基于网络药理学和生物信息学探讨满药复方木鸡颗粒治疗肝癌的分子机制

利用网络药理学和生物信息学方法揭示复方木鸡颗粒治疗肝癌的作用机制。通过TCMSP、Swiss Target Prediction数据库分别获取复方木鸡颗粒的活性成分以及相关靶点;在GEO数据库筛选肝癌的相关靶点;利用Venny 2.1在线平台获取药物与疾病的共同靶点;由Cytoscape 3.8.2绘制药物–成分–靶点–疾病网络;用STRING数据库构建PPI网络;通过DAVID数据库进行GO功能富集和KEGG通路富集分析;利用Kaplan Meier-Plotter数据库对关键基因的表达量及预后关联性进行分析;运用AutoDock软件对关键成分和靶点进行分子对接验证。复方木鸡颗粒中共获得37个活性成分,筛选出57个共有靶点,涉及生物过程98条、细胞成分17条、分子功能37条,介导15条信号通路。生存期分析结果显示,ESR1、CYP3A4、G6PD基因的表达量与肝癌患者的生存期具有相关性。分子对接表明筛选的6个活性成分与6个关键靶点蛋白之间具有较好的结合能力。复方木鸡颗粒中的大豆皂苷C、柚皮素、β-谷固醇、汉黄芩素等活性成分可以作用于ESR1、CYP3A4、G6PD等靶点,可能通过P53、戊糖磷酸途径、MAPK等信号通路发挥治疗肝癌的作用。

基于微流控芯片的复方木鸡颗粒抗肝肿瘤的“谱-物-效”关系

目的探讨复方木鸡颗粒抗肝肿瘤作用的物质基础。方法采用微流控芯片技术对复方木鸡颗粒进行体外抗肝肿瘤药效学研究;采用HPLC法建立复方木鸡颗粒指纹图谱;采用灰色关联度分析、偏最小二乘回归以及网络药理学方法,对复方木鸡颗粒进行“谱-物-效”分析;采用UPLC-Q-TOF-MS技术对药效成分进行解析;结果成功建立7批不同提取方式的复方木鸡颗粒指纹图谱,灰色关联分析结果显示复方木鸡颗粒与药效关联系数>0.80的14个成分中有7个呈正相关;对抗肝肿瘤具有促进作用的贡献依次为峰号48(木犀草素)>6(没食子酸)>19(绿原酸)>59(槲皮素)>67(山柰酚)>65(柚皮素)>38(鞣花酸)。结论本实验通过建立“谱-物-效”研究方法,明确以上7种活性单体很可能为复方木鸡颗粒的抗肝肿瘤物质基础。

满药复方木鸡颗粒抗菌和抗癌活性研究

为探索满药复方木鸡颗粒可能具有的其他药理作用,采用琼脂平板打孔法对满药复方木鸡颗粒对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌、白色念珠菌5种致病菌的抑菌活性进行研究,用MTT法研究其对结肠癌细胞HT-29的抑制作用。结果表明:复方木鸡颗粒对金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、白色念珠菌均具有抑制作用,质量浓度为0. 2 mg·m L^(-1)的样品对三种菌的抑菌圈分别为26. 29、24. 52和25. 13 mm;质量浓度为0. 2 mg·m L^(-1)的样品对结肠癌细胞HT-29有较明显的抑制作用,培养72 h后,生长抑制率可达到85. 52%。为满药复方木鸡颗粒功能的进一步研究补充了数据。

复方木鸡颗粒对CCl_4诱导大鼠肝硬化的防治作用

目的观察复方木鸡颗粒对四氯化碳诱导大鼠肝硬化的防治作用,初步探讨其可能作用机制。方法 SD大鼠按体质量随机分为空白对照组,模型组,秋水仙碱[0.1 mg/(kg·d)]组,复方木鸡颗粒高、中、低剂量[1.62、0.54、0.18 g/(kg·d)]组。腹腔注射四氯化碳橄榄油溶液建立大鼠肝硬化模型。给药组动物按上述给药剂量,从造模第2周起连续灌服,并按体质量变化调整给药量。检测大鼠血清中转氨酶(ALT、AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、透明质酸(HA)、IV型胶原(IV-C)及肝匀浆中羟脯氨酸(HYP)含有量。同时进行HE染色,显微镜下观察各组大鼠肝组织病理学变化情况。结果血清学检测结果显示,3周时,复方木鸡颗粒组大鼠血清肝功能指标较模型组有一定的改善,其中对血清中AST值、肝匀浆中HYP值的调节作用较为明显;5周及7周时,与模型组相比,复方木鸡颗粒组大鼠血清各项肝功指标均改善显著,其中对血清中AST、TP、ALB、TG、HA、IV-C值及肝匀浆中HYP含有量的改变作用最为明显。肝组织病理学检查结果显示,与模型组相比,3、5、7周时复方木鸡颗粒各给药组大鼠肝脏损伤程度均明显减轻。复方木鸡颗粒作用效果与用药时间呈正相关,用药时间越长,效果越明显,其中高剂量组治疗效果与秋水仙碱组相似。结论复方木鸡颗粒对四氯化碳诱导的大鼠肝硬化具有一定的防治作用,推测其可能通过在不同时间不同程度地调节大鼠血清各项肝功能指标,发挥降酶保肝、抗纤维化形成等作用,从而起到防治肝硬化的作用。

复方木鸡颗粒治疗肝炎AFP低持阳者疗效分析

目的 :观察复方木鸡颗粒治疗AFP低持阳者的疗效。方法 :被诊断为肝炎且AFP <2 0 0 μg/mL其中男性 32例 ,女性 8例 ;年龄 40岁～ 5 0岁 7例 ,5 0岁～ 6 0岁 2 4例 ,6 0岁以上 9例。采用口服复方木鸡颗粒 ,每次服 10g ,每日 3次 ,疗程 2个月。结果 :使用复方木鸡颗粒对控制肝炎患者AFP低阳及AFP升高疗效独特 ,治疗显效率为 6 2 .5 % ,有效率为87.5 % ,治疗后有 1例AFP仍有升高。结论

不同批次复方木鸡颗粒中无机元素的差异分析

目的通过测定8批复方木鸡颗粒中无机元素的含量,拟从无机成分的角度探讨复方木鸡颗粒的特征元素。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),以半定量分析的方式测定8批次复方木鸡颗粒无机元素的含量,建立复方木鸡颗粒无机轮廓谱,并对其差异元素中的重金属元素和人体有益元素进行全定量测定,同时,采用聚类分析和主成分分析,对其特征元素进行评价。结果构建了复方木鸡颗粒无机元素的轮廓谱,通过聚类分析和主成分分析共找到6个特征元素,包括Ca、Mg、Mn、K、Cr、Ni。结论从无机成分的角度明确了复方木颗粒的特征元素,为进一步探究复方木鸡颗粒的药效研究提供理论依据。

复方木鸡颗粒治疗乙肝肝纤维化疗效观察

目的:观察复方木鸡颗粒治疗乙肝肝纤维化的临床疗效。方法:将126例伴血清肝纤维化指标异常的慢性乙型病毒性肝炎患者随机分为治疗组与对照组,前者给予复方木鸡颗粒治疗,后者给予大黄虫丸治疗,两组疗程均为6个月。结果:与治疗前比较,治疗组治疗后血清肝纤维化指标和甲胎蛋白明显下降(P<0.01);与对照组治疗后比较有显著性差异(P<0.05)。治疗组与对照组总有效率分别为82.4%、60%(P<0.05);治疗半年,治疗组与对照组总有效率分别为89.7%、66.7%(P<0.05)。结论:复方木鸡颗粒有较好的抗肝纤维化、降低甲胎蛋白和改善肝功能作用。

HPLC法测定复方木鸡颗粒中金丝桃苷的含量

目的：建立复方木鸡颗粒中金丝桃苷含量测定的方法。方法：采用HPLC法,色谱柱为Fortisil-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以磷酸氢二钾溶液：乙腈（88：12）为流动相,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为360 nm,柱温为30℃。结果：金丝桃苷在2.5~50.0μg·m L-1线性关系良好。加样回收率99.5%,RSD%为1.04%。结论：本方法快速,简便,准确,专属性好,可用于复方木鸡颗粒中金丝桃苷的含量测定。

复方木鸡颗粒对小鼠慢性肝损伤的影响

目的:观察复方木鸡颗粒对小鼠慢性肝损伤的作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用高脂饲料、CCl4、D-氨基半乳糖盐酸盐、刀豆蛋白(ConA)建立4种慢性肝损伤模型,测定小鼠血清转氨酶(ALT、AST)水平、肝指数和肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,并做肝组织病理学检查。另高脂饲料所致的慢性肝损伤检测肝组织中三酰甘油(TG)含量,ConA所致的免疫性肝损伤取脾脏,称重,计算脾指数。结果:复方木鸡颗粒能显著降低4种慢性肝损伤小鼠的肝指数以及血清中AST与ALT(P<0.05或P<0.01)和肝组织中MDA水平(P<0.05或P<0.01),升高SOD水平(P<0.05或P<0.01)。高脂饲料所致慢性肝损伤小鼠肝组织中的TG含量显著降低(P<0.05或P<0.01),免疫性肝损伤中脾指数亦减小(P<0.05或P<0.01)。结论:复方木鸡颗粒对4种慢性肝损伤有不同程度的防治作用,其作用机制可能与抑制炎症因子的释放、抑制脂质过氧化反应、清除自由基等有关。

满药复方木鸡颗粒防治肝病的研究进展

从满药复方木鸡颗粒防治肝病的临床应用、药理作用等方面综述了近年来复方木鸡颗粒的研究进展。复方木鸡颗粒来源于满族民间验方"木鸡汤",由云芝(木鸡)、核桃楸皮、山豆根及菟丝子4味药组成。30多年的临床应用证明,复方木鸡颗粒在抑制甲胎蛋白升高,在治疗慢性乙型病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、慢性肝内胆汁淤积以及防治肝癌等方面疗效显著。若与一些药物如天晴甘美、干扰素、思美泰等合用,则效果更佳。此外,复方木鸡颗粒还对肝癌外的其他一些癌症也有一定的疗效。其保肝护肝的机制与降低血清谷丙转氨酶,抑制脂质过氧化反应和炎症因子释放,抑制肝癌细胞生长、诱导肝癌细胞凋亡等有关。研究复方木鸡颗粒,对防治肝癌等肝病及继承和发展民族医药事业有一定意义。

复方木鸡颗粒对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探究复方木鸡颗粒及其各组分对人肝癌SMMC-7721细胞周期和细胞凋亡的影响,初步阐明其作用机制。方法采用MTT法,检测复方木鸡颗粒及其中6种非挥发性组分对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪,检测复方木鸡颗粒及其有效组分对SMMC-7721细胞周期和凋亡的分布情况。结果细胞增殖抑制实验结果显示,与空白组相比,复方木鸡颗粒、核桃楸皮黄酮、菟丝子黄酮和山豆根生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用(P<0.05);流式细胞仪结果显示,复方木鸡颗粒能够阻滞SMMC-7721细胞停留在S、G2/M期,菟丝子黄酮通过阻滞SMMC-7721细胞停留于S期,核桃楸皮黄酮、山豆根生物碱通过阻滞SMMC-7721细胞停留在G2/M期,并诱导其凋亡,从而抑制其增殖。结论复方木鸡颗粒中不同有效组分能够阻滞肝癌细胞停留于不同期间,发挥阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,抑制SMMC-7721细胞增殖的作用,协同发挥抗肝癌的疗效。

基于微流控芯片的复方木鸡颗粒诱导HepG2细胞凋亡作用研究

目的设计并制作一种多功能的高通量药物筛选芯片,开展复方木鸡颗粒及其各组分诱导HepG2细胞凋亡作用的研究,通过高通量筛选初步阐明复方木鸡颗粒抗肝癌的药效组分。方法运用该药物筛选芯片,以HepG2细胞形态、生长状态以及细胞活力等特征进行芯片的适用性考察;同时探讨复方木鸡颗粒及其各组分对HepG2细胞作用24、48和72 h后,对HepG2细胞凋亡影响。结果细胞在芯片上形态正常,生长状态良好,24、48、72 h后细胞存活率均在96%以上;经作用24、48和72 h后,复方木鸡颗粒、核桃楸皮黄酮、菟丝子黄酮、山豆根生物碱均有明显的诱导HepG2细胞凋亡的作用,与空白组相比,细胞凋亡坏死率差异均有统计学意义(P<0.05),且随着给药时间的延长,呈现出时-效关系。结论该芯片重复性及适用性良好,且样品和试剂消耗量较小,可实现高通量多通道平行检测,极大地简化了药效筛选实验的复杂性,为中药复方有效组分抗肿瘤作用的快速筛选提供一种较为便捷的方法。

复方木鸡颗粒抗肝纤维化作用研究

目的:研究复方木鸡颗粒抗肝纤维化和降低甲胎蛋白(AFP)的作用。方法:选择63例肝纤维化、AFP增高的患者,随机分为复方木鸡颗粒(木鸡组)和复方鳖甲软肝片(鳖甲组)两组。木鸡组患者口服复方木鸡颗粒,10g/次,3次/d;鳖甲组患者口服复方鳖甲软肝片,4片/次,3次/d。疗程均为6个月。观察用药前后患者肝功能、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、AFP变化。结果:治疗后两组患者肝功能和肝纤维化指标均有明显改善,木鸡组患者的白蛋白升高比鳖甲组更明显,差异有非常显著性意义(P<0.01)。治疗后鳖甲组患者AFP水平有所下降,而木鸡组患者AFP水平则明显下降,与治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:复方木鸡颗粒有抗纤维化和降低AFP的作用,临床疗效优于复方鳖甲软肝片。

基于微流控芯片的复方木鸡颗粒药效组分诱导肝癌HepG2细胞凋亡配伍规律研究

目的探究复方木鸡颗粒中药效组分组成的各配伍组诱导肝癌HepG2细胞凋亡的药效学研究,筛选出药效组分最佳配伍比例,并将形成的新配伍复方与原复方进行药效差异性对比,从而较全面分析复方木鸡颗粒中药效组分诱导肝癌HepG2细胞凋亡的配伍规律,阐明其抗肝癌作用的药效物质基础。方法以复方木鸡颗粒6种药效组分为研究对象,设计并制作该微流控芯片,并结合均匀设计方法,以细胞凋亡坏死率为评价指标,开展药效组分最佳配伍比例研究,进而形成新的组分配伍复方。结果经灌注给药48 h后,复方木鸡颗粒各药效组分配伍组的细胞凋亡坏死率与空白组相比,均有显著性差异(P<0.05),且药效组分核桃楸皮黄酮,菟丝子黄酮,山豆根生物碱,山豆根多糖,菟丝子多糖,云芝多糖最佳配伍比例是4.35:5.80:15.03:10.73:1.36:1.20,并通过药效差异性对比试验,证明两者在相同剂量时,药效结果无显著性差异。结论本研究通过与微流控芯片技术的结合,初步揭示了复方木鸡颗粒药效组分抗肝肿瘤的组分组成规律,遵循中药组方理念,为抗肝肿瘤类新药的开发及临床联合用药奠定前期实验基础。

复方木鸡颗粒对DEN致大鼠肝炎的量效初步研究

目的评价复方木鸡颗粒对二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠肝炎模型的药效作用,初步探讨量效关系。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、联苯双酯组(阳性对照药,0.15 g·kg^(-1))及复方木鸡颗粒(0.04、0.12、0.36、1.08、3.24 g·kg^(-1))5个剂量组(n=12)。除空白对照组外,其余各组每周1次口服灌胃二乙基亚硝胺(70 mg·kg^(-1)),同时给予各组大鼠相应的药物,每天灌胃给药1次,连续4周。测定大鼠的体重、肝指数,运用酶联免疫法(ELISA)检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的含量,苏木精-伊红(HE)染色评价各组大鼠肝脏病理改变,探讨量效关系。结果与模型组比较,复方木鸡颗粒各剂量组大鼠的肝指数、血清中天门冬氨酸氨基转移酶、谷丙转氨酶的含量明显下降(P<0.01),体重明显升高(P<0.01或0.05),能够明显改善肝细胞状态和炎性细胞浸润等病理变化。其中复方木鸡颗粒0.12 g·kg^(-1)组生理、生化、病理指标均有极显著性差异,药效明显,复方木鸡颗粒0.04g·kg^(-1)、3.24 g·kg^(-1)组疗效较优于复方木鸡颗粒0.36 g·kg^(-1)、1.08 g·kg^(-1)组。结论本实验验证了复方木鸡颗粒对二乙基亚硝胺诱导大鼠肝炎药效作用的基础上,初步探讨量效关系,为其临床合理用药提供依据,同时也为其治疗肝病不同发展阶段(肝炎、肝硬化、肝癌)临床最佳给药剂量的差异化研究奠定实验基础。

复方木鸡颗粒检测方法研究

目的:建立复方木鸡颗粒的鉴别和含量测定方法。方法:采用薄层色谱法对制剂中的山豆根、核桃楸皮进行鉴别。用高效液相色谱法对制剂中山豆根的苦参碱进行含量测定,色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-甲醇-[磷酸盐缓冲液(pH 6.8)-三乙胺(70:0.1)](16:16:68)为流动相,流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长为220 nm,柱温:30℃。结果:薄层色谱鉴别特征斑点明显;含量测定苦参碱在0.216～2.16μg范围内线性关系良好,回归方程:Y=8.870×10~5X-1.267×10~4,r=0.9995。平均回收率为102.4%(n=9)。结论:本法准确可靠,可作为复方木鸡颗粒的质量控制方法。

复方木鸡颗粒治疗慢性乙型肝炎(湿热留恋瘀毒型)肝纤维化的临床研究

目的观察复方木鸡颗粒的抗肝纤维化作用。方法用复方木鸡颗粒治疗慢性乙型肝炎 (湿热留恋瘀毒型 )肝纤维化指标异常者 1 55者 ,与用大黄蛰虫丸治疗的 62例对照 ,疗程均为 3个月 ,治疗前后均检测患者肝纤维化相关指标 (HA、LN、PCⅢ、Ⅳ -C)、肝功能 (AIb、ALT、TBIL)并观察患者症状 ,肝、脾肿大及肝掌、蜘蛛痣等体征改善情况。结果两组患者用药 3个月后 ,症状体征改善、肝功能恢复均有明显疗效 ,两组间无显著性差异 (P >0 .0 5) ,但肝纤维化血清学指标HA、LN、PCⅢ、Ⅳ -C两组间存在显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论复方木鸡颗粒能阻止慢性乙型肝炎 (湿热留恋瘀毒型 )

满药复方木鸡颗粒研究新进展

复方木鸡颗粒是满族药,能抑制甲胎蛋白升高,在肝炎、肝硬化、肝癌治疗中被广泛应用。关于复方木鸡颗粒治疗肝病的作用机制,一直是专家学者们热议的焦点。本文综述了复方木鸡颗粒近年来药理研究新成果,揭示了其抗肝病,尤其是抗肿瘤的原理;同时还综述了临床应用中所取得的最新进展,对探索民族医药现代化进程具有重要意义。

高效液相色谱法同时测定复方木鸡颗粒中金雀花碱、苦参碱、槐果碱和槲皮苷的含量

目的建立复方木鸡颗粒中4种成分(金雀花碱、苦参碱、槐果碱和槲皮苷)含量的高效液相色谱法测定方法。方法采用Waters Xselect T3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为磷酸盐缓冲液(pH 6.8)-三乙胺(体积比70∶0.1)(A)-乙腈(B)-甲醇(C)进行梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长220 nm。结果 4种成分的分离度良好,且在各自浓度范围内呈现出良好的线性关系。金雀花碱、苦参碱、槐果碱和槲皮苷在进样质量浓度分别为2.0~32.0、9.0~144.0、5.0~80.0和4.0~64.0 mg·L-1内呈良好线性关系,相关系数r≥0.999 0,平均回收率在95.3%~103.2%,RSD为3.8%~4.8%(n=9)。含量测定结果显示,3种生物碱和槲皮苷在不同批次中的含量比较稳定。结论该法简便、准确,分离效果好,可用于复方木鸡颗粒的多成分同时测定,为复方木鸡颗粒的质量控制提供方法参考。