复方生地合剂对MRL/lpr狼疮小鼠TLR-NF-κB信号通路的调节作用

目的:探讨复方生地合剂对MRL/lpr狼疮小鼠Toll样受体(toll like receptors,TLRs)-核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的调节作用。方法:采用随机数字表法将MRL/lpr狼疮小鼠随机分组为模型组、中药组、西药组,另以C57BL/6小鼠作为空白组每组10只,均为12周龄雌性小鼠。中药组给予复方生地合剂灌胃治疗,西药组给予强的松悬液灌胃治疗,对照组和模型组以生理盐水灌胃治疗。8周后取外周血和脾脏分别检测外周血抗双链DNA抗体(Anti-double-stranded DNA antibody,dsDNA抗体)、干扰素-α(Interferon-α,IFN-α)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平、脾组织中TLR7/9,髓样分化因子88(myeloid differentiation primary-response gene 88,MyD88),NF-κB的基因表达以及TLR7、MyD88、NF-κB的蛋白表达。结果:模型组外周血dsDNA抗体、TNF-α和IFN-α水平高于空白组,中药组dsDNA抗体、TNF-α和IFN-α水平均低于模型组;模型组脾组织的TLR7、TLR9、MyD88和NF-κB的mRNA和蛋白表达都高于空白组mRNA和蛋白表达水平;中药组脾组织TLR7、TLR9、MyD88和NF-κB的mRNA以及TLR7、MyD88和NF-κB p65的蛋白表达水平都低于模型组mRNA和蛋白表达水。结论:复方生地合剂可以降低MRL/lpr狼疮小鼠外周血dsDNA水平,可能通过下调MRL/lpr狼疮小鼠TLR-MyD88-NF-κB通路发挥作用。

高效液相色谱法测定复方生地合剂中绿原酸的含量

目的：建立复方生地合剂中绿原酸含量测定的高效液相色谱法。方法色谱柱（250 mm±4.6 mm，5μm），流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（10：90），流速1 mL·min-1，柱温30℃，检测波长327 nm。结果绿原酸在0.0624-4.68μg范围内线性关系良好。R=0.9999，平均回收率为100.7%，RSD=1.7%（n=6）。结论该方法操作简便，重复性高，可用于复方生地合剂的质量控制。

复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮(阴虚内热型)的疗效及安全性评价

目的:研究复方生地合剂在治疗阴虚内热型系统性红斑狼疮中增效减毒、撤减激素用量和改善症状等方面的优势。方法:将60例阴虚内热型系统性红斑狼疮患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。均以中、小剂量糖质激素及羟氯喹治疗作为基础用药,治疗组加用复方生地合剂(生地黄30 g、生石膏30 g、忍冬藤30 g),对照组加用安慰剂(淮山药、焦糖)。治疗3个月,比较2组相关指标变化情况。结果:治疗3个月后,治疗组总有效率为83.33%,显著高于对照组的50.00%(P﹤0.05);治疗组中医证候积分、SLE-DAI积分均较治疗前改善(P﹤0.05或P﹤0.01),且治疗组优于对照组(P﹤0.05);治疗组激素用量较治疗前明显减少(P﹤0.05);治疗组抗ds-DNA抗体较治疗前降低(P﹤0.05),对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P﹥0.05),且治疗后2组比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。治疗组不良反应事件发生率明显低于对照组(P﹤0.05)。结论:复方生地合剂治疗阴虚内热型系统性红斑狼疮疗效明显,可显著降低中医证候积分、SLE-DAI积分,且安全性良好,能显著减少西药的毒副反应及并发症;更利于患者激素的撤减。

复方生地合剂联合西药治疗系统性红斑狼疮阴虚内热型33例临床观察

目的评价复方生地合剂联合西药治疗系统性红斑狼疮（SLE）阴虚内热型的临床疗效。方法将66例SLE阴虚内热型患者随机分为治疗组与对照组各33例,两组均给予醋酸泼尼松片0.2~1 mg/（kg·d）,硫酸羟基氯喹片每次0.1 g,每日2次,口服;治疗组在此基础上给予复方生地合剂每次30 ml,每日3次口服,两组均治疗3个月。比较两组患者临床疗效,并观察治疗前后两组患者系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLE-DAI）、中医证候积分、相关免疫指标[免疫球蛋白G（Ig G）、补体C3、补体C4与抗双链DNA（抗ds-DNA）]、24 h尿蛋白定量及激素日用量。结果治疗组临床疗效总有效率83.33%,对照组为60.00%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后两组中医证候积分、SLE-DAI、Ig G及抗ds-DNA、激素日用量及治疗组24 h尿蛋白定量均较治疗前明显降低,而补体C3升高（P〈0.05或P〈0.01）;两组治疗后比较,治疗组Ig G、激素日用量均低于对照组（P〈0.05）。结论复方生地合剂联合西药治疗SLE阴虚内热型疗效确切,且能减少患者激素日用量。

复方生地合剂对MRL/lpr小鼠脾脏组织Th17/Treg平衡的影响

目的探讨复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮(SLE)的可能作用机制。方法将30只MRL/lpr小鼠(狼疮模型鼠)随机分组为模型组、复方生地合剂组、强的松组,每组10只,另以10只C57BL/6小鼠为空白组。复方生地合剂组给予浓度为2.8g/ml的复方生地合剂人临床等效剂量18.495ml/(kg·d)灌胃,强的松组给予浓度为1.23g/ml强的松片混悬液10ml/(kg·d)灌胃,模型组和空白组给予生理盐水10ml/(kg·d)灌胃,各组均每日1次。连续灌胃8周后检测血清白细胞介素17A(IL-17A)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平,检测脾脏淋巴细胞中辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平和脾脏组织维甲酸相关孤核受体(RORγt)和叉头状转录因子p3(Foxp3) mRNA表达。试验期间观察各组小鼠死亡情况。结果复方生地合剂组死亡2只,强的松组死亡1只,模型组死亡3只,空白组无死亡。与空白组比较,模型组小鼠血清IL-17A水平、脾脏组织RORγt mRNA表达升高,脾脏淋巴细胞Th17/CD4^+、Th17/Treg值亦升高,血清TGF-β1水平、脾脏组织Foxp3 mRNA表达、Treg/CD4^+值降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,复方生地合剂组和强的松组小鼠血清IL-17A水平、RORγt mRNA表达、Th17/CD4^+、Th17/Treg值降低,血清TGF-β1水平、Treg/CD4^+值升高(P<0.05或P<0.01)。复方生地合剂组和强的松组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方生地合剂可以改善脾脏组织Th17/Treg平衡,可能是其治疗SLE的作用机制之一。

复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮(阴虚内热型)的有效性与安全性评价

目的:评价复方生地合剂治疗阴虚内热型系统性红斑狼疮(SLE)的临床疗效及其安全性。方法:选择阴虚内热型SLE患者65例,随机分为治疗组31例和对照组34例。两组均以糖皮质激素作为基础用药,治疗组给予复方生地合剂,对照组给予硫酸羟基氯喹治疗,疗程12周。观察两组的临床疗效、系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)、免疫学指标及安全性指标。结果:治疗后,治疗组和对照组的总有效率分别为60.0%和56.7%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的SLEDAI、抗ds-DNA水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗过程中,治疗组和对照组的不良反应事件发生率分别为10.0%和34.3%,治疗组明显低于对照组(P<0.05)。结论:复方生地合剂对SLE有一定的免疫抑制作用,且能降低SLE的活动度,毒副反应较少。

复方生地合剂从TLR-NF-κB通路调节MRL/lpr小鼠Th17/Treg平衡

目的:探讨复方生地合剂从TLR-NF-κB信号通路调节MRL/lpr小鼠Th17/Treg细胞平衡的作用。方法:将MRL/lpr狼疮模型小鼠从随机分为模型组、中药组、西药组,每组10只。中药组给予复方生地合剂灌胃治疗,西药组给予强的松灌胃治疗,模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃治疗,干预8周。采用酶联免疫方法检测外周血细胞因子IL-17、TGF-β、IFN-α和TNF-α的水平,采用流式细胞术检测Th17细胞和Treg细胞水平,采用定量聚合酶链反应测定脾组织中TLR7、TLR9、MyD88、NF-κB、RORγt和Foxp3 mRNA表达。结果:两给药组脾组织TLR7、TLR9、MyD88、NF-κB、RORγt mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05,P<0.01),西药组脾组织Foxp3 mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。中药组TNF-α、IFN-α、IL-17A水平均低于模型组(P<0.05),TGF-β1水平高于模型组(P<0.05)。西药组IFN-α、IL-17A水平均低于模型组(P<0.05,P<0.01),TGF-β1水平高于模型组(P<0.05)。两给药组Th17细胞/CD_4^+T细胞比例低于模型组(P<0.05,P<0.01),Treg细胞/CD_4^+T细胞比例高于模型组(P<0.05),Th17细胞/Treg细胞比例均显著低于模型组(P<0.01)。结论:复方生地合剂可能通过抑制MRL/lpr小鼠TLR-NF-κB通路信号传导调节Th17/Treg细胞平衡。

基于网络药理学探索复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮的作用机制

目的:利用网络药理学研究复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮的关键靶标和潜在分子机制。方法:通过中国科学院化学数据库和文献搜索构建药材化合物成分数据库,以分子类药性DL、口服生物利用度OB、Lipinski规则和Veber规则筛选活性化合物,并以TCMSP和STITCH数据库预测活性成分靶点,GeneCards、TTD数据库获取系统性红斑狼疮相关靶点,两者相互映射得到复方生地合剂作用系统性红斑狼疮的交集靶点,STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,DAVID数据库进行GO和KEGG分析,Cytoscape 3.7.1软件构建成分-靶点-通路网络,分析主要通路。结果:经筛选共获得复方生地合剂20个活性成分,对应285个靶点,46个为交集靶点,复方生地合剂的潜在活性成分为槲皮素、木犀草素等12个化合物,治疗关键靶点有肿瘤坏死因子、白介素6、白介素2等,主要作用于6条通路。结论:复方生地合剂可能通过细胞因子-细胞因子受体相互作用、丝裂原活化蛋白激酶信号通路等途径和基因表达、炎症反应、RNA聚合酶II启动子转录的正调控等生物过程发挥作用。