复方肝毒清对乙型肝炎病毒的体内外抑制作用

【目的】观察复方肝毒清的体内外抗乙肝病毒作用。【方法】体内实验采用先天感染鸭乙肝模型,检测用药前后鸭血清乙肝病毒脱氧核糖核酸(DHBV DNA)的动态变化;体外实验采用2.2.15细胞为模型,检测用药后复方肝毒清对细胞培养上清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)的抑制作用。【结果】体内实验:给药第10天时血清DHBVDNA滴度显著下降(与模型组比较P<0.01).而停药第3天后又有回升,但仍低于模型组(P<0.01);体外实验:复方肝毒清对细胞分泌HBsAg的治疗指数(50％毒性浓度:50％抑制浓度)为66.81,对分泌HBeAg的治疗指数为34.18。【结论】复方肝毒清在体内外均具有抗乙肝病毒作用。

复方肝毒清对免疫性肝损伤模型小鼠的保护作用

[目的]观察复方肝毒清对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠肝损伤的保护作用。[方法]昆明种小鼠60只,随机分为空白对照组,模型对照组,肝毒清高、中、低剂量组(20、10、5g/kg),联苯双酯组(150mg/kg);除空白对照组外,所有小鼠2次尾静脉注射ConA(20mg/kg)复制肝损伤模型,各组均按设计剂量灌胃给药,空白对照组和模型对照组给予等容积生理盐水,共给药3次;取血清检测谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),取肝组织检测TNF-αmRNA表达,并进行肝组织病理学检查。[结果]肝毒清高、中、低剂量组均能降低血清ALT、TNF-α水平,抑制肝组织TNF-αmRNA表达,与模型对照组比较具有显著性差异(均P<0.01),并能一定程度改善肝组织病理变化。[结论]复方肝毒清对ConA所致小鼠肝损伤具有一定的保护作用。

复方肝毒清对铁超载肝星状细胞活化和凋亡的影响

【目的】观察复方肝毒清对铁超载肝星状细胞(HSC)活化和凋亡的影响。【方法】体外培养HSC-T6细胞,分为正常对照组、模型组、中药组(给药浓度为0.08 g/L)。以柠檬酸铁胺(FAC)与HSC-T6细胞共同温育,建立HSC铁超载模型。采用免疫组化法检测HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,半定量聚合酶链反应(PCR)法检测细胞转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达,TUNEL法检测HSC-T6细胞的凋亡,电镜观察HSC-T6细胞超微结构。【结果】正常对照组和模型组HSC-T6细胞α-SMA大量表达,未见或仅见有较少细胞发生凋亡,而中药组HSC细胞α-SMA表达明显减少,TGF-β1 mRNA表达显著降低(P<0.05),且出现明显细胞凋亡。【结论】中药复方肝毒清可能通过调节细胞铁的代谢,抑制HSC活化并诱导其发生凋亡,从而在体外发挥抗肝纤维化作用。

复方肝毒清对急性肝损伤小鼠的护肝作用

目的:探索复方肝毒清对四氯化碳(CCl_(4))引起的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将60只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯对照组和复方肝毒清高、中、低剂量组。除正常组外,其他各组采用腹腔注射0.4%的CCl_(4)橄榄油溶液的方法建立小鼠肝损伤的模型。不同阶段进行灌胃给药复方肝毒清,而后在实验中采用眼球摘除的方法取血,进一步获取血清。通过肝解剖进行外观观察,对血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性进行检测,及对肝脏中的Fas、白细胞介素-6 (IL-6) mRNA含量进行测定,显微镜观察肝组织病理变化。结果:与正常组比较,模型组血清ALT、AST水平均上调(P<0.01),证明模型复制完成。与模型组比较,联苯双脂对照组、复方肝毒清各剂量组血清ALT、AST活性均降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠肝脏组织Fas、IL-6 mRNA的表达上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,联苯双脂对照组、复方肝毒清各剂量组肝脏Fas、IL-6 mRNA值均降低(P<0.01)。病理切片观察也表明复方肝毒清能明显改善肝损伤。结论:复方肝毒清对CCl_(4)导致的小鼠急性肝损伤有显著的保护作用,其中具体的作用机制可能与降低相关炎症因子的表达有关。

复方肝毒清对二甲基亚硝胺诱导小鼠肝损伤模型的保护作用

[目的]探讨复方肝毒清对二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导小鼠肝损伤模型的保护作用。[方法]将60只小鼠随机分为空白对照组、模型组、联苯双酯组及复方肝毒清高、中、低剂量组。空白对照组予0.85%氯化钠10 ml/kg灌胃,其他各组以15 mg/kg DMN腹腔注射建立小鼠肝损伤模型,同时后4组分别按150mg/kg联苯双酯滴丸和20、10、5 g/kg复方肝毒清灌胃,每12 h给药1次,共4次。赖氏法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、清蛋白水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;定量PCR法检测肝组织TNF-α、IL-1βmRNA的表达。[结果]复方肝毒清不仅能够显著改善肝功能和肝组织病理,而且能明显降低血清TNF-α、IL-1β水平和肝组织TNF-α、IL-1βmRNA的表达。[结论]复方肝毒清可能是通过减少炎症细胞因子的分泌而达到保护肝脏的作用。

肝毒清复方对BCG/LPS所致小鼠免疫性肝损伤免疫功能的影响

目的 :探讨肝毒清复方对BCG/LPS所致免疫性肝损伤小鼠脾T、B淋巴细胞增殖能力及脂质过氧化反应的影响 ,探讨该方的作用机制。方法 :制备BCG/LPS所致免疫性肝损伤模型 ,用MTT比色法测定脾T、B淋巴细胞增殖能力 ;用TBA (硫代巴比妥酸 )法测定SOD活性和MDA含量。结果 :各用药组均能提升脾T、B淋巴细胞增殖能力、增强SOD活性、降低MDA含量 ,与模型组比较有显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1 )。结论 :肝毒清复方抗肝损伤与调节T、B淋巴细胞增殖能力。