3种质谱技术在复方扶芳藤合剂中多组分分析的应用对比

目的比较四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(QE)、四极杆/飞行时间高分辨质谱(Q-TOF)、三重四极杆串联质谱(QQQ)3种技术对复方扶芳藤合剂中13种化合物的分析能力。方法质谱条件QE采用加热电喷雾电离(HESI)离子源,使用Full MS/dd-MS2模式正、负离子同时扫描;Q-TOF采用电喷雾电离(ESI)离子源,正、负离子分开全扫描;QQQ采用ESI离子源、多反应监测(MRM)模式正、负离子同时扫描。色谱条件均采用色谱柱为C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为35℃。比较3种方法(3个样本组)的适用性、定性筛查能力、定量结果准确性等参数,并使用SIMACA 14.1多元变量统计分析软件对3组间各化合物的相关性和差异性进行主成分分析(PCA),并作PCA-X图。结果QE的方法适用性强于QQQ与Q-TOF,QE与Q-TOF的定性筛查能力均强于QQQ。PCA-X图显示,QE和QQQ的测定结果均处于同一位置,且距离较近,呈高度正相关;但与Q-TOF的测定结果处于相反位置,且距离较远,呈高度负相关。结论QE较Q-TOF和QQQ更适用于复方扶芳藤合剂中多组分的分析。

复方扶芳藤合剂影响免疫抑制小鼠CD11b^(+)单核细胞CD69的表达

目的:探讨复方扶芳藤合剂(compound fufangteng mixture,CFM)对免疫抑制小鼠脾及外周血CD11b^(+)单核细胞表面活化分子CD2、CD69及耗竭分子PD-1、CD95表达水平的影响。方法:将30只SPF级Balb/c雄性小鼠随机分为空白组(Control组)、免疫抑制模型组(CTX组)、复方扶芳藤合剂高、中、低剂量干预组(CTX+CFM-H组、CTX+CFM-M组、CTX+CFM-L组)、黄芪(astragalus particles,AP)干预组(CTX+AP组)。各组小鼠连续3 d腹腔注射环磷酰胺(CTX)70 mg/kg,遂按照分组方案分别给药10 d,末次给药24 h后取材。流式细胞术检测小鼠外周血CD11b^(+)单核细胞表面活化分子(CD2、CD69)和耗竭分子(PD-1、CD95)的表达。结果:与Control组相比,CTX+CFM-H组、CTX+CFM-M组、CTX+CFM-L组脾CD11b^(+)CD69表达水平均有改善趋势,并随着复方扶芳藤合剂剂量梯度降低。结论:复方扶芳藤合剂可调节免疫抑制小鼠脾CD11b^(+)细胞CD69的免疫功能。

复方扶芳藤合剂对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用

目的通过建立D-半乳糖致衰老小鼠模型,研究复方扶芳藤合剂(扶芳藤、黄芪、红参)的抗衰老作用。方法将144只实验小鼠随机分为6组:正常组,模型组,维生素E(Vit E)阳性对照组(100 mg/kg),复方扶芳藤合剂高(15 g/kg)、中(7.5 g/kg)、低(3.25 g/kg)剂量组,在给药8周后,进行Morris水迷宫实验和常压耐缺氧实验,计算小鼠胸腺、脾脏及脑指数,检测小鼠血清及脑组织中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MAD)和血清过氧化脂质(LPO)的量。结果复方扶芳藤合剂可明显提高衰老小鼠的学习和记忆能力,能显著增大衰老小鼠胸腺、脾脏及脑指数,还可不同程度提高衰老小鼠血清和肝组织中T-AOC和SOD与GSH-Px活性,降低MDA和LPO水平。结论复方扶芳藤合剂可能通过提高机体免疫和抗氧化能力而发挥抗衰老作用。

复方扶芳藤合剂HPLC指纹图谱共有模式的建立及其在制剂质量控制中的应用

目的:建立复方扶芳藤合剂的HPLC指纹图谱共有模式,为该制剂的质量控制提供新的方法。方法:采用HPLC分析方法,选择10批合格样品的HPLC指纹图谱,进行峰位校正,使谱峰匹配,建立复方扶芳藤合剂对照用HPLC指纹图谱共有模式。结果:该指纹图谱共有模式可以较好地区分合格与不合格产品。结论:HPLC指纹图谱质量控制方法为复方扶芳藤合剂的质量控制提供了更全面的信息。

复方扶芳藤合剂对亚急性衰老模型小鼠免疫功能的影响

目的观察亚急性衰老模型小鼠免疫功能的变化及复方扶芳藤合剂的干预效果。方法以D-半乳糖皮下注射法制备小鼠亚急性衰老模型,将144只小鼠随机分为空白对照组(空白组)、衰老模型对照组(模型组)、维生素E组(西药组)、复方扶芳藤合剂高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组),每组24例,造模结束后观察各组小鼠的体重变化、行为学变化情况,测定各组小鼠的脑指数、胸腺指数以及脾腺指数。结果与空白组比较,模型组的体重增加量显著下降,潜伏期显著延长,穿过平台的次数显著减少,抗缺氧时间明显缩短,脑指数、脾腺指数和胸腺指数均明显减小(P<0.05);与模型组比较,中药中、低剂量组的体重增加速度明显增加,中药组随着剂量的减少,潜伏期缩短,穿过平台的次数增加(P<0.05),且低剂量组有显著差异(P<0.01);抗缺氧时间均明显延长,中药各剂量组的免疫指标均增加明显(P<0.05)。结论复方扶芳藤合剂可有效改善衰老模型小鼠学习记忆能力、智力及免疫功能,有效控制小鼠体重减轻等现象,但改善程度未呈现量效关系。

复方扶芳藤合剂HPLC指纹图谱测定方法研究

目的:研究复方扶芳藤合剂(红参、黄芪,等)的HPLC指纹图谱的测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:(shim packCLC ODS6.0mm×150mm),流动相∶乙腈 水(梯度洗脱);柱温:25℃,检测波长:203nm,分析时间:60min,流 速:1ml·min-1。结果:标示出复方扶芳藤合剂19个共有峰。结论:该法测定的HPLC指纹图谱为复方扶芳藤合剂的质 量控制提供了更全面的信息。

复方扶芳藤合剂对D-半乳糖、亚硝酸钠致小鼠认知障碍功能的改善作用

目的探讨复方扶芳藤合剂对D-半乳糖、亚硝酸钠致小鼠认知障碍功能的改善作用。方法 D-半乳糖、亚硝酸钠建立认知障碍模型后,60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、脑复康组(0.3 g/kg)及复方扶芳藤合剂高、中、低剂量组(9、4.5、2.75 g/kg)。Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力,ELISA法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,化学法检测小鼠脑组织一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,HE染色观察小鼠脑组织海马神经元结构,免疫组化法检测小鼠脑组织海马CA1区一氧化氮合成酶1(NOS1)酶表达。结果与模型组比较,复方扶芳藤合剂高、中剂量组逃避潜伏期明显缩短,寻求次数与平均停留时间明显增高,NOS1酶阳性百分率及NO、MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论复方扶芳藤合剂具有改善模型小鼠学习记忆能力,可能与其抗氧化作用有关。

复方扶芳藤合剂中重金属元素测定及其安全性评价

目的测定复方扶芳藤合剂(扶芳藤、黄芪、人参等)中14种重金属元素的量。方法采用ICP-MS检测该药品中铁、铬、锰、镍、铜、锌、砷、银、镉、锑、钡、铊和铅元素的量,计算每日服用剂量并与《美国药典》比较,得出安全边际系数(MOS)。结果本方法各元素线性相关系数、检出限、加标回收率、精密度和标准参考物质测定等各项方法学指标均符合欧盟EN 2002/657/EC文件分析要求。测试了2011年和2012年生产的6个批次样品,14种元素测定结果均小于USP规定的口服限量或GB2762-2012食品中污染物限量;所测元素MOS系数均大于1。结论ICP-MS测定痕量重金属元素准确可靠快速,复方扶芳藤合剂长期服用重金属摄入是安全的。

HPLC-ELSD同时测定复方扶芳藤胶囊中卫矛醇和黄芪甲苷的含量

目的:建立复方扶芳藤胶囊(红参,黄芪、扶芳藤等)中卫矛醇和黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用正相HPLC法,色谱柱:Lichrospher5-NH2柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(91∶9);流速1.0mL/min;柱温为28℃;检测器:PL-ELS2100型蒸发光散射检测器(漂移管温度:65℃,雾化室温度:50℃,气体流量:0.9L/min)。结果:卫矛醇进样量在2.91～29.1μg范围内,黄芪甲苷在1.03～10.3μg范围内,其峰面积的自然对数(Y)与进样量的自然对数(X)呈良好的线性关系(r>0.9990),卫矛醇和黄芪甲苷的平均加样回收率分别是99.24%和103.17%,RSD分别为2.6%和1.8%(n=6)。结论:该方法稳定、重复性好,结果准确,可作为复方扶芳藤胶囊中卫矛醇和黄芪甲苷的含量测定方法。

复方扶芳藤合剂对气血两虚型慢性疲劳综合征疗效观察

目的:探讨复方扶芳藤合剂对女性气血两虚型慢性疲劳综合征(CFS)的临床疗效。方法:符合纳入标准的90例患者随机分为观察组(复方扶芳藤合剂)45例,对照组(常规西医治疗)45例,比较两组临床疗效。结果:治疗3个月后观察组总有效率89.1%,对照组总有效率61.8%,观察组临床疗效优于对照组,复发率低于对照组,预后方面优于对照组。结论:复方扶芳藤合剂对气血两虚型慢性疲劳综合征近期临床疗效肯定。

效应面法优化复方扶芳藤胶囊的复合酶提取工艺

目的：优化复方扶芳藤胶囊的复合酶提取工艺。方法：采用单因素试验考察Celluclast1.5L纤维素酶用量、Pectines XXL果胶酶用量、pH值、酶解温度、料液比和提取时间对人参皂苷Rb1转移率、总糖得率和干膏得率的影响,然后采用效应面法优化提取工艺。结果：优化的最佳工艺条件为：纤维素酶用量为1.0%、果胶酶用量为1.0%、pH值为5.2、酶解温度为56℃、料液比为1∶14.38、提取时间为4 h,人参皂苷Rb1的转移率为79.75%,总糖得率为13.57%,干膏得率为16.78%,实际OD值与理论值偏差为-2.51%。结论：纤维素酶联用果胶酶能高效提取复方扶芳藤胶囊有效成分,效应面法优化的提取工艺合理、可行。

复方扶芳藤合剂对心衰患者的心功能及生活质量的影响

目的:观察复方扶芳藤合剂对慢性心力衰竭(CHF)患者的心功能和生活质量的影响。方法:将72例CHF患者随机分为对照组和观察组,对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用复方扶芳藤合剂,疗程1个月,观察两组治疗前后(NYHA)心功能分级、6min步行试验(6MWT)距离和心率变化,记录治疗前后Lee氏心衰计分、明尼苏达心衰生活质量调查表评分(MLHF)。结果:观察组心功能分级疗效总有效率、Lee氏心衰疗效总有效率优于对照组(P<0.05);治疗后心率和生活质量评分均低于对照组(P<0.05);治疗后6MWT距离高于对照组(P<0.05)。结论:在常规西医治疗基础上联合应用复方扶芳藤合剂可以进一步改善慢性心力衰竭患者的心功能和生活质量。

HPLC-ELSD法测定复方扶芳藤胶囊中黄芪甲苷含量

目的:建立复方扶芳藤胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD法,Agilent C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈:水(32:68);流速:0.8mL/min;柱温:30℃;进样量20μL;ELSD检测器漂移管温度为75℃,载气(空气)流速2.2L/min。结果:在色谱试验条件下,黄芪甲苷进样量在1.21～12.19μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9995;平均加样回收率为99.33,RSD=1.04(n=9)。结论:采用HPLC-ELSD法测定复方扶芳藤胶囊中黄芪甲苷含量,方法简单,准确,灵敏,可作为复方扶芳藤胶囊的质量控制方法之一。

复方扶芳藤合剂对离体蛙心和麻醉小鼠ECG的影响

目的:研究复方扶芳藤合剂(FFH)在心血管系统(HBC)中的药效学;研究FFH对离体蛙心的心肌收缩力、心率和麻醉小鼠ECG的影响;研究FFH对小鼠的镇静催眠作用.方法:用斯氏法制备离体蛙心,观察FFH对离体蛙心收缩力、心率的影响;测定FFH对麻醉小鼠ECG的影响,用光电管法观察FFH对小鼠的镇静作用.结果:FFH对离体蛙心具有负性肌力作用;对麻醉小鼠ECG结果显示P-P间隙延长,提示可使减慢心率;FFH7.5g/kg对小鼠有镇静作用,有协同异戊巴比妥钠催眠作用的趋势.结论:FFH对离体蛙心和麻醉小鼠具有减慢心率作用,对小鼠具有镇催眠作用.提示复方扶芳藤合剂对高血压临床症状有一定改善作用.

高效液相色谱法测定复方扶芳藤合剂中黄芪甲苷的含量

复方扶芳藤合剂是由扶芳藤、红参、黄芪等炮制而成的中药口服液，具有益气补血、健脾养心之功效，用于气血不足、心脾两虚等症。黄芪是其功效成分，据药理试验表明：它具有抗炎、降压、镇痛、镇静等作用。据中国药典2005年版，黄芪药材和复方扶芳藤合剂中的黄芪甲苷含量测定分别采用高效液相色谱法（HPLC）和薄层色谱法㈦。鉴于薄层色谱法灵敏度偏低、操作较繁琐，本文改用高效液相测定法测定其含量，方法简便，准确可靠。

复方扶芳藤合剂免疫调节作用的实验研究

目的:研究复方扶芳藤合剂(FFH)对小鼠免疫调节的作用。方法:以环磷酰胺复制免疫抑制模型,测定各组小鼠胸腺指数、脾脏指数、单核巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素形成和淋巴细胞转化率并进行比较,分别观察FFH对免疫抑制小鼠的非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫作用。结果:FFH可明显提高免疫低下小鼠的脏器指数、碳廓清指数;提高小鼠血清溶血素水平;增加小鼠淋巴细胞转化率。与CTX模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:FFH具有明显的免疫增强作用。

复方扶芳藤合剂对大鼠血栓形成和血液流变学的影响

[目的]研究复方扶芳藤合剂对小鼠凝血时间、全脑缺血缺氧、急性肺栓塞及大鼠血栓形成和血液流变学的影响,为临床增加适应证提供参考。[方法]复方扶芳藤合剂按原药材5.4,10.8,21.6 g/kg灌胃7天,观察对小鼠凝血时间、全脑缺血缺氧、急性肺栓塞及大鼠体内血栓形成、全血粘度的影响。[结果]在本文试验剂量下,复方扶芳藤合剂高中剂量组可以明显延长小鼠凝血时间、断头后张口呼吸时间和缩短ADP诱发小鼠急性肺栓塞呼吸喘促时间(P<0.05或P<0.01);对大鼠体内血栓形成无明显影响,但中高剂量组均可降低全血粘度、血浆粘度(P<0.05),高剂量组还可降低全血高切还原粘度(P<0.05)。[结论]复方扶芳藤合剂能明显延长凝血时间、小鼠断头后张口呼吸时间和缩短ADP诱发的肺栓塞呼吸喘促时间;具有降低血液粘度的作用,有利于机体组织的血液供应。提示复方扶芳藤合剂在治疗心血管病症方面有一定疗效。

复方扶芳藤合剂联合HAART治疗HIV/AIDS气虚血瘀证临床研究

目的:观察复方扶芳藤合剂联合高效抗逆转录病毒(highly active antiretroviral treatment,HAART)治疗艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)气虚血瘀证的临床疗效,并探讨其安全性。方法:将48例HIV/AIDS患者随机分为按照随机数字表法分为对照组和治疗组,其中治疗组又分3组,分别为治疗组A,治疗组B和治疗组C,所有患者服用的抗病毒药物均为国家免费发放的治疗药物。治疗组在服用HAART基础上加服由广西中医药大学百年乐制药厂免费提供的复方扶芳藤合剂,规格:每盒6支装,每支装15 mL。治疗组A采用HAART联合复方扶芳藤合剂日2次治疗(复方扶芳藤合剂服法:每次1支,每日2次),治疗组B采用HAART联合复方扶芳藤合剂日1次治疗(复方扶芳藤合剂服法:每次1支,每日1次),治疗组C采用HAART联合复方扶芳藤合剂隔日1次治疗(复方扶芳藤合剂服法:每次1支,每2日1次)。疗程为6个月。治疗前后检测受试者血清CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、病毒载量变化以及血常规、肝肾功能等安全性指标。结果:治疗后3组治疗组与对照组的CD4^+T细胞绝对计数均平稳提高,但组间比较无统计学意义(P>0.05);其中治疗组A与治疗组B的CD4^+T细胞计数上升幅度均高于对照组,以治疗组B上升幅度最高。治疗前后3组治疗组与对照组CD8^+T细胞绝对计数均呈下降趋势,治疗组与对照组病毒载量检测不出的人数均上升。治疗组对贫血患者的血红蛋白水平改善趋势明显,且未出现肝肾功能损害等不良反应。结论:复方扶芳藤合剂可以提高HIV/AIDS气虚血瘀证血清CD4^+T细胞计数,提高贫血患者的血红蛋白计数。