复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后MRP2和RXRα表达的影响

目的:观察HepG2细胞中核因子κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、早期生长反应因子(Egr-1)基因沉默后复方茵丹汤对多药耐药相关蛋白2(MRP2)和人维甲酸X受体α(RXRα)表达的影响。方法:运用RT-PCR和Western blot检测复方茵丹汤对HepG2细胞中NF-κB、ICAM-1、Egr-1沉默与否,对NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα基因和蛋白水平的影响。结果:与空白对照组比较,复方茵丹汤组和UDCA组NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白水平明显降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα基因和蛋白水平明显升高(P<0.01,P<0.05),复方茵丹汤对HepG2细胞NF-κB、ICAM-1、Egr-1、MRP2和RXRα表达的诱导作用明显强于UDCA组(P<0.01,P<0.05)。对各组进行NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因沉默后,与正常培养的HepG2细胞比较,转染siRNANF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1的细胞,其NF-κB、ICAM-1、Egr-1的基因和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。与siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染组比较,siRNA-NF-κB、siRNA-ICAM-1和siRNA-Egr-1转染+复方茵丹汤组的NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.05),MRP2和RXRα的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:复方茵丹汤在体外可通过下调NF-κB、ICAM-1、Egr-1基因和蛋白的表达来上调MRP2和RXRα基因和蛋白的水平。

基于网络药理学探讨复方茵丹汤治疗淤胆型肝炎的作用机制

目的:通过中药复方网络药理学对复方茵丹汤治疗淤胆型肝炎的作用机制进行系统分析。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)筛选复方茵丹汤中有效活性成分及其作用靶点;运用OMIM数据库以及GeneCards数据库获取淤胆型肝炎疾病相关靶点;将药物与疾病靶点取交集,获得潜在靶点;通过DisGenet数据库分析潜在靶点的蛋白类型;运用Cytoscape软件构建中药复方调控网络;通过STRING数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并带入Cytoscape软件进行拓扑分析;采用R软件进行潜在靶点的基因本体(GO)富集分析以及富京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:复方茵丹汤中有效活性成分所对应的靶点与淤胆型肝炎靶点取交集,共获得了83个潜在靶点;通过复方调控网络构建,预测茵陈、大黄、栀子等药物可能通过NOS2、ESR1、DPP4等靶点对淤胆型肝炎的治疗起到一定作用;通过PPI网络及拓扑分析,获得白细胞介素6、蛋白激酶、血管内皮生长因子A等11个核心靶点,可能在复方茵丹汤治疗淤胆型肝炎中起主要作用;通过GO富集分析结果,预测潜在靶点在淤胆型肝炎的肝脏损伤、炎症反应、细胞代谢功能以及免疫功能中发挥作用;通过KEGG富集分析结果,预测Thl7细胞分化通路、HIF-1信号通路可调节机体的代谢应激,抑制炎症介质。结论:复方茵丹汤对淤胆型肝炎的作用机制可能与其109个有效活性成分、11个核心靶点以及Thl7细胞分化、HIF-1等信号通路有关。

复方茵丹汤对急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织早期生长反应因子-1和细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究复方茵丹汤对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthalene isothiocyanate,ANIT)诱导的大鼠急性肝内胆汁淤积作用机制。方法将108只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,模型组,中药高、中、低剂量组和阳性药对照组,每组18只,依据取材时间不同又将各组随机分为24、48、72 h 3个亚组,每组6只。模型组、中药组、阳性药对照组大鼠一次性给予2%ANIT按100 mg/(kg·d)灌胃造模,空白对照组予等容积色拉油灌胃。造模2 h后,中药高、中、低剂量组分别给予生药含量为24.48、12.24和6.12 g/(kg·d)的复方茵丹汤中药煎剂1 mL/100 g体重灌胃,模型组和空白对照组给予等容积生理盐水灌胃,阳性药对照组给予67.5 mg/(kg·d)去氧胆酸灌胃,均1次/日。造模后分别于24、48、72 h处死相应时相大鼠,采用RT-q-PCR、Western blot和IHC技术检测早期生长反应因子1(early growth response-1,Egr-1)及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在大鼠肝组织的表达水平。结果与同时相空白对照组比较,模型组Egr-1、ICAM-1基因及蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与同时相模型组比较,中药各剂量组及阳性药对照组Egr-1及ICAM-1基因及蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。中药高剂量组Egr-1、ICAM-1基因及蛋白表达明显低于同时相中药中、低剂量组(P<0.05,P<0.01),与阳性药对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方茵丹汤对ANIT灌胃诱导AIC大鼠的治疗作用可能与其下调Egr-1和ICAM-1基因和蛋白表达有关。

复方茵丹汤治疗急性淤胆型肝炎30例临床观察

目的观察西医综合治疗基础上加用复方茵丹汤治疗急性淤胆型肝炎的临床疗效。方法采用随机对照研究方法,将符合纳入标准的60例急性淤胆型肝炎的患者,随机分为治疗组(西医综合治疗联合复方茵丹汤)和对照组(西医综合治疗),每组30例。观察两组治疗前后中医症候积分以及肝功能水平[总胆红素(total bilirubin,TBIL),直接胆红素(direct bilirubin,DBIL),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)及胆汁酸(total biliary acid,TBA)]的变化。结果与本组治疗前比较,治疗组与对照组患者治疗1周末、4周末症状总积分均降低(P<0.05),治疗4周后TBIL、DBIL、ALP、GGT、TBA均降低(P<0.01)。与对照组同期比较,治疗组治疗1周末症状总积分明显降低(P<0.05),治疗组治疗1、2周末TBIL、DBIL、ALP、GGT、TBA降低(P<0.05)。与对照组比较,治疗组患者TBIL、DBIL下降至正常5倍以内的平均时间明显缩短(P<0.05)。结论复方茵丹汤治疗急性淤胆型肝炎,可以明显改善临床症状,降低TBIL、DBIL、ALP、GGT及TBA,明显改善胆汁淤积,促进病情恢复。

复方茵丹汤对急性肝内胆汁淤积大鼠孕烷X受体和组成性雄烷受体表达的影响

目的:研究复方茵丹汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的大鼠急性肝内胆汁淤积(AIC)作用机制。方法:将108只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,中药高、中、低剂量组和熊去氧胆酸胶囊(UDCA)组,每组18只,依据取材时间不同又将各组随机分为24h、48h、72h三个亚组,每组6只。模型组、中药组、UDCA组大鼠一次性给予2%ANIT按100mg/kg灌胃造模,正常组予等容积色拉油灌胃。造模2h后,中药高、中、低剂量组分别给予生药含量为24.48、12.24、6.12g·kg^-1·d^-1的复方茵丹汤中药煎剂1mL/100g灌胃,模型组和正常组给予等容积0.9%氯化钠溶液灌胃,UDCA组给予67.5mg·kg^-1·d^-1 UDCA水溶液1mL/100g灌胃,均1次/d。造模后分别于24h、48h、72h处死相应时相大鼠,采用RT-q-PCR、Western Blot和IHC技术检测PXR及CAR在大鼠肝组织的表达水平。结果:与同时相正常组比较,模型组PXR、CAR mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。与同时相模型组比较,中药各剂量组及UDCA组PXR、CAR mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01)。中药高剂量组PXR、CAR基因及蛋白表达显著高于中药低剂量组和UDCA组(P<0.05,P<0.01)。结论:复方茵丹汤对ANIT灌胃诱导AIC大鼠有防治作用,可能与其上调PXR、CAR mRNA和蛋白表达有关。