01),CD4^(+)T细胞比例显著提升(P<0.05);中浓度组CD4^(+)/CD8^(+)T细胞显著升高(P<0.05)。说明在中药复方制剂干预后,患子宫内膜炎肉母牛能够显著增强免疫性能,降低炎症反应,改善繁殖激素水平。

复方中药制剂对育肥猪主要疫病抗体水平的影响

中药及中药提取物中含有多种氨基酸、维生素及矿物质等营养物质,同时富含有多糖、黄酮、皂苷及有机酸等生物活性物质,在猪、鸡等动物养殖过程中被广泛应用。国内许多研究表明,黄芪、苍术、当归、淫羊藿、杜仲、人参及丹参等多种中药具有提高免疫机理、抗氧化能力、促进动物生长、改善肉品质等多种药理作用,被广泛应用于动物绿色养殖过程中。本试验以二元杂交育肥猪为研究对象,添加不同水平复方中药制剂,并测定其主要疫病(PCV-2、PRRS、FMDV、CSFV、PR-gB)抗体水平的影响,为进一步临床应用奠定基础[1]。

一种中药复方制剂在饲料中长期添加对罗氏沼虾生长及免疫功能的影响

饲料中添加2 kg/t的中药复方制剂,开展了84 d饲喂试验,通过测定罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)的生长性能及血液和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)、碱性磷酸酶(AKP)和吞噬细胞吞噬等活性评价该中药复方制剂对罗氏沼虾生长及免疫功能的影响。饲喂试验结束后,利用副溶血弧菌进行攻毒,计算保护率,评价该制剂对罗氏沼虾弧菌感染的保护效果。结果显示,饲喂结束后,中药复方制剂组罗氏沼虾体重显著高于空白组(P<0.05)。罗氏沼虾血液和肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)、碱性磷酸酶(AKP)和吞噬细胞吞噬等活性也显著提高(P<0.05),且在第7 d或14 d达到峰值。副溶血弧菌攻毒后,中药复方制剂组的7 d累计死亡率为61.1%,基础饲料组的死亡率90.0%,该中药复方制剂对罗氏沼虾的保护率为32.1%。试验表明,饲料中添加2 kg/t中药复方制剂可显著提高罗氏沼虾生长性能及免疫功能,减少副溶血弧菌感染引起的死亡。为获得持久的免疫效果,建议长期添加。

中药复方制剂、糖萜素和微生态制剂联合应用对文昌鸡血液生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响

为了研究中药复方制剂、糖萜素和微生态制剂联合应用对文昌鸡血液生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响，试验选取1200只1日龄文昌鸡为试验动物进行为期120天的全程无抗饲养试验。试验鸡群随机分为2组，每组2个重复。在饲养过程中，对照组饲喂基础饲粮，发病选择抗生素治疗；试验组分别在不同的日龄阶段在基础饲粮中添加不同剂量的中药复方制剂和糖萜素，发生疾病用中药复方制剂、糖萜素和微生态制剂配合治疗。结果表明，本试验方案能显著提高血清中钙、磷的含量，降低血清中胆固醇的含量（P〈0．05）；能够提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性和降低血清中丙二醛的含量（P〈0．05）；显著提高IgA、IgE、IgM、补体C3和补体C4的含量（P〈0．05）。由此得出结论，中药复方制剂、糖萜素和微生态制剂联合应用能够显著改善文昌鸡的血液生化指标，提高文昌鸡的抗氧化能力和免疫功能。

中药复方提取物对免疫抑制雏鸡IBD疫苗的免疫增强效果

为探索中药复方提取物(由黄芪、女贞子、枸杞子、菟丝子按质量比2∶2∶1∶1制备而成)对免疫抑制雏鸡的免疫增强效果,将180羽3日龄SPF雏鸡随机均分为对照组、模型组、阳性药物组、中药复方提取物高、中、低剂量组,试验组雏鸡连续3 d每天肌肉注射环磷酰胺90 mg/kg,建立鸡免疫抑制模型,对照组注射等量的生理盐水,中药复方提取物高、中、低组每天分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5g/L的中药复方提取物,阳性药物组每天添加200 mg/L的黄芪多糖粉,连续添加7 d。试验期38 d。结果显示:饮水中添加10.0、5.0 g/L中药复方提取物,免疫抑制雏鸡末体质量、日均增体质量和脾脏指数均显著高于模型组的(P<0.05);添加14 d后,雏鸡血清IgM含量开始高于对照组,并维持在较高水平;21 d后,血清中IgA、IFN–γ和中剂量组的IgG含量显著高于模型组的(P<0.05);在接种传染性法氏囊(IBD)疫苗后7 d,雏鸡传染性法氏囊病毒抗体效价提高,接种14 d后,还能维持较高的抗体效价水平,IBD疫苗的免疫效果增强。可见,在本试验条件下,在饮水中添加10.0、5.0 g/L的中药复方提取物能有效提高免疫抑制雏鸡的生长性能,改善其免疫功能,增强IBD疫苗的免疫保护效果。