复方羟氯扎胺混悬液对牦牛肝片吸虫和线虫的临床药效试验

旨在通过复方羟氯扎胺混悬液对牦牛的驱虫试验,评价药物的临床药效,为临床使用提供参考依据。75头牦牛随机分成5组,每组15头,分别为复方羟氯扎胺混悬液低剂量(0.125 mL·kg^(-1))、中剂量(0.250 mL·kg^(-1))、高剂量(0.500 mL·kg^(-1))、对照药(0.250 mL·kg^(-1))和空白对照组。试验周期28 d,采集第1天和给药后第7、14、21、28天粪便,测定肝片吸虫和消化道线虫在每克粪便中的虫卵数(eggs per gram,EPG),计算精计驱虫率和虫卵转阴率,并测定给药前和第28天血常规、血生化指标。结果显示:复方羟氯扎胺混悬液低、中、高剂量对牦牛肝片吸虫的精计驱虫率分别为97.5%、100.0%、100.0%,虫卵转阴率分别为80%、100%、100%。对照药对牦牛肝片吸虫的精计驱虫率是99.4%,虫卵转阴率是93.3%。复方羟氯扎胺混悬液低、中、高剂量对牦牛消化道线虫的精计驱虫率是99.2%、100.0%、100.0%,虫卵转阴率分别为80%、100%、100%,对照药对牦牛消化道线虫的精计驱虫率是99.9%,虫卵转阴率是93.3%。本试验结果表明,复方羟氯扎胺混悬液对牦牛肝片吸虫和消化道线虫均有显著的驱杀作用,其中高、中剂量组的临床效果无显著差异,因此临床应用推荐剂量为中剂量组0.250 mL·kg^(-1)。

羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中苯甲酸钠含量的HPLC测定

建立高效液相色谱法(HPLC)测定羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中防腐剂苯甲酸钠的含量。采用Agilent ZORBAX C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵水溶液∶甲醇=85∶15,流速为1.0 mL/min,检测波长为224 nm,进样量为10μL,柱温为35℃。苯甲酸钠浓度在2.5μg/mL~25.0μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(R^(2)=1),平均回收率为95.90%,RSD为0.69%(n=9),苯甲酸钠的检测限为0.25μg/mL。结果表明,所建立的HPLC法操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中防腐剂苯甲酸钠含量的测定。

羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中焦亚硫酸钠含量测定

为建立羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抗氧化剂焦亚硫酸钠含量测定方法,利用二氧化硫在醋酸盐缓冲液存在的酸性条件下可使酸性品红溶液褪色的原理,采用比色法在547 nm波长处测定吸光度,以标准曲线计算抗氧化剂的含量。结果显示,无水亚硫酸钠质量浓度在20~120μg/mL,吸光度的倒数与其质量浓度呈良好的线性关系y=0.0097x+1.3857(R^(2)=0.9971),平均回收率为98.32%,RSD为0.9573%。结果表明,该方法可用于羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抗氧化剂焦亚硫酸钠含量的测定。

羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂的添加剂量筛选及抑菌效力评价

为了筛选羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂的最适添加浓度,并对其进行抑菌效力评价,本试验依据2020版《中华人民共和国兽药典(二部)》抑菌效力检查法,通过对含不同浓度抑菌剂的羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的抑菌效果进行考察,筛选出最合适的抑菌剂添加浓度,并根据抑菌效力评价标准,评价混悬液是否满足抑菌要求,进而验证最佳抑菌剂添加剂量。结果显示,与不添加抑菌剂的羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液相比,在混悬液中添加0.020%的苯甲酸钠可以对5种微生物的生长产生良好的抑制作用,且为最低有效添加剂量,能达到“内服制剂、直肠给药制剂的抑菌效力判断标准”。结果表明,羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂苯甲酸钠的最佳添加剂量为0.020%。

羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液微生物限度检查方法的研究

建立并验证羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的微生物限度检查方法和控制菌检查方法。参考2015年版《中华人民共和国兽药典》四部通则进行微生物限度检查方法适用性试验,分别考察采用常规法、中和法以及联合稀释法对消除羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌成分的抑菌效果,比较不同方法对试验菌株的回收率。结果发现中和法联合稀释法可以较好地消除羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中的抑菌活性,最终选择采用中和法联合稀释法对本品进行需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数检测,各试验菌株的回收率均在0.5%~2.0%之间,符合《中华人民共和国药典》规定;采用中和法联合增菌常规法进行控制菌检查,阳性对照组中菌落生长良好,阴性试验组中均无细菌生长,符合《中华人民共和国药典》规定。说明所建立的微生物限度检查方法(中和法联合稀释法)准确可行,适用于羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液微生物限度检查。