短暂脑缺血对大鼠海马脑区锥体神经元外向整流氯通道功能的影响

目的研究短暂前脑缺血对大鼠海马CA1和CA3脑区锥体神经元外向整流氯通道功能的影响。方法采用膜片钳全细胞技术,在成年大鼠海马脑区锥体神经元上记录到可以被氯通道阻断剂DIDS阻断,具有外向整流特性的氯通道。结果 15min前脑缺血再灌注6h和24h后,海马CA1区锥体神经元氯通道电流持续性增强,而CA3区锥体神经元活动无明显改变。结论氯通道功能增强可能参与海马CA1区锥体神经元在脑缺血后的迟发性死亡过程,并且为治疗缺血性脑损伤提供了新的手段。

氧化还原对成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯通道的调控作用

采用膜片钳内面向外式记录技术,研究急性分离成年大鼠海马CAl区锥体神经元外向整流氯离子通道的氧化还原调控。发现细胞内侧给予氧化剂DTNB(5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid),可显著减弱氯通道的活动,IC50值为(28.05±2.42)μmol/L;还原剂DTT(dithiothreitol)对氯通道没有明显影响,但可逆转DTNB引起的抑制效应。说明DTNB不改变通道电导,其引起的通道活动减弱是由氯通道关闭时间延长而开放时间缩短所致。研究还发现,另一对氧化型和还原型谷胱甘肽具有与DTNB和DTT同样的效应。本研究结果显示,成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯通道可以被细胞内氧化还原剂所调控。

异丙酚抑制容积敏感外向整流性氯离子通道减少低渗时星形胶质细胞释放谷氨酸的研究

目的在原代培养的星形胶质细胞中观察研究异丙酚对低渗所致谷氨酸释放的影响及其与容积敏感外向整流性氯离子通道活动的关系。方法将原代培养的星形胶质细胞暴露于低渗溶液(渗透压:210mOsm/kgH2O),以膜片钳记录容积敏感外向整流性阴离子通道活动和异丙酚(100μg/ml)对通道电流的影响;以荧光光度仪测量细胞外液中谷氨酸浓度的变化情况,观察比较异丙酚和容积敏感外向整流性氯离子通道特异性阻滞剂DCPIB对其影响。结果相对于等渗对照组,在45min的观察期间,低渗溶液组细胞外液中的谷氨酸浓度明显增加,在15min左右达到峰值,随后略有下降,该下降趋势可被谷氨酸转运体的特异抑制剂TBOA(100μmol/L)所取消;异丙酚(100μg/ml)可以有效地抑制容积敏感外向整流性氯离子通道活动;异丙酚和DCPIB对细胞外液中谷氨酸浓度变化的影响无显著差异。结论在低渗条件下,异丙酚可能通过抑制容积敏感外向整流性氯离子通道活动而减少星形胶质细胞的谷氨酸释放。

容积敏感外向整流性氯离子通道在肿瘤中研究进展

离子的跨膜运输受多种离子通道的调节,氯离子作为最主要的细胞外阴离子,与肿瘤发生、发展密切相关[1-3].容积敏感外向整流性(volume-sensi-tive outwardly rectifying,VSOR)氯离子通道是一种广泛表达于脊椎动物细胞和多种肿瘤细胞胞膜上的氯离子通道,其包含8A富含亮氨酸的重复序列(leucine-rich repeat containing 8A,LRRC8A)及其4个同源家族成员(LRRC8B-E),组装成约800 kDa的VSOR通道复合物.此外,VSOR氯离子通道的组成蛋白LRRC8 A和LRRC8 D可通过各种信号途径参与癌细胞的增殖、迁移、死亡和多药耐药性.现就VSOR氯离子通道与癌症发生和发展相关的发现作一综述,以期为VSOR氯离子通道作为癌症治疗新靶标提供依据.