基于网络药理学的茯苓甘草汤治疗腹水的作用机制研究

为进一步研究茯苓甘草汤有效成分和探讨其作用机制,分别利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和Genecards数据库筛选茯苓甘草汤的活性成分作用靶点和腹水的疾病靶点,将两者靶点取交集后利用Cytoscape软件构建“成分靶点”网络;采用String数据库构建PPI网络,拓扑分析获取关键靶点和成分;通过David数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;最后通过分子对接技术进一步佐证研究的可靠性。结果显示,茯苓甘草汤中活性成分共117种,可干预腹水相关靶点252个,GO富集519个,KEGG通路108条;其中,槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇等可能为茯苓甘草汤治疗腹水的关键成分,PTGS2、ESR1、AR、BCL2、JUN等为潜在靶点;GO富集分析的生物功能涉及到凋亡负调节、细胞增殖、炎症反应等,KEGG通路富集分析涉及到TNF、PI3K-Akt、FoxO、HIF-1等信号通路;超过90%的分子对接结果都具有一定的结合活性。

基于网络药理学和分子对接探讨桂枝茯苓丸合芍药甘草汤治疗糖尿病周围神经病变作用机制

目的:运用网络药理学和分子对接探讨桂枝茯苓丸合芍药甘草汤治疗糖尿病周围神经病变(Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、DrugBank、UniProt、GeneCards、OMIM、TTD数据库预测和筛选出活性成分和靶点。运用Metascape进行基因本体论(Gene Ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。运用String 11.0和Cytoscape 3.7.2构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction,PPI)网络和活性成分-靶点网络图,并进行分子对接验证。结果:筛选得到桂枝茯苓丸合芍药甘草汤治疗DPN的活性成分123 个、靶点149 个、通路96 个。其可能主要通过槲皮素、山奈酚、和黄芩素等13 个核心成分作用于信号传导蛋白和转录激活物(STAT3)、AP-1 转录因子(JUN)、丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、肿瘤抑制蛋白(TP53)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等7 个核心靶点,从而调控晚期糖基化终末产物- 糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、磷脂酰肌醇3 激酶- 蛋白激酶B(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等关键通路,从而发挥治疗的作用。结论:桂枝茯苓丸合芍药甘草汤通过多成分、多靶点、多通路实现干预DPN 治疗的作用,为进一步的临床和实验研究提供了新思路。

复方茯苓甘草汤对肺动脉高压大鼠肺动脉转化生长因子β_1表达的影响

【目的】观察复方茯苓甘草汤对肺动脉高压(PAH)大鼠肺动脉转化生长因子-β1(TGFβ-1)表达的影响,以探讨该方防治肺动脉高压、肺血管重构的作用机理。【方法】选用30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、复方茯苓甘草汤治疗组(中药组,剂量为5.46.gkg-1.d-1);腹腔内一次性注射野百合碱(剂量为50 mg/kg)造模,采用右心导管法检测大鼠平均肺动脉压(pmPA);计算右心肥厚指数(p右心肥厚);采用病理图像分析系统计量肺小动脉形态学指标,免疫组化法观察肺动脉中TGFβ-1的表达。【结果】模型组大鼠pmPA、p右心肥厚显著升高,肌型动脉及部分肌型动脉比例增多,肌型动脉中膜面积与管腔面积比值(AM/AL)增大,肺动脉TGFβ-1表达明显增多;复方茯苓甘草汤组上述各指标均有显著改善。【结论】复方茯苓甘草汤可有效降低肺动脉压、改善肺血管重构,其机理可能与抑制肺动脉TGFβ-1的表达有关。

复方茯苓甘草汤水煎液的毒理学实验研究

目的:研究复方茯苓甘草汤的毒理作用,以保证临床用药的安全性,并为Ⅲ期用药实验提供理论依据,为该方的成药投产奠定物质及理论基础。方法:①急性毒性实验:以最大给药剂量的复方茯苓甘草汤药液予大鼠1 d内灌胃给药5次后,连续观察14 d。②长期毒性实验:大鼠80只随机分为高、中、低3个剂量组和空白组,口服给药,连续4周,停药后24 h内和14 d后,每组分别取一半大鼠进行血液学测定及病理学检查。结果:急性毒性实验测得复方茯苓甘草汤的最大耐受量为720 g·kg^(-1)(生药量),相当于成年人临床每日口服剂量的100倍;长期毒性实验表明,3个剂量组血液学检查、肝肾功能测定、主要脏器系数等各项指标与空白组比较均无显著差异,主要脏器病理检查未见异常。结论:复方茯苓甘草汤临床剂量口服安全,无蓄积毒性。

复方茯苓甘草汤防治慢性常压低氧性肺动脉高压的有效成分筛选实验研究

目的:通过实验来筛选出复方茯苓甘草汤防治慢性肺动脉高压(PAH)的有效成分。方法:采用正交试验法,以平均肺动脉压、右心指数和肺血管形态学的改变为指标,进行整体动物的药效学试验,观察各分离成分对PAH的防治作用。结果:可认为60%液与95%液能使大鼠模型mPAP、RV/(LV+S)、MA(%)、PMA(%)和MA/LA降低,NMA(%)则升高;而蒸洗液与30%液不能起效。尚不能认为蒸洗液、30%液、60%液、95%液这4种提取液之间的一级交互作用和二级交互作用对大鼠模型上述指标有影响。结论:筛选出60%液、95%液这两个有效部位(群)/有效成分(群)作为复方茯苓甘草汤防治常压缺氧性PAH大鼠模型的主要物质基础。

复方茯苓甘草汤对慢性低氧大鼠肺内细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究复方茯苓甘草汤对慢性低氧大鼠肺内p53及PCNA蛋白表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为对照组(A组,各组n=10),低氧组(B组)和低氧+复方茯苓甘草汤治疗组(C组)。采用常压间断低氧8h/d,连续21天的方法复制慢性低氧性肺动脉高压模型。观察复方茯苓甘草汤对慢性低氧大鼠肺血管形态学指标、p53及PCNA基因蛋白表达、细胞的增殖与凋亡的影响。结果:①低氧21天后,B组MT%、MA%、PI及p53基因表达较A组均明显升高(P<0.01),VA%、AI较A组明显降低(P<0.01);②C组MT%、MA%、PI及p53基因表达与B组相比明显降低,差别有显著意义(P<0.01或P<0.05)。VA%、AI与B组相比明显升高,差别有显著意义(P<0.01);C组除VA%、AI及p53基因表达与A组比差别有意义(P>0.05)外,其它指标与A组比较差别均无意义(P<0.01或P<0.05)。结论:复方茯苓甘草汤可抑制肺血管重建,其机理可能与抑制p53及PCNA基因的表达,导致细胞增殖被抑制、细胞凋亡被促进等有关。

复方茯苓甘草汤对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管构型重建的影响

目的 :从肺血管构型重建角度研究复方茯苓甘草汤对低氧性肺动脉高压 (HPH)的防治作用。方法 :采用间断常压缺氧法制备慢性HPH大鼠模型 ,右心导管法测量平均肺动脉压 (mPAP) ,应用光镜、半自动图像分析系统研究缺氧 2 1天后大鼠肺小血管病理变化及复方茯苓甘草汤的防治作用。结果 :低氧 2 1天后大鼠mPAP、右心肥大指数、肺中小型动脉相对中膜厚度、相对中膜面积、肺小血管肌型和部分肌型动脉百分比均高于正常组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;非肌型动脉百分比低于正常组 (P <0 .0 5 ) ;复方茯苓甘草汤可有效逆转上述改变。结论 :复方茯苓甘草汤的应用有望成为治疗HPH的有效措施 ,其机理与逆转肺血管的构型重建有关。

复方茯苓甘草汤对低氧大鼠肺血管构型重建的影响

目的 :从肺血管构型重建角度研究复方茯苓甘草汤对低氧性肺动脉高压 (HPH)的防治作用。方法 :采用间断常压氧法制备慢性HPH大鼠模型 ,右心导管法测量平均肺动脉压 (mPAP) ,应用光镜、免疫组化及半自动图像分析系统研究缺氧 2 1天后大鼠肺小血管病理变化及复方茯苓甘草汤的防治作用。结果 :低氧 2 1天后大鼠mPAP、右心肥大指数、肺中小型动脉相对中膜厚度、相对中膜面积、肺小血管肌型和部分肌型动脉百分比均高于正常组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5) ;非肌型动脉百分比低于正常组 (P <0 .0 5) ;复方茯苓甘草汤可有效逆转上述改变。结论 :复方茯苓甘草汤的应用有望成为治疗HPH的有效措施 ,其机理与逆转肺血管的构型重建有关。

复方茯苓甘草汤对低氧大鼠磷脂酶A_2活性及其炎症介质的影响

低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstruc-five pulmonary disease,COPD)发展过程中的特征性表现之一,实验通过建立HPH大鼠动物模型,研究复方茯苓甘草汤对磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)及其炎症介质血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)的影响,以探讨其作用机制。目的:从磷脂酶A2(PLA2)活性及其相关炎症介质途径研究复方茯苓甘草汤防治常压慢性低氧性肺动脉高压的作用机理。方法:30只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、单纯缺氧组和低氧加复方茯苓甘草汤治疗组。右心导管法测定大鼠肺动脉压(mPAP),计算右心肥大指数,微量滴定法检测血浆、肺匀浆和支气管肺泡灌洗液(BALF)中PLA2活性,放射免疫分析法检测血浆及BALF中血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1α)活性。结果:连续低氧3周后大鼠mPAP、右心肥大指数、血浆、肺匀浆及BALF中PLA2活性、TXB2、6-keto-PGF1α含量显著增加,6-keto-PGF1α活性下降。复方茯苓甘草汤可有效逆转上述改变。结论:复方茯苓甘草汤可通过抑制PLA2及其炎症介质途径起到防治低氧性肺动脉高压的作用。

复方甘草酸苷注射液联合中药土茯苓汤治疗急性银屑病的疗效观察

银屑病是一种常见的慢性、复发性、炎症性皮肤病,是临床中常见的无传染性皮肤病,典型皮损为鳞屑性红斑。银屑病近几年发病率较高,患者多为青壮年,对于初得银屑病患者应做到合理用药,否则病情迁延难愈。笔者在临床工作中采用复方甘草酸苷注射液结合中药土茯苓汤加味治疗急性银屑病,收到良好疗效,现报告如下。

复方茯苓甘草汤防治慢性常压低氧性肺动脉高压的有效成分实验研究

目的:通过实验来寻找并验证复方茯苓甘草汤防治慢性肺动脉高压(PAH)的有效部分。方法:采用完全随机设计方法,以平均肺动脉压、肺血管形态学和右心指数的改变为指标,进行整体动物的药效学试验,观察各分离成分对PAH的防治作用。结果:60%液与95%液能使大鼠模型mPAP、RV/(LV+S)、wW/BW、MA(%)、PMA(%)和MA/LA降低,NMA(%)则升高;疗效接近复方茯苓甘草汤原方。结论:确定60%液、95%液这2个有效部位(群)或有效成分(群),是复方茯苓甘草汤防治常压缺氧性PAH大鼠模型的主要物质基础。

复方茯苓甘草汤对低氧大鼠肺功能影响的探讨研究

【目的】观察复方茯苓甘草汤对低氧大鼠肺功能的影响。【方法】将清洁级SD大鼠40只随机分为正常对照组、单纯缺氧组和低氧加复方茯苓甘草汤治疗组，分低剂量与高剂量两组，采用熏香烟、给与气道内多次灌胃3周，检测肺功能，观察复方茯苓甘草汤对低氧大鼠肺功能影响。光镜下观察各组大鼠肺组织病理形态学变化并测量肺组织小气道管壁厚度；采用免疫组织化学法并结合图像分析技术测定大鼠肺组织。【结果】与对照组比较，复方茯苓甘草汤治疗组大鼠小气道管壁厚度及支气管肺组织有明显改变（P〈0．05）；模型组大鼠气道和肺组织出现慢性炎症改变和结构破坏，复方茯苓甘草汤高剂量组对上述病理变化有明显改善作用。【结论】复方茯苓甘草汤能使低氧大鼠的肺功能在一定程度上改善。

茯苓甘草汤治疗肺动脉高压机制探讨

目的:该文通过网络药理学方法研究茯苓甘草汤治疗肺动脉高压(PH)的作用机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)中寻找并筛选与茯苓甘草汤的化学成分和作用靶点,通过数据库筛选肺动脉高压相关的靶点,获得化合物-疾病共同作用靶基因,进而构建“药物-化合物-靶点”相互作用网络图和蛋白质互作网络图并进行拓扑分析;对核心靶点进行GO分析,利用KEGG数据库对核心靶点进行相关通路富集,并构建“靶点-通路”网络。将“药材-化合物-靶点”网络中排名前15的成分与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)进行分子对接。结果:该文筛选出茯苓甘草汤119个活性成分和90个相应靶点;通过网络拓扑特征评价筛选出与茯苓甘草汤在肺动脉高压方面作用核心靶点11个,如EGFR、CTNNB1、UBC等。GO功能富集分析得到GO条目1419个(P≤0.05),其中生物过程(BP)条目1251个,细胞组成(CC)条目55个,分子功能(MF)条目113个。KEGG通路富集筛选得到119条信号通路(P≤0.05)。分子对接结果显示shinpterocarpin、7-Methoxy-2-methyl isoflavone、3’-Methoxyglabridin、β-sitosterol、Licoagrocarpin等核心活性化合物与VCAM-1和ICAM-1的亲和力较好。结论:通过网络药理学证实了茯苓甘草汤多靶点、多成分、整体调节的作用特点,预测了茯苓甘草汤治疗肺动脉高压的主要可能作用机制,验证了网络药理学的预测结果,综合阐释了其抗PH的作用机制,为今后的分子生物学实验奠定了理论基础。

茯苓杏仁甘草汤与橘枳姜汤“同病异治”冠状动脉粥样硬化性心脏病

目的:基于网络药理学方法探讨茯苓杏仁甘草汤与橘枳姜汤治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)的作用靶点及可能作用机制。方法:利用TCMSP、DrugBank数据库,采用口服生物利用度和药物相似性筛选获取茯苓杏仁甘草汤与橘枳姜汤的成分和靶点,通过CTD、DrugBank数据库筛选抗冠心病相关的蛋白,构建成分-靶点网络图,用DAVID数据库对基因富集分析,通过KEGG通路分析结果,获得参与相关通路的候选基因及功能。结果:目前,茯苓杏仁甘草汤与橘枳姜汤的化学成分分别为186、163个;茯苓杏仁甘草汤与橘枳姜汤共有270个潜在靶点,其中256个潜在靶点与冠心病相关;成分-靶点网络图显示两方可能通过CHRM2、PTGS2、SLC6A2、CHRM1与PTGS1等关键基因,经由神经信号传递通路、cGMP-PKG信号通路、钙离子信号通道、血清素神经突触和甲状腺激素信号通路等干预冠心病的进程。茯苓杏仁甘草汤调节NOS2、PTGS2、F2、ABAT与PLA2G2E基因及Mapk信号通路和Egf信号通路等通路发挥特有的干预冠心病基础;F12、CHRM5、SELE、OPRD1与HAS2基因及抗生素的生物合成、脯氨酸代谢等通路的调控为橘枳姜汤特有的治疗冠心病机制。结论:茯苓杏仁甘草汤及橘枳姜汤药物之间存在相同及不同的化学成分及靶点效应干预冠心病,通过分析成分、靶点及通路的相互关系分析"同病异治"的科学内涵。