补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型外侧膝状体病理改变的影响

目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型外侧膝状体损伤的干预作用,探讨其作用机理。方法采用烙闭上巩膜静脉法建立大鼠慢性EIOP模型,随机分为3组:空白组、模型组、给药组,观察补肾活血中药对EIOP大鼠眼压、外侧膝状体(lateral geniculate nucleus,LGN)病理形态学变化的影响。结果本实验采用的烙闭上巩膜静脉的造模方法使大鼠眼压明显升高,与造模前比较差异有显著统计学意义(P<0.01),在造模后8周(实验结束)眼压仍为造模前的2.5～3.0倍;LGN病理切片半定量分析表明:模型组神经元细胞密度(51.14±10.52)μm-2、神经元剖面积密度(6.57±1.59)μm-2、有髓纤维密度(0.3556±0.1019)μm-2、Nissl小体积分光密度31826±3796,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.01或0.05)。模型组Nissl小体积分光密度低于给药组(33906±3213),给药组神经元细胞密度(54.27±12.70)μm-2与空白组(60.95±13.35)μm-2比较差异有显著统计学意义(P<0.01),给药组有髓纤维密度(0.5611±0.1385)μm-2与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾活血中药有助于EIOP大鼠LGN损伤的修复。

剥夺性弱视猫外侧膝状体c-fos基因及Fos蛋白表达

为研究生后关键期内,正常猫及剥夺性弱视猫外侧膝状体神经元功能形态的变化规律,对正常视发育敏感期的幼猫行左眼睑缝合术,造成剥夺性弱视模型,采用Nissl染色法及电镜观察正常猫及剥夺性弱视猫外侧膝状体神经元的形态改变,并用免疫组化和原位杂交技术检测Fos蛋白及cfos基因的表达情况。结果显示:(1)剥夺猫剥夺层外侧膝状体神经元的截面积比非剥夺层及正常猫的明显变小,差异有显著性(P<0.05);(2)超微结构显示:剥夺性弱视猫的剥夺层出现大量变性的细胞,剥夺4周时最为显著;(3)正常猫外侧膝状体神经元Fos蛋白和cfos原位杂交的阳性细胞数及OD值随着时间的延长而降低。同龄猫剥夺层外侧膝状体Fos蛋白和cfos原位杂交阳性细胞数及OD值较正常猫减少(P<0.05)。结果提示:猫视觉的可塑性敏感期为生后4周到8周。剥夺性弱视猫外侧膝状体剥夺层及非剥夺层神经元形态及功能与正常猫相比较均发生改变。Fos法可以成为衡量弱视猫外侧膝状体兴奋性状态与形态学定位相结合的实验方法,但必须注意神经可塑性对其的影响。

雏鸡投射向外侧膝状体腹侧核的视顶盖细胞形态研究

鸟类的一些视觉信息经由视顶盖Ⅰ层细胞(Ⅰ细胞)传递到外侧膝状体腹侧核(nucleus geniculatus lateralis vent-ralis,GLv),用于色觉、瞳孔反射和视觉运动。使用羰花青荧光染料DiⅠ逆向神经标记技术研究了这些投射向GLv核的视顶盖Ⅰ细胞的形态特征。根据标记细胞的胞体和树突野大小及树突分枝特点,雏鸡投射到GLv核的视顶盖Ⅰ细胞可分为“矛状树突Ⅰ细胞”和“叉状树突Ⅰ细胞”,前者具有小型纺锤状的细胞体和垂直伸延的1支尖端树突,后者具有较大三角形或多角形的细胞体和多支上行性树突。多数标记树突的末端部水平分布于视顶盖F层,和终止于此层的视神经终末部的形态相一致。

补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型外侧膝状体脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型外侧膝状体(lateral geniculate nu-cleus,LGN)脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophin factor,BDNF)的干预作用,探讨其作用机理。方法采用烙闭上巩膜静脉法,烙闭SD大鼠3支上巩膜静脉,建立大鼠慢性EIOP模型,将30只(30眼)大鼠随机分为空白组、模型组、给药组,每组各10只。连续灌胃8周,并于8周末处死大鼠,观察补肾活血法对EIOP大鼠眼压及BDNF表达的影响。结果造模后大鼠眼压均较造模前明显升高(均为P<0.01),在造模后8周眼压仍为造模前的2～3倍。造模后,模型组造模后即刻、造模后给药组8周眼压分别为(28.1400±7.3919)mmHg(1kPa=7.5mmHg)、(27.5800±6.3129)mmHg,给药组分别为(31.7400±8.3153)mmHg、(25.6400±5.5894)mmHg,与空白组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。LGN病理切片半定量分析表明:模型组BNDF表达总面积(168614±10724)μm2、平均光密度(3066±708)、积分光密度(44443±3721),与空白组的总面积(255985±31225)μm2、平均光密度(6070±609)、积分光密度(61174±6226)比较差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。给药组的BDNF表达总面积(211739±28336)μm2、积分光密度(55793±7608),与模型组比较差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);给药组BDNF表达总面积与空白组比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论补肾活血中药有助于增强EIOP大鼠LGN的BDNF表达。

大鼠外侧膝状体神经元时空频率调谐特性发育观察

背景外侧膝状体（LGN）是视觉通路中重要的视觉信息处理器官，近年来发现LGN参与运动视觉信息处理，功能磁共振成像检查表明在LGN水平存在着双眼竞争，可能与弱视的发生有关。然而，LGN神经元时空频率特性的研究多限于猴或者猫，大鼠的相关研究较少。目的观察不同年龄段大鼠LGN神经元感受野时空频率调谐特性。方法取睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组及睁眼后60d组Wistar大鼠各5只，用在体细胞外记录技术，通过正弦光栅视觉刺激分别对各组大鼠LGN神经元感受野时空调谐特性进行检测，观察大鼠LGN神经元时空频率调谐特性随着发育发生的动态变化。结果睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组及睁眼后60d组大鼠LGN神经元时间和空间频率调谐低通调制和带通调制间神经元数量的差异均无统计学意义（，=0．68、0．47，P〉0．05），4个组大鼠LGN神经元感受野最优时间频率调谐特性成年后达最高值，大鼠LGN神经元的最优时间频率均值分别为（2．5±1．3）、（2．6±1．2）、（2．6±1．1）、（3．6＋1．1）Hz，差异有统计学意义（，=4．53，P〈0．05），睁眼后60d组的最优时间频率明显高于睁眼后14—16d组、20～22d组、27～30d组，差异均有统计学意义（q=4．43、4．10、4．03，P〈0．05），睁眼后14～16d组、20～22d组、27～30d组间的相互比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。4个组大鼠LGN神经元的最优空间频率均值分别为（0．04±0．04）、（0．04±0．03）、（0．05±0．03）、（0．05±0．04）cpd，差异均无统计学意义（F=0．58，P〉0．05），而时间频率瞬时带宽及空间频率带宽各年龄组问比较，差异均无统计学意义（F=0．37、1．22，P〉0．05）。结论大鼠LGN神经元感受野时空频率调谐发育特性的不同可能与其在视觉通路中的功能有关。

单眼视功能损害的原发性开角型青光眼患者的外侧膝状体损伤

目的研究单眼晚期视功能损害的原发性开角型青光眼患者外侧膝状体的形态改变情况。方法选取单眼晚期视功能损害的原发性开角型青光眼患者6例(青光眼组)及性别、年龄匹配的正常对照者8例(对照组),均行外侧膝状体的3.0T磁共振成像扫描,测量外侧膝状体的最大高径和体积。比较青光眼组及对照组杯盘比、视网膜神经纤维层(retinalnervefiberlayer,RNFL)厚度、视野平均缺损值及对比分析青光眼组及对照组外侧膝状体各相关指标的统计学差异。结果所有受试者外侧膝状体均可清晰成像。青光眼组右侧外侧膝状体最大高径、体积分别为(4.52±0.57)mm、(104.80±21.10)mm3,左侧为(4.30±0.26)mm、(101.50±27.70)mm3,差异均无统计学意义(t=0.850,P=0.415;t=0.235,P=0.819)。正常对照组右侧外侧膝状体最大高径、体积分别为(5.14±0.35)mm、(136.80±14.40)mm3,左侧为(4.98±0.31)mm、(141.90±16.80)mm3,差异均无统计学意义(t=0.665,P=0.510;t=0.141,P=0.888)。青光眼组双侧外侧膝状体最大高径及体积均较正常对照组减小(均为P<0.05);杯盘比、RNFL厚度差异有显著统计学意义(均为P<0.001),而视野平均缺损值差异无统计学意义(P=0.143)。结论原发性开角型青光眼单眼视功能损害的患者中枢损伤可累及双侧外侧膝状体,二维最大高径及三维体积均明显萎缩,3.0T磁共振成像可以清晰显示这个变化,从影像学角度加深对青光眼中枢损伤的认识。

猫外侧膝状体年龄相关性形态学变化

目的比较青年猫与老年猫外侧膝状体(lateral geniculate nucleus,LGN)神经元及γ-氨基丁酸(gama-aminobutyric acid,GABA)能神经元的年龄相关性变化,探讨老年个体视觉功能衰退的相关神经机理。方法Nissl染色示猫外侧膝状体分层结构(A、A1、C3层)及神经元,免疫组织化学法示GABA免疫阳性神经元。光镜下观察、拍照,Nissl染色切片测量外侧膝状体各层厚度、神经元胞体直径并计数神经元数量;免疫组化染色切片测量外侧膝状体各层中GABA阳性神经元胞体直径并计数GABA阳性神经元数量。结果青年猫及老年猫外侧膝状体各层厚度、神经元数量及胞体直径无明显改变(P>0.05);与青年猫相比,老年猫外侧膝状体各层中GABA阳性神经元数量及胞体直径均有不同程度的显著下降(P<0.01),且GABA免疫阳性反应减弱。结论在动物个体衰老进程中,外侧膝状体总体神经元保持相对稳定可能对老年个体维持视觉功能具有一定意义;老年个体外侧膝状体GABA能神经元对视觉信息传递及整合过程的抑制性调节功能削弱,可能是外侧膝状体水平上导致老年个体视觉功能衰退的原因之一。

小鼠外侧膝状体主要蛋白的蛋白组学鉴定

目的:用蛋白组学鉴定小鼠外侧膝状体内的主要蛋白。方法:提取小鼠外侧膝状体的蛋白质,通过二维凝胶电泳分离蛋白,用PDQuest图像分析软件选择电泳图谱中的高含量蛋白,用MALDI TOF/TOF串联质谱仪分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS软件在Mascot数据库中检索并鉴定蛋白质,并用Western-blotting进一步验证鉴定的蛋白。结果:在小鼠外侧膝状体共鉴定了33种主要蛋白,其中结构蛋白5种,代谢酶21种,转运蛋白3种,信号转导蛋白2种,应激蛋白1种,未命名蛋白1种。Western-blotting验证的蛋白与质谱仪鉴定的结果一致。结论:本结果为该区域蛋白质的研究提供实验资料。

神经生长因子对单眼剥夺大鼠外侧膝状体nNOS表达的影响

目的观察单眼剥夺大鼠神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)治疗前后外侧膝状体背核(dorsal lateral geniculate nucleus,dLGN)神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元表达的改变。方法健康雄性SD大鼠,随机分为正常组(N)、单眼剥夺组(MD)、单眼剥夺脑室内注射NGF组(MD+NGF)和注射生理盐水组(MD+NS),每组随机分为2个亚组。剥夺自14 d龄开始,分别于28、42 d龄处死,脑室注射分别于14、28 d龄开始。采用SABC免疫组织化学染色法观察dLGNnNOS阳性神经元的表达。结果nNOS阳性神经元在dLGN散在分布,单眼剥夺和年龄增长可致其阳性神经元数密度降低。N组及MD+NGF组分别与MD组和MD+NS组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。42 d龄处死大鼠dLGN阳性神经元数密度N组与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4组42 d龄与28 d龄比较,dLGN阳性神经元数密度均有显著下降(P<0.05)。结论视觉发育具有可塑性,弱视治疗具有时效性。在视觉发育敏感期内,外源性提供NGF,可以促进dLGNnNOS增多,从而拮抗剥夺效应。

S100蛋白与GFAP在猫外侧膝状体表达的年龄相关性变化

目的比较青年猫与老年猫外侧膝状体(lateral geniculate nucleus,LGN)星形胶质细胞(astrocyte,AS)中S100蛋白与胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的年龄相关性变化,探讨导致相关变化的原因及其在动物视觉功能衰老中的意义。方法免疫组织化学方法(SABC法)示S100蛋白阳性细胞及GFAP阳性细胞。光镜下观察、拍照,计数外侧膝状体各层中S100蛋白阳性细胞及GFAP阳性细胞数量。结果与青年猫相比,老年猫外侧膝状体各层中S100蛋白与GFAP表达均有不同程度的显著增强(P<0.01)。结论动物视觉衰老进程中,外侧膝状体星形胶质细胞存在着明显的反应性胶质化(reactive gliosis),这种胶质化与老年动物视觉功能之间关系将在文中讨论。

右美托咪定对前额叶皮层、初级视觉皮层及外侧膝状体视觉诱发电位的影响

目的研究右美托咪定(Dex)对前额叶皮层(PFC)、初级视觉皮层(V1)及外侧膝状体(LGN)视觉诱发电位的影响。方法成年雄性Wistar大鼠12只,通过手术将电极植入PFC、V1和LGN 3个脑区。实验中,腹腔注射不同剂量Dex(10、30、90μg/kg)和同等容量的生理盐水(对照组),并给予4种感觉刺激(视觉、听觉、触觉、痛觉),比较不同条件下PFC感觉诱发电位。之后,随机腹腔注射不同剂量Dex(10、30、90μg/kg)、可乐定(Clo:0. 1、0. 2、0. 5 mg/kg)及Dex+Clo(10. 0μg/kg+0. 1 mg/kg、30μg/kg+0. 2 mg/kg、90μg/kg+0. 5 mg/kg),并用生理盐水作对照,记录并比较PFC、V1和LGN 3个区域在不同条件下的视觉诱发电位。结果在PFC,Dex对视觉诱发电位的潜伏期和波幅的影响呈剂量依赖性关系,剂量越大,潜伏期越长,波幅越大;不同剂量Dex对听觉诱发电位的峰值没有明显影响;激光痛觉诱发电位在不同剂量Dex作用下,其N1成分的幅度都明显降低,而N2成分的幅度则表现为剂量依赖性增大。Clo联合Dex时可逆转单独应用Dex对视觉诱发电位的改变。在V1,不同剂量Dex对视觉诱发电位波幅无显著影响,不同剂量Clo在V1对视觉诱发电位也无影响。Dex和Clo对LGN的视觉诱发电位都没有影响。结论 PFC视觉诱发电位的幅度随着Dex剂量增加而增大,暗示下丘脑的腹外侧视前区(VLPO)很可能是Dex脑内重要的作用靶点。

糖尿病大鼠脑外侧膝状体神经元退行性变及APP17肽的作用

目的 通过观察糖尿病大鼠外侧膝状体神经元超微结构改变和神经元内凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Cyto C的表达,证实糖尿病大鼠是否存在脑内视觉传导通路外侧膝状体神经元退行性改变,APP17肽对其是否有改善作用。方法 用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发糖尿病模型,10周后取脑组织行Bax、Bcl-2、Cyto C的免疫组化染色,同时取外侧膝状体处脑组织作电镜观察。结果 糖尿病组外侧膝状体腹侧核内Bax、Cyto C阳性反应神经元数目多、染色深,Bcl-2三组间无明显差异,APP17肽治疗组的Bax、Bcl-2、Cyto C的表达接近正常组。超微结构发现糖尿病组神经元有固缩、核膜凹陷、线粒体肿胀等退行性变,给予APP17肽后上述改变明显好转。结论 糖尿病大鼠发生了外侧膝状体神经元的退行性改变,神经元可能处于凋亡前状态;APP17肽可改善糖尿病大鼠外侧膝状体神经元的退行性改变。

减弱视神经电活动大鼠脑外侧膝状体区iNOS表达的实验研究

目的：观测减弱视神经电活动后外侧膝状体核团诱生型一氧化氮合酶的表达，探讨其可能的意义。方法：采用眼球摘除、眼内注射河豚毒素（Ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ，ＴＴＸ）减弱视神经电活动，运用还原型辅酶二－硫辛酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ，ＮＤＰ）组化染色及诱生型一氧化氮合酶（Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎ－ｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）原位分子杂交方法观察外侧膝状体ｉＮＯＳ表达。结果：两种方式减弱视神经电活动后，外侧膝状体核均出现不同程度的ｉＮＯＳ表达。结论：减弱视神经电活动后。

P物质在单眼剥夺性弱视猫外侧膝状体中的表达

目的 检测 SP在单眼剥夺弱视猫 L GN中的表达 ,并探讨其在弱视发病中的意义。方法 采用免疫组化 APA法 ,对 7例正常猫和 8例单眼剥夺弱视猫 L GN SP免疫阳性神经元及神经纤维进行定位并定量研究其变化。结果 在单眼剥夺猫剥夺侧 L GN的A1层 SP表达显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 单眼剥夺可造成剥夺侧 L GN剥夺眼相应输入层次的 SP表达下降 。

大鼠外侧膝状体中继神经元HRP示踪结合谷氨酸免疫组织化学研究

采用 HRP逆行追踪结合谷氨酸免疫组织化学方法观察大鼠外侧膝状体背侧核 (d L GN)中继神经元的化学递质。光镜下 HRP标记细胞与谷氨酸免疫阳性细胞清晰可辩。HRP单标记细胞位于外侧膝状体背侧核内 ,胞浆及树突基部充满棕色颗粒。免疫金银法 (IGSS)单标记的谷氨酸免疫阳性神经元分布于外侧膝状体背侧核与腹侧核 ,胞体内充满黑色银颗粒。在外侧膝状体背侧核内可见 HRP和谷氨酸双标记细胞 ,其数目占 HRP标记细胞总数的 70 .9± 6 .4%。本文提示 ,谷氨酸可能是外侧膝状体背侧核投射至视皮质的中继神经元的神经递质之一。

人外侧膝状体的血液供应及其临床意义

目的:为外侧膝状体(LGB)缺血所致的视野缺损提供形态学依据。方法:手术显微镜下观察成人和胎儿脑的LGB动脉的来源和微血管构筑,部分脑标本用组织切片方法观察营养LGB动脉的粥样硬化病理改变。结果:LGB营养动脉第一级来自颈内动脉和大脑后动脉,二级为脉络丛前动脉、脉络丛后外动脉和丘脑膝状体动脉,三级构成LGB的小动脉。50岁以上的标本,LGB 的一、二级动脉有硬化改变的占88%,二级小动脉被阻塞占10%。结论:二级动脉在LGB内有各自的供血区,脉络丛前动脉是供应IGB前部和外侧部的唯一动脉,大脑后动脉营养LGB的其余部分。不同动脉的阻塞可导致不同种类的视野改变,是视野缺损的原因之一。

猫外侧膝状体腹核至上丘和顶盖前区的定位投射——HRP法

本文采用HRP方法观察了猫外侧膝状体腹核至上丘和顶盖前区的定位投射,HRP注射在上丘深层后,可见同侧较吻端的外侧膝状体腹核内侧部腹侧半的许多细胞被标记,这些细胞成团分布,多为圆形或卵圆形。注射在吻端顶盖前区以后,二侧较尾端的外侧膝状体腹核外侧部的细胞被标记,以对侧为主。注射至尾端顶盖前区(部分扩散至上丘)后,同侧较尾端的外侧膝状体腹核外侧部腹侧半的细胞被标记。与注射于上丘者相比,细胞密度较低,亦为圆形或卵圆形,提示外侧膝状体腹核至上丘或顶盖前区的投射具有较明显的局部组构关系。

肝郁证大鼠外侧膝状体NMDAR1基因表达的实验研究

目的:分析肝郁证大鼠外侧膝状体N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型1(NMDAR1)基因表达的变化,探讨视路疾病肝郁证的微观机制。方法:慢性不可预知温和应激法(CUMS)建立肝郁证大鼠模型,利用体质量测量、旷场实验、糖水偏好实验评价模型造模成功后,运用原位杂交法检测实验大鼠外侧膝状体中NMDAR1基因表达情况。结果:与正常对照组比较,肝郁证模型组大鼠外侧膝状体中NMDAR1基因表达面积、平均光密度、积分光密度均显著增高(P<0.05)。结论:肝郁是导致外侧膝状体损伤的重要因素,其作用机制可能是通过过度激活NMDAR1受体,介导细胞兴奋性毒性作用来实现的,这为从肝论治视路疾病提供了理论依据。

幼儿外侧膝状体及视皮质微血管的形态学

目的:探讨幼儿外侧膝状体及视皮质微血管构筑的形态结构。方法:采用8例幼儿外侧膝状体及视皮质,经碱性磷酸酶染色,组织切片,光镜观察。结果:幼儿视皮质(17区)后1/3的微血管密度最高,前1/3次之,中1/3最低。外侧膝状体后2/3的微血管密度高于前1/3。视皮质内动脉多数以直角、少数以锐角发自软脑膜动脉。视皮质内静脉数量明显少于动脉。静脉属支汇入处可见一三角形膨大,且深层微静脉粗,浅层微静脉细。结论:幼儿外侧膝状体及视皮质相对应区域微血管同步发育。皮质微静脉的这种结构特点可能是皮质微静脉栓塞的因素之一。