复方泽漆冲剂通过抑制NLRP3炎症小体活化改善咪喹莫特诱导银屑病样小鼠的作用及机制研究

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体探讨复方泽漆冲剂(泽漆、大青叶、白花蛇舌草、土茯苓等)对咪喹莫特诱导银屑病样小鼠的作用及机制。方法将56只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(阳性药组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组)及复方泽漆冲剂低、中、高剂量组,每组8只。小鼠背部脱毛区涂抹5%咪喹莫特软膏诱导银屑病样小鼠模型,连续7 d。造模同时给药干预,复方泽漆冲剂低、中、高剂量组按照9.75、19.5、29.25 g·kg^(-1)剂量灌胃给药,甲氨蝶呤组按照1 mg·kg^(-1)剂量灌胃给药,各组灌胃体积为10 mL·kg^(-1);正常组和模型组灌胃等体积生理盐水;NLRP3抑制剂组按照25 mg·kg^(-1)剂量腹腔注射MCC950;每天给药1次,连续7 d。采用PASI(Psoriasis area and severity index)评分进行银屑病模型小鼠皮损指数评价;HE染色法观察皮损组织病理变化;免疫组织化学法检测皮损组织NLRP3蛋白表达水平;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量;qRT-PCR及Western Blot法检测皮损组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠皮损显著增厚,并出现典型红斑、浸润及鳞屑,PASI评分显著升高(P<0.01);皮肤角化过度伴角化不全,棘层增厚、表皮突下延,真皮浅层淋巴细胞浸润明显,表皮厚度显著增加(P<0.01);血清IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.01);皮损组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,给药组小鼠背部造模区皮损红斑及鳞屑明显减少,浸润程度明显减轻,PASI评分显著降低(P<0.05,P<0.01),皮肤组织病理损伤程度明显减轻,血清IL-18水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),皮损组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01);复方泽漆冲剂高剂量组、甲氨蝶呤组及NLRP3抑制剂组小鼠的表皮厚度显著降低(P<0.01),血清IL-1β水平均显著降低(P<0.01)。结论复方泽漆冲剂能改善银屑病样小鼠的皮损,可能与其抑制NLRP3炎症小体的表达,降低血清炎症因子IL-1β、IL-18水平有关。

复方泽漆冲剂对不同证型寻常性银屑病患者IL-23/Th 17细胞轴的影响

目的观察复方泽漆冲剂对血热、血瘀、血燥三型寻常性银屑病(PV)患者血清中IL-17,IL-22和IL-23的影响,探讨复方泽漆冲剂对三型PV患者IL-23/Th17细胞轴的影响。方法三型PV患者均口服复方泽漆冲剂,每型患者均为20例,疗程4周,采用ELISA法对60例PV患者治疗前后和10例健康对照组的血清中IL-17,IL-22和IL-23水平进行检测。结果 60例PV患者血清中的IL-17,IL-22和IL-23的水平治疗前、后均明显高于健康对照组(P均<0.01)。三型患者治疗后的IL-17,IL-22和IL-23的水平与治疗前相比,均明显下降,(P均<0.01)。血热型治疗前、后的IL-17,IL-22和IL-23分别为23.369±2.402pg/mL,12.753±2.014pg/mL;200.694±20.087pg/mL,135.772±10.551pg/mL;23.124±1.886pg/mL,16.156±2.481pg/mL。血瘀型治疗前后的IL-17,IL-22和IL-23分别为23.456±2.142pg/mL,14.944±1.912pg/mL;200.554±19.725pg/mL、146.112±16.523pg/mL;22.562±1.768pg/mL,14.512±2.111pg/mL。血燥型治疗前后的IL-17,IL-22和IL-23分别为24.556±1.653pg/mL,16.836±2.161pg/mL;204.754±19.428pg/mL,155.702±11.489pg/mL;23.362±2.462pg/mL、12.876±2.462pg/mL。结论复方泽漆冲剂能降低三型PV患者血清中IL-17,IL-22和IL-23的水平,其中对血热型的作用最强,对血瘀型次之,对血燥型最弱。

复方泽漆冲剂治疗进行期寻常性银屑病的疗效观察及对血清TNF-α,IL-8的影响

目的观察复方泽漆冲剂治疗进行期寻常性银屑病(APV)的临床疗效。方法采用随机、平行、对照试验方法。治疗组34例服用复方泽漆冲剂,对照组18例口服阿维A胶囊,并检测治疗组治疗前后血清TNF-α,IL-8水平。结果治疗组有效率为82.35%,对照组77.78%,两组差异无显著性(P>0.05)。治疗组治疗后血清TNF-α,IL-8水平明显降低,与治疗前相比差异有显著性(P<0.05)。结论复方泽漆冲剂能明显改善进行期寻常性银屑病患者的临床症状,降低异常升高的血清TNF-α,IL-8水平。

复方泽漆冲剂对进行期寻常型银屑病患者生活质量的影响

目的观察复方泽漆冲剂对进行期寻常型银屑病患者生活质量的影响。方法将52例进行期寻常型银屑病患者,随机分为治疗组和对照组,分别于治疗前、治疗3个月后用皮肤科日常生活质量指数(derma-tology life quality index,DLQI)、银屑病皮损面积与严重程度指数(psoriasis area and severity index,PSAI)进行评价。结果治疗3个月后两组患者DLQI和PASI评分均显著改善(P<0.01);治疗组患者"瘙痒疼痛"、"衣物"及"学习工作"改善情况显著优于对照组(P<0.05,或P<0.01)。结论复方泽漆冲剂能够改善进行期寻常型银屑病患者的皮肤损害症状,提高其生活质量。

复方泽漆冲剂含药血清调控PI3K/Akt/NF-κB通路与NLRP3炎症小体缓解银屑病细胞模型损伤作用机制研究

目的探讨复方泽漆冲剂含药血清对银屑病细胞模型PI3K/Akt/NF-κB通路及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的调控作用以阐明该药对银屑病的干预机制。方法制备复方泽漆冲剂大鼠含药血清,体外以10 ng·mL^(−1)的角质形成细胞生长因子(KGF)刺激人永生化角质形成细胞系HaCaT建立银屑病细胞模型,将细胞分为对照组、模型组及复方泽漆冲剂5%、10%、20%含药血清组,CCK-8法检测不同体积分数含药血清作用于HaCaT细胞0、24、48、72 h时的细胞活力,确定复方泽漆冲剂含药血清最佳体积分数及作用时间。体外以10 ng·mL^(−1)的KGF刺激HaCaT细胞建立银屑病细胞模型,以siRNA基因沉默HaCaT细胞NLRP3,将细胞分为对照组、模型组、10%含药血清组、si-NLRP3-NC组(质粒阴性对照)、si-NLRP3组,CCK-8法检测复方泽漆冲剂含药血清对银屑病模型细胞相对活力的影响;ELISA检测含药血清干预后白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-17α、IL-23、IL-8和趋化因子配体(CXCL)1、CXCL2的分泌水平及乳酸脱氢酶(LDH)释放量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析NLRP3、半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、磷脂酰激醇激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、核因子-κB(NF-κB)的mRNA表达水平;Western blotting分析NLRP3、Caspase-1、ASC、p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、cleaved-Caspase-1、Gasdermin D(GSDMD)的蛋白表达水平;免疫荧光检测p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、ASC、Caspase-1的表达与分布。结果10%复方泽漆冲剂含药血清及作用48 h为含药血清最佳作用体积分数和时间;在KGF刺激HaCaT细胞增殖的银屑病细胞模型中,与对照组比较,IL-17α、IL-23、IL-1β、IL-8和CXCL1、CXCL2的分泌水平升高,LDH释放量显著升高;与模型组相比较,10%复方泽漆冲剂含药血清干预48 h后,银屑病细胞模型中IL-17α、IL-23、IL-1β、IL-8和CXCL1、CXCL2表达显著降低,LDH释放量显著下降;NLRP3、ASC、Caspase-1、PI3K、Akt、NF-κB的mRNA表达水平也有所降低;含药血清处理后,NLRP3、Caspase-1、ASC、p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、cleaved-Caspase-1、GSDMD的蛋白表达水平下降明显,p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、ASC、Caspase-1的表达与分布也有所减少。结论复方泽漆冲剂含药血清通过下调PI3K/Akt/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体发挥对银屑病细胞模型的干预作用。

中药内服外用治疗寻常型银屑病50例

目的:观察中药内服外用治疗寻常型银屑病的临床疗效。方法:100例患者随机均分为治疗组和对照组,两组患者均内服中药,同时分别外敷中药水煎剂和丙酸氯倍他索软膏,每日2次,疗程4周,连用2疗程。结果:治疗组基本痊愈28例,显效20例,好转2例,无效0例,有效率为100.0%;对照组基本痊愈18例,显效22例,好转6例,无效4例,有效率为92.0%,两组有效率比较有显著性差异(P<0.05)。结论:中药内服外用治疗寻常型银屑病疗效显著。