复方黄芪养心合剂对心室重构大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43分布与表达的影响

目的观察复方黄芪养心合剂对冠状动脉（冠脉）结扎术后心室重构（vR）大鼠心肌缝隙连接蛋白43（Cx43）分布改变和表达的影响。方法73只健康雄性清洁级SD大鼠，随机取8只作为假手术组，其余65只大鼠行冠脉左前降支（LAD）结扎术，术后观察10d。存活的49只大鼠按随机数字表法分为复方黄芪养心合剂高、中、低剂量组和琥珀酸美托洛尔组，每组10只，VR模型组9只。复方黄芪养心合剂高、中、低剂量组分别按14．0、7．0、3．5mL-1·kg-1·d-1。灌胃复方黄芪养合剂（黄芪20g、党参20g、太子参20g、苦参20g、丹参20g、甘松20g、炙甘草10g、生山楂15g）；琥珀酸美托洛尔组按7．0mL-1·kg-1·d-1。灌胃琥珀酸美托洛尔；VR模型组和假手术组均灌胃蒸馏水7．0mL-1·kg-1·d-1。连用8周后，取大鼠心脏组织，用免疫组化法（IHC）观察心肌Cx43分布的改变，用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测心肌Cx43蛋白的表达。结果显微镜下可见，假手术组心肌Cx43呈棕黄色颗粒状表达；VR模型组较假手术组有所减少；琥珀酸美托洛尔组表达较假手术组减少不明显，但较VR模型组增多；复方黄芪养心合剂高、中、低剂量组表达较vR模型组有所增加，与琥珀酸美托洛尔组相近。WesternBlot结果显示：与假手术组比较，vR模型组心肌Cx43蛋白表达明显减少[（309．25±56．72）％比（597．67±78．25）％]；琥珀酸美托洛尔组和复方黄芪养心合剂高、中、低剂量组则较VR模型组明显增加[（466．81±99．29）％、（446．61±68．25）％、（455．20±81．58）％、（528．87±57．69）％比（309．25±56．72）％，P〈0．05或P〈0．01]；高、中、低剂量复方黄芪养心合剂组之间及与琥珀酸美托洛尔组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论复方黄芪养心合剂能够改善冠脉结扎术后VR大鼠心肌细胞Cx43的分布变化与表达减少，作用与琥珀酸美托洛尔相近，但其作用无剂量依赖性。

复方黄芪养心合剂对大鼠冠状动脉结扎术后心室重构的影响

目的观察复方黄芪养心合剂(CAMNH)对大鼠冠状动脉结扎术后心室重构(VR)的影响。方法 SD大鼠47只,取8只设为假手术组,另39只行冠状动脉左前降支结扎术,术后10天存活大鼠29只,随机分为复方黄芪养心合剂组(CAMNH组)、琥珀酸美托洛尔缓释片组(MSSRT组)各10只,心室重构模型组9只。各组予相应药物灌胃8周。术后第6周和第10周分别进行超声心动图检测。结果术后第6周,CAMNH组LVEF、FS分别为(61.19±8.42)%、(28.96±5.49)%,明显低于假手术组的(77.08±6.08)%、(40.98±5.45)%(P<0.01);也低于MSSRT组的(70.59±8.65)%、(35.75±6.41)%(P<0.05);与模型组(64.35±6.12)%、(31.73±4.64)%相近(P>0.05)。术后第10周,CAMNH组、MSSRT组LVDs分别为(4.73±0.43)mm、(4.88±0.48)mm,较模型组(6.44±2.01)mm明显缩小(P<0.01)。CAMNH组、MSSRT组的LVEF分别为(64.00±5.34)%、(63.03±4.35)%,均高于模型组的(43.74±8.96)%(P<0.01);CAMNH组、MSSRT组的FS分别为(30.64±3.60)%、(29.95±2.93)%,明显高于模型组的(18.88±4.44)%(P<0.01)。各组前后对比:LVDs:模型组增大(P<0.05);LVEF及FS:模型组及MSSRT组进一步降低(P<0.01),CAMNH组无明显变化(P>0.05)。结论 CAMNH对大鼠冠状动脉结扎术后心室重构有干预作用,能促使LVDs缩小,降低LVEF(%)、FS(%),其作用与MSSRT相当。

复方黄芪养心合剂对缺血再灌注大鼠室性心律失常的作用

目的:观察复方黄芪养心合剂(compound astragalus membranaceus yangxin mixture,CAMYM)对SD大鼠再灌注心律失常(reperfusion arrhythmias,RA)的作用。方法:应用CAMYM14g.7ml-1.1kg-1.d-1剂量、琥珀酸美托洛尔缓释片(metoprolol succinate sustained-re-lease tablets,MSSRT)9.5mg.7ml-1.1kg-1.d-1剂量灌胃2周后,对SD大鼠行冠状动脉左前降支结扎30min后再灌注60min造成RA模型,记录Ⅱ导联心电图,采用室性心律失常(ventricular ar-rhythmias,VA)评分方法,进行综合评分;结果:室性早搏(ventricular premature beat,VPB)开始时间(s)、室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)开始时间(s)及VT阵数等,CAMYM组和MSSRT组均低于I/R(缺血再灌注)组(P<0.05);VT总时程(s)CAMYM组和MSSRT组与I/R组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);VA评分(分)CAMYM组与MSSRT组显著低于I/R组(P<0.01);VPB开始时间(s)、VT开始时间(s)、VT阵数、VT总时程(s)以及VA评分(分),CAMYM组与MSSRT组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CAMYM能使再灌注VPB与VT出现时间提前,VT阵数减少,VA总评分降低,其改善大鼠缺血再灌注心律失常作用与MSSRT相近。

复方黄芪养心合剂治疗气虚血瘀型冠心病不稳定性心绞痛临床研究

目的:观察复方黄芪养心合剂(Compound astragalus mixture nourishing heart,CAMNH)联合常规西药治疗,对气虚血瘀型冠心病不稳定性心绞痛患者中医证候积分及西雅图心绞痛量表(SAQ)评分的影响。方法:选取52例气虚血瘀型冠心病不稳定性心绞痛患者,采用随机数字表法分为对照组和复方黄芪养心合剂组各26例,2组均给予西医标准治疗方案,复方黄芪养心合剂组同时加用CAMNH治疗,治疗4周后比较2组中医证候积分及SAQ评分。结果:最终纳入统计对照组26例,复方黄芪养心合剂组25例。治疗后,2组中医证候积分均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。2组间比较,复方黄芪养心合剂组中医证候积分较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01)。对照组躯体活动受限程度、心绞痛稳定状态、心绞痛发作情况、治疗满意程度4个维度评分均较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),疾病认识程度维度评分较治疗前稍升高,但差异无统计学意义(P>0.05);复方黄芪养心合剂组的各维度评分均较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。2组间比较,复方黄芪养心合剂组各维度评分改善均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:CAMNH可改善气虚血瘀型冠心病不稳定性心绞痛患者气虚血瘀证中医证候积分及SAQ评分,改善患者临床症状,提高生活质量。

复方黄芪养心合剂对SD大鼠冠状动脉结扎术后心室及血管周围胶原重构的影响

目的观察复方黄芪养心合剂(CAMNH)对SD大鼠冠状动脉结扎术后心室及血管周围胶原重构(VR)的影响。方法 SD大鼠47只随机取假手术组(SO组)8只。其余39只行冠状动脉左前降支结扎术,观察10天,存活29只大鼠按随机数字表法分为三组,复方黄芪养心合剂组(CAMNH组)、美托洛尔缓释片组(MSSRT组)每组10只,心脏重构组(VR组)9只,CAMNH组MSSRT组予相应药物灌胃,VR组和SO组予蒸馏水灌胃,共计8周。计算全心室质量与体质量比(Vt/Wt);使用改良Masson染色法观察大鼠心室重构,用Image Pro Plus 6.0图像分析系统,计算心肌组织胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)。结果 Vt/Wt:MSSRT组小于VR组[(2.77±0.26)%比(3.06±0.21)%,P<0.05];CAMNH组明显小于VR组[(2.67±0.17)%比(3.06±0.21)%,P<0.01]。CVF与PVCA:MSSRT组及CAMNH组与VR组比较明显降低[(43.89±6.83)%、(42.60±17.55)%比(59.01±6.93)%;(101.8±49.7)%、(104.1±41.2)%比(148.1±69.3)%;P<0.01]。结论复方黄芪养心合剂能够减轻冠状动脉结扎术后SD大鼠Vt/Wt,降低VR大鼠CVF、PVCA,作用与美托洛尔缓释片相当。

复方黄芪养心合剂对缺血性心律失常大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43磷酸化和去磷酸化的影响

目的观察预防性应用复方黄芪养心合剂(compound huangqi yangxin mixture,CAMNH)对缺血性心律失常大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白(connexin,Cx)Cx43磷酸化(P-Cx43)和去磷酸化(NP-Cx43)的影响及是否存在量效关系。方法将60只雄性SD大鼠随机分成西药组(A组)、复方黄芪养心合剂小剂量组(B组)、复方黄芪养心合剂中剂量组(C组)、复方黄芪养心合剂大剂量组(D组)、模型组(E组)、假手术组(F组)。用复方黄芪养心合剂大(28 g/kg·d)、中(14 g/kg·d)、小(7 g/kg·d)剂量灌胃、西药组用琥珀酸美托洛尔(9.5 mg/kg·d)灌胃、模型组和假手术组用生理盐水(7 g/kg·d),灌胃2 w。2 w后结扎冠状动脉左前降支建立大鼠急性缺血性心律失常模型,观察缺血30 min之内心律失常情况。30 min后处死大鼠,取心脏标本,采用免疫印迹法(Western blot法)分析比较P-Cx43、NP-Cx43的变化。结果 Western blot法研究发现西药组、复方黄芪养心合剂小、中、大剂量组NP-Cx43浓度增加小于模型组和假手术组,各组间差异有统计学意义(P<0.05);西药组、复方黄芪养心合剂小、中、大剂量组P-Cx43浓度增加大于模型组和假手术组,各组间差异有统计学意义(P<0.05),且NP-Cx43、P-Cx43在复方黄芪养心合剂大剂量组与西药组表达结果相似。结论复方黄芪养心合剂具有抗缺血性心律失常作用,且其抗心律失常可能与其减少缝隙蛋白Cx43的去磷酸化、增加磷酸化表达有关,同时复方黄芪养心合剂的剂量与其减少缝隙连接蛋白Cx43的去磷酸化,增加磷酸化的表达存在一定相关性。

复方黄芪养心合剂对缺血性心律失常大鼠室性心律失常的作用

目的:观察复方黄芪养心合剂(CAMYM)对SD大鼠缺血性心律失常引起的室性心律失常的作用。方法:将60只雄性SD大鼠随机分成琥珀酸美托洛尔缓释片(MSSRT)组、CAMNH小剂量组、CAMNH中剂量组、CAMNH大剂量组、模型组、假手术组,每组10只。用CAMNH大剂量(28g/7ml/kg/d)、CAMNH中剂量(14g/7ml/kg/d)、CAMNH小剂量(7g/7ml/kg/d)剂量灌胃、MSSRT(9.5mg/7ml/kg/d)灌胃、模型组和假手术组用生理盐水(14g/7ml/kg/d)灌胃,干预两周。两周后结扎冠状动脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型,观察缺血30min之内心律失常情况变化。记录大鼠缺血时的心电图,然后30min后提取心肌,通过大鼠心肌酶、HE光学显微镜下观察、室性心律失常评分(VA评分)三种方法,分析各组大鼠缺血性心律失常发生30min后心肌酶的变化,光学显微镜下缺血心肌的病理变化及VA评分。结果:与假手术组比较,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH中剂量组、CAMNH大剂量组心肌酶谱中肌酸激酶(CK)、同工酶(CK-MB)均有升高,但与模型组相比药物组心肌酶CK、CK-MB升高的程度相对少。CAMNH组(大剂量组和中剂量组)和MMSRT组均无胞浆嗜酸性变、颗粒变性和凝固性坏死,而模型组在心肌缺血早期即出现典型的胞浆嗜酸性变、颗粒变性和凝固性坏死;CAMNH组(小剂量组)在缺血30min后亦出现了胞浆嗜酸性变和颗粒变性,但未出现凝固性坏死。CAMNH组(大剂量组、中剂量组)和MMSRT组VA评分均低于模型组和假手术组(P<0.05);CAMNH组(小剂量组)VA评分低于模型组(P<0.05);但与假手术组比较无显著性差异(P>0.05);CAMNH各组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:CAMNH具有抗缺血性室性心律失常作用,尤以CAMNH大剂量组和CAMNH中剂量组效果明显,且CAMNH大剂量组与MSSRT抗缺血性室性心律失常作用接近。

复方黄芪养心合剂对大鼠缺血心肌缝隙连接蛋白CX43磷酸化的影响

目的观察复方黄芪养心合剂(CAMNH)对冠状动脉左前降支结扎所致心肌缺血模型大鼠缝隙连接蛋白CX43的影响。方法 50只SD大鼠采用随机数字表法分为CAMNH大剂量组28g(14mL·kg^(-1)·d^(-1))、CAMNH小剂量组7g(3.5mL·kg^(-1)·d^(-1))、琥珀酸美托洛尔(MSSRT)组9.5ug(7mL·kg^(-1)·d^(-1))、模型组、假手术组五组,每组10只,给予相应药物灌胃后采用冠状动脉左前降支结扎术造模,结扎1h后腹主动脉取血,HE染色观察心肌细胞形态改变;采用ELISA法检测心肌肌钙蛋白I(cTn-I)和肌钙蛋白T(cTn-T)水平;采用Western blot(WB)法检测磷酸化的缝隙连接蛋白CX43表达。结果 cTn-I、cTn-T:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组均升高[cTn-I:(144.94±28.83)ng/L、(85.48±24.06)ng/L、(115.07±21.34)ng/L、(81.63±16.89)ng/L比(58.50±9.53)ng/L;cTn-T:(144.33±20.29)ng/L、(97.89±11.78)ng/L、(121.33±15.02)ng/L、(100.20±5.66)ng/L比(77.40±12.52)ng/L,P<0.05或P<0.01];MSSRT组与模型组比较升高幅度明显减少(P<0.01);CAMNH大剂量组与假手术组比明显增高,与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少(P<0.05或P<0.01)。WB结果:与假手术组相比,模型组、MSSRT组、CAMNH小剂量组、CAMNH大剂量组CX43表达减少[(0.07±0.01)、(0.13±0.01)、(0.10±0.02)、(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P<0.01];MSSRT组与模型组比较明显增多[(0.13±0.01)比(0.07±0.01),P<0.01];CAMNH小剂量组与模型组比较略升高[(0.10±0.02)比(0.07±0.01),P<0.01],与假手术组、MSSRT组相比明显减少[(0.10±0.02)比(0.18±0.02)、(0.13±0.01),P<0.05];CAMNH大剂量组与假手术组比明显减少[(0.13±0.02)比(0.18±0.02),P<0.01],与CAMNH小剂量组、模型组比增高程度减少[(0.13±0.02)比(0.10±0.02)、(0.07±0.01),P<0.05]。结论复方黄芪养心合剂能降低冠状动脉左前降支结扎所引起的心肌缺血损伤,作用与琥珀酸美托洛尔缓释片相当。

复方黄芪养心合剂对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43的影响

目的:观察复方黄芪养心合剂对SD大鼠缺血再灌注心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)分布的改变和表达的影响。方法:应用复方黄芪养心合剂按每天14g/kg剂量、琥珀酸美托洛尔缓释片按每天(MSSRT)9.5mg/kg剂量灌胃2周后,对SD大鼠行冠状动脉左前降支结扎30min后再灌注60min造成心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型,记录Ⅱ导联心电图,采用免疫组织化学法(IHC)观察心肌细胞Cx43分布的改变;运用Image Pro Plus 6.0图像分析软件对Cx43的表达进行半定量分析。结果:Cx43平均光密度(AOD)I/R组心肌内膜下缺血区Cx43的AOD显著低于假手术组(P<0.01),且MSSRT组、复方组较1/R组升高(P<0.05)。结论:对冠状动脉左前降支结扎术后再灌注SD大鼠,复方黄芪养心合剂对心肌细胞Cx43分布的改变有改善作用,有促进心肌内膜下缺血区域Cx43表达的作用,其作用与MSSRT相近。