四季茶花夏咏国色叶片愈伤诱导与植株再生研究

以四季茶花夏咏国色当年生叶片为外植体,通过愈伤组织分化不定芽获得再生植株,为大规模无性繁殖和遗传转化提供技术支持。结果表明,外植体较适宜的消毒方法为:75%C2H5OH处理30 s后,0.1%HgCl2处理5 min或2%NaClO处理8 min,成活率分别为71.85%和72.59%;培养基中添加0.02%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)能有效阻止外植体褐化现象发生;以基本培养基(MS)为基础培养基,添加2.0 mg·L^(-1)2,4-二氯苯氧乙酸(2, 4-D)+4.0 mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.02%PVP+50 mL·L^(-1)椰汁(CW)诱导叶片愈伤组织,诱导率达90.37%;在添加0.5 mg·L^(-1)2, 4-D+2.0 mg·L^(-1)6-BA+50 mL·L^(-1)CW的继代培养基上经过3次转接继代培养后,将愈伤组织转入MS+0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA)+10.0 mg·L^(-1)6-BA+100 mL·L^(-1)CW+100 mg·L^(-1)谷氨酰胺(Gln)+100 mg·L^(-1)脯氨酸(Pro)的分化培养基中,约60 d后可获得再生不定芽,叶片愈伤分化率约37.78%;利用500 mg·L^(-1)吲哚丁酸(IBA)浸泡不定芽基部,70 min后转接至1/2 MS固体培养基中,生根率达34.44%。初步建立了夏咏国色愈伤组织诱导及植株再生体系。