活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变模型兔眼IGF-1表达的影响

目的:观察活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumatic Proliferrative Vitreo-retinopathy,tPVR)增殖膜(ERM)中胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)表达的影响。方法:将40只家兔随机抽取32只,造成外伤性PVR模型,随机分成活血利水组、活血化瘀组、利水明目组、模型组,另8只为空白组。连续灌胃28天后,观察眼底PVR分级情况,免疫组织化学方法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在各组的表现及病理组织学改变。结果:在活血利水组,ERM中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)阳性程度低于模型组,差异有非常显著性(P<0.01)。活血化瘀组与利水明目组也能降低IGF-1的阳性程度,与模型组相比有显著性意义(P<0.05)。活血利水组IGF-1阳性程度低于活血化瘀和利水明目两个治疗组,有显著性差异(P<0.05)。结论:活血利水法能通过抑制玻璃体腔中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的作用,从而抑制增殖细胞的过度增生,防治PVR形成和发展。

外伤性增生性玻璃体视网膜病变的电镜观察

目的 探讨外伤性增生性玻璃体视网膜病变 (traumaticproliferativevitreoretinopathy ,tPVR)细胞增生的特征。方法 对 10例tPVR的玻璃体切除标本进行了透射电镜观察。结果 tPVR的增生特征以成纤维细胞及胶原纤维为主。 3例标本可见吞噬细胞及色素颗粒 ,4例标本可见少数视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ,3例可见血管组织。结论 tPVR以纤维增生为主 ;玻璃体出血可引起以巨噬细胞为主的炎症反应 ,刺激增生 ;有血管参与tPVR的增生过程。

GM 6001干预外伤性增生性玻璃体视网膜病变的病理形态学研究

目的:研究GM6001干预外伤性增生性玻璃体视网膜病变的病理形态学改变。方法:将SD大鼠180只随机分为对照组、tPVR组和外伤后应用GM6001组,应用透射电镜观察视网膜结构变化。结果:透射电镜示tPVR组大鼠视网膜光感受器细胞和RPE、视网膜内外屏障受损,而外伤后应用GM6001组视网膜光感受器细胞外节膜盘结构尚清晰,RPE基底部质膜内褶较tPVR组多,胞质中含大量线粒体、吞饮小泡和滑面内质网,细胞连接规则。结论:GM6001可保护视网膜组织结构,在干预tPVR的发生发展中起重要作用。

散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼血小板源性生长因子表达的影响

目的探讨散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)增殖膜上血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)表达的影响以及防治PVR的作用机制。方法将40只成年青紫蓝兔兔眼造成外伤性PVR模型,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、利水明目组(C组)、活血化瘀组(D组)、活血利水组(E组),每组8眼。并利用改良免疫组织化学方法对PVR实验兔眼中增殖膜上PDGF的表达进行检测。结果给药后第7天,B、C、D、E组的PVR分级比较差异无统计学意义(P>0.05);给药后第28天,E组与其他各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。各用药组玻璃体腔增生膜PDGF阳性细胞数明显少于B组,差异有统计学意义(P<0.05)或非常显著的统计学意义(P<0.01);E组与C组、D组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论散血明目片能通过抑制玻璃体腔中PDGF对视网膜色素上皮细胞的刺激作用,从而抑制增殖细胞的过度增生,防止PVR形成和发展。

活血利水法对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用

目的探讨散血明目片对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumaticproliferativevitreoretinopathy,tPVR)玻璃体中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)浓度的影响及防治PVR的作用机理。方法将40只家兔随机抽取32只,造成外伤性PVR模型,随机分成活血利水组、活血化瘀组、利水明目组和模型组,其余8只为空白组。连续灌胃1月后,观察眼底PVR分级情况,检测玻璃体中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的含量。结果活血利水组中玻璃体细胞间粘附分子-1(ICAM-1)浓度低于模型组,差异有极显著性(P<001)。活血化瘀组与利水明目组也能降低ICAM-1浓度,与模型组相比差异有显著性(P<001)。活血利水组ICAM-1浓度低于另两个治疗组,差异有显著性(P<001)。结论活血利水法是活血化瘀和利水明目两者作用的协同,能明显降低玻璃体中细胞间粘附分子-1的浓度,防治PVR形成和发展。

三种药物在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变中的作用

目的:探讨曲安奈德(TA)、青蒿琥酯(ART)、木犀草素(LU)对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(TPVR)的防治作用。方法:选取青紫蓝兔48只经制作眼球穿通伤及玻璃体腔内注射0.3mL富含血小板血浆的方法制备TPVR动物模型,随机分为4组(n=12),其中对照组玻璃体腔注入0.1mL生理盐水;TA组玻璃体腔注入0.1mL(1mg/mL)曲安奈德;ART组玻璃体腔注入0.1mL(20μg/mL)青蒿琥酯;LU组玻璃体腔注入0.1mL(10μg/mL)木犀草素。术后1、2、3、4wk通过眼底照相和眼部B超观察玻璃体及视网膜增生情况,术后28d采用Western Blot法检测各组兔眼玻璃体液中α-SMA和VIM蛋白表达水平,并经视网膜HE染色观察各组视网膜组织结构情况。结果:术后28d,TA组、ART组和LU组兔眼TPVR分级均显著低于对照组(P<0.05),且TA组兔眼TPVR分级均显著低于ART组和LU组(P<0.05)。术后28d,TA组、ART组和LU组兔眼玻璃体液中α-SMA和VIM蛋白的表达水平均显著低于对照组(P<0.01)。HE染色结果显示,对照组兔眼视网膜各层排列紊乱,严重扭曲或局部断裂,各层结构不清晰,前膜明显增厚,视网膜明显脱离;LU组兔眼视网膜各层排列轻微扭曲,视网膜前可见炎性渗出,视网膜浅层脱离;ART组兔眼视网膜结构清晰,轻度水肿,可见浅层脱离;TA组兔眼视网膜各层结构清晰,排列尚整齐,局部可见视网膜褶皱,无视网膜脱离。结论:玻璃体腔内注射曲安奈德、青蒿琥酯及木犀草素均对TPVR具有防治作用,其中曲安奈德效果最明显。

化瘀散结片对兔眼外伤性增生性玻璃体视网膜病变血液流变学的影响

目的:探讨化瘀散结片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferativvietreoretinopa,tPhVyR)血液流变学的影响。方法:采用兔眼后节穿通伤加注血法制备PVR模型,第30d抽血观察正常对照组、阴性对照组、阳性(道诺霉素)对照组、化瘀散结片治疗组PVR兔子的血液流变学。结果:化瘀散结片治疗组对血液流变学部分指标有降低作用:纤维蛋白原、红细胞刚性、全血低切粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数,与各对照组相比有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:化瘀散结片能够改善血液流变学状态,促进玻璃体积血吸收,对防治PVR的发生发展有一定作用。

p21WAF1/CIP1在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的抑制作用

背景p21是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂，能阻止细胞从G．期进入s期，抑制细胞增生，研究认为内源性p21表达的动态变化可能与细胞增生性病变有关。外伤性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）是眼部增生性反应相关性疾病，了解PVR过程中p21表达的动态变化可能为PVR的靶向治疗提供依据。目的检测p21WAF1/CIP1在兔外伤性PVR中的动态变化，探讨其在外伤性PVR发病机制中的作用。方法选取青紫蓝兔54只，采用随机数字表法将实验兔随机分为正常对照组（6只）和造模后7、14、21和28d组（每组12只），每只兔任意选取一眼作为实验眼。各模型组兔眼玻璃体腔注射人富含血小板血浆（PRP）0．4ml，同时于鼻上方角巩膜缘后5mm处行巩膜外冷冻约5s，以建立外伤性PVR模型。各组兔眼行眼部B型超声检查以评估建模情况。分别于造模后7、14、21和28d以过量麻醉法处死实验兔并制备实验眼视网膜组织切片，采用苏木精-伊红染色法检测兔眼视网膜的形态表现，分别采用免疫组织化学染色、Westernbla及逆转录PCR（RT—PCR）法检测兔视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白及其mRNA的相对表达。结果正常对照组兔眼眼前后节均正常，模型组兔造模后1～7d兔眼玻璃体中增生条索逐渐变粗，可见视网膜皱褶，造模后14d兔眼出现牵引性视网膜脱离，造模后28d兔眼漏斗状视网膜脱离。视网膜病理组织学检查显示，造模后7d兔眼视网膜表面有增生膜和炎性细胞聚集，造模后28d可见视网膜呈花瓣形固定皱褶，视网膜结构紊乱。免疫组织化学染色显示，p21WAF1/CIP1蛋白在正常对照组兔眼视网膜神经节细胞层及内核层的细胞核内呈强阳性表达，造模后7、14、21和28d表达强度减弱，以造模后14d表达量最低。Westernbla结果显示，正常对照组和造模后7、14、21和28d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为0．74±0．08、0．60±0．05、0．56±0．03、0．74±0．02和0．65±0．04，组间总体比较差异有统计学意义（F=20．55，P=0．00），造模后7d和14d的表达量均明显低于正常对照组和造模后21d和28d组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。RT—PCR结果显示，正常对照组和造模后7、14、21和28d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1。mRNA的相对表达量分别为0．65±O．09、0．57±0．05、0．45±0．04、0．46±0．02和0．47±0．04，总体比较差异有统计学意义（F=18．06，P=0．00），造模后14、21和28dp21WAF1/CIP1mRNA的相对表达量均明显低于正常对照组和造模后7d组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论p21WAF1/CIP1在外伤性PVR兔眼视网膜中的动态表达变化与PVR的病程发展过程相吻合，p21可能参与外伤性PVR发生和发展的病理过程，p21WAF1/CIP1表达量的下降与细胞增生的动态变化过程一致，可能促进了PVR的进展。

金丝桃素抑制兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变

目的:研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)特异性抑制剂—金丝桃素对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的防治作用机制。方法:用自体富含血小板血浆玻璃体内注射制备免外伤性PVR模型,并同时将生理盐水、1μM、10μM和100μM金丝桃素0.1ml注入兔眼玻璃体内,在不同时间点观察金丝桃素对PVR形成的防治作用。结果:在对照组第10d就出现视网膜脱离,PVR随着时间延长发展至更严重等级。在金丝桃素组,PVR也发生,但其严重程度在每个时间点均低于对照组。在10μM和100μM金丝桃素组给药5d后,PVR的临床分级显著低于对照组(P<0.05)。组织学检查金丝桃素组未发现明显视网膜形态改变,视网膜电图检查也未观察到显著功能变化。结论:金丝桃素玻璃体腔内注射是安全的,并能有效抑制兔外伤性PVR的发生发展,为将来临床应用提供可靠的理论依据。眼科学报 2002;18:240-246.

活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼玻璃体TGF-β1表达的影响

目的探讨活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)兔眼转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法用兔眼后节穿通伤加注入血浆法制备PVR模型,利用免疫组化法对正常组、模型组、活血利水组、活血化瘀组、利水明目组PVR中的玻璃体腔增殖膜TGF-β1进行检测。结果活血利水组增殖膜中TGF-β1的阳性表达低于模型组、活血化瘀组和利水明目组的阳性表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论活血利水法能够降低PVR增殖膜中TGF-β1的阳性表达,抑制PVR的发生发展。

水蛭素对外伤性增生性玻璃体视网膜病变细胞外基质的影响

目的 探讨水蛭素对外伤性增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativvitreoretinopathy,PVR)细胞外基质形成的影响。方法 制造穿孔性眼外伤的动物模型 ,将水蛭素 0 1ml(1 0单位 )注入兔玻璃体腔内 ,对照组注入 0 1ml生理盐水 ,用放射免疫法测定玻璃体腔内层粘连蛋白 (Laminin,LN)和Ⅳ型胶原 (Ⅳcollagen,ⅣC)的含量。结果 在外伤后 1周水蛭素组与对照组比较LN和ⅣC含量下降 (P <0 0 5 )。

木犀草素与青蒿琥酯联合用药防治实验性外伤性增生性玻璃体视网膜病变

目的探讨木犀草素(LU)与青蒿琥酯(ART)联合用药在外伤性增生性玻璃体视网膜病变(TPVR)中的作用。方法选取16只月龄、体重相近的健康成年雄性青紫蓝兔,实验眼(右眼)玻璃体内注射富含血小板血浆0.3 mL制作TPVR模型。将实验兔随机分成4组,每组4只,对照组玻璃体内注射0.2 mL生理盐水;单用药物组分别在玻璃体内注射0.2 mL的LU(LU组)及0.2 mL的ART(ART组),联合用药组(联合组)玻璃体内注射LU及ART各0.1 mL。注药后第4周通过眼部B超及眼底照相检查观察玻璃体混浊情况及视网膜改变情况并划分相对应的增生性玻璃体视网膜病变(PVR)等级;取眼球组织行Western blot实验检测各组α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,制作眼球组织切片行HE染色观察结构改变。PVR分级等级资料比较采用秩和检验;多组间比较采用单因素方差分析,组间差异比较使用Bonferroni检验。结果眼部B超及眼底照相检查观察结果提示,ART组、LU组及联合组兔玻璃体改变均优于对照组。ART组、LU组、联合组PVR分级均优于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,联合组兔玻璃体内α-SMA表达水平最低;联合组、ART组、LU组α-SMA表达水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);其中,联合组α-SMA与LU组比较,差异有统计学意义(P<0.05),联合组α-SMA与ART组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示,对照组视网膜脱离、水肿最严重,联合组兔视网膜浅脱离,结构大体平整,损伤轻于ART组及LU组。结论玻璃体内注射LU、ART的联合用药可有效抑制实验动物模型TPVR的发展,优于LU、ART的单用治疗效果。未来应进一步研究联合用药的具体协同机制,为治疗TPVR的研究打下基础。

散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼玻璃体结缔组织生长因子的影响

目的探讨散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法用兔眼后节穿通伤加注入血浆法制备PVR模型,利用免疫组化法对正常组、模型组、活血利水组、活血化瘀组、利水明目组PVR中的玻璃体腔增殖膜CTGF进行检测。结果活血利水组增殖膜中CTGF的阳性表达低于模型组、活血化瘀组和利水明目组(P<0·05)。结论散血明目片能够降低PVR增殖膜中CTGF的阳性表达,抑制PVR的发生发展。

水蛭素对外伤性增生性玻璃体视网膜病变增殖膜抑制机制的探讨

目的 探讨水蛭素抑制外伤性增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativevitreo retinopathy,PVR)增殖膜的作用及机理。方法 采用兔眼后段穿通伤制备的外伤性PVR模型 ,利用HE染色和免疫组化SP法结合图像分析半定量观察模型组、水蛭素组和生理盐水组玻璃体腔增殖膜的形态计量学、增殖细胞血小板源生长因子受体 -β (platelet-derivedgrowthfactorreceptor-β,PDGFR -β)积分光密度 (IOD)以及Ki67阳性细胞数的改变。用线性回归分析增殖膜面积与PDGFR -β、Ki67的量以及后两者之间的关系。结果 水蛭素组增殖膜的面积、周长、平均体积、体积密度、数密度低于观察模型组和生理盐水组 (P <0 0 5～ 0 0 1 ) ;水蛭素组Ki67阳性细胞数、PDGFR -βIOD明显低于观察模型组和生理盐水组 (P <0 0 5～ 0 0 1 )。模型组与生理盐水组之间以上指标差异无显著性 (P >0 0 5)。水蛭素组增殖膜面积与PDGFR -β、Ki67的量呈正直线相关 ,前者r=0 570 ,P <0 0 1 ,后者r=0 657,P <0 0 1 ;PDGFR -β与Ki67的量呈正直线相关r=0 71 9,P <0 0 0 1。结论 水蛭素能抑制增殖膜增殖细胞PDGFR的活化及降低其下游分子Ki67的产生 ,推测通过细胞外调节蛋白激酶 (extracellularregulatedproteinkinases,ERK)通路产生了抑制增殖细胞的?

金雀异黄素对外伤性增生性玻璃体视网膜病变中bFGF和PCNA表达的抑制

目的探讨金雀异黄素对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)视网膜组织碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA和增殖细胞核抗原(proliferating cell nu-clear antigen,PCNA)表达的影响。方法建立外伤性PVR兔模型,分为模型对照组及金雀异黄素治疗组。每组于制模后7、14、21、28d分别将2只模型兔眼球取出制作标本,采用原位杂交法检测视网膜组织bFGF mRNA表达,采用免疫组织化学法检测PCNA表达。结果①外伤性PVR视网膜组织bFGF mRNA和PCNA表达呈现先升高后降低的动态变化,14d时达到峰值;②金雀异黄素治疗组在7、14、21、28d时视网膜组织bFGFmRNA和PCNA表达均明显低于模型对照组,差异均有显著性意义(均P<0.05)。结论金雀异黄素能抑制外伤性PVR视网膜组织bFGF mRNA和PCNA表达,具有防治外伤性PVR的潜能。

壳聚糖抑制兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的作用

背景:在眼科领域,已发现壳聚糖可以抑制青光眼手术瘢痕形成,但还未有明确的报道可以阻止和减缓增生性玻璃体视网膜病变的发生。目的:观察壳聚糖对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的防治作用及作用机制。方法:用自体富含血小板血浆玻璃体内注射制备兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变模型,并同时将生理盐水、5%壳聚糖、10%壳聚糖和15%壳聚糖溶液0.1mL注入兔眼玻璃体内,在不同时间点观察壳聚糖对增生性玻璃体视网膜病变形成的防治作用。结果与结论:对照组第10天就出现视网膜脱离,增生性玻璃体视网膜病变随着时间延长发展至更严重等级。壳聚糖组也发生增生性玻璃体视网膜病变,但其严重程度均低于对照组。10%和15%壳聚糖组给药5d后,增生性玻璃体视网膜病变的临床分级显著低于对照组(P<0.05)。组织学检查壳聚糖组未发现明显视网膜形态改变。结果说明壳聚糖玻璃体腔内注射是安全的,并能有效抑制兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的发生发展。

化瘀散结片对兔眼外伤性增生性玻璃体视网膜病变玻璃体中层粘连蛋白Ⅳ型胶原的影响

目的 探讨化瘀散结片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativevitreo retinopathy ,PVR)玻璃体中层粘连蛋白 (laminin ,LN)、Ⅳ型胶原 (Ⅳcollagen ,ⅣC)的影响。方法 采用兔眼后节穿通伤加注血法制备PVR模型 ,分别利用免疫组化SP法、放射免疫法观察正常对照组、羧甲基纤维素对照组、道诺霉素对照组、化瘀散结片治疗组 ,检测PVR玻璃体腔增殖膜中LN、ⅣC的表现及玻璃体液中LN、ⅣC浓度。结果 化瘀散结片治疗组增殖膜中LN、ⅣC的阳性表达及玻璃体液中LN、ⅣC的浓度均低于正常对照组、羧甲基纤维素对照组(P <0 0 1)。结论 化瘀散结片能够降低PVR增殖膜中LN、ⅣC的阳性表达及玻璃体液中LN、ⅣC的浓度 。

维甲酸与中性蛋白酶联合防治外伤性增生性玻璃体视网膜病变的研究

目的研究维甲酸与D ispase(中性蛋白酶)分别单独和联合应用对兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变(prolifer-ative vitroretinopthay,PVR)的防治作用。方法20只健康日本大耳白兔,随机分成4组,即对照组、维甲酸组、D ispase组及联合用药组。制备外伤性PVR模型后,各治疗组玻璃体腔注入相应药物,对照组注入生理盐水,观察和比较药物防治外伤性PVR的疗效。结果用药组PVR平均增生级别均低于对照组,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),单独用药组PVR平均增生级别高于联合用药组,差异有统计学意义(P<0.05)。其中维甲酸组及联合用药组视网膜前的增生细胞数及新生血管数少于对照组及D ispase组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论作用机制不同的药物维甲酸和D ispase可防治外伤性PVR的发生、发展,两者联合应用有一定的协同作用。

三种方法建立外伤性增生性玻璃体视网膜病变的兔模型研究

目的:比较三种方法建立外伤性增生性玻璃体视网膜病变(TPVR)兔模型的效果。方法:青紫蓝兔24只,共48只眼,在均造成眼外伤的基础上随机分成4组,每组各12只眼:实验组3组,分别为富血小板血浆(PRP)组[玻璃体腔内注射0.3 mLPRP]、转化生长因子β_(2)(TGF-β_(2))组[玻璃体腔内注射0.3 mLTGF-β_(2)(50μg/L)]和视网膜色素上皮(RPE)组[玻璃体腔内注射0.3 mLRPE细胞(1.5×10^(9)/L)],以及对照组(玻璃体腔内注射0.3 mL生理盐水)。术后每周通过眼底照相和B超观察玻璃体及视网膜的增生情况;术后第4周采用Westernblot法检测玻璃体内视网膜增生过程中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,采用冰冻切片法在显微镜下观察各组视网膜组织结构。结果:术后第4周,对照组及3组实验组TPVR的平均分级分别是0、3.67、2.33和2.50,3组实验组病变级别显著高于对照组(P<0.05),PRP组病变级别高于TGF-β_(2)组和RPE组(P<0.05),TGF-β_(2)组与RPE组病变级别差异无统计学显著性(P>0.05);术后第4周,各实验组玻璃体内视网膜α-SMA表达均高于对照组(P<0.05);术后第4周,各实验组视网膜切片显示视网膜增生程度均高于对照组。结论:在造成眼球穿通伤的基础上,玻璃体腔内注射RPE细胞、PRP和TGF-β_(2)均能造成兔TPVR,其中玻璃体内注射PRP的建模效果最明显。