尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达和血清中白细胞介素2水平的研究

为研究尖锐湿疣 (CA)患者外周血淋巴细胞 (PBL C)凋亡调控蛋白表达水平和血清中白介素 2 (IL- 2 )水平在 CA免疫发病机制中的作用。采用流式细胞仪及间接免疫荧光素标记法和 EL ISA法 ,检测了 6 0例不同病程 CA患者PBL C凋亡调控蛋白 Fas/Fas- L 的表达水平和血清中 IL- 2水平。发现 CA短病程组 PBL C的 Fas、Fas- L 表达水平均明显高于健康对照组 (P<0 .0 5 ) ,而 CA长病程组 PBL C的 Fas、Fas- L 表达水平明显高于 CA短病程组 (P<0 .0 5 )和健康对照组 (P<0 .0 1) ,短、长病程组 CA患者血清 IL- 2的水平明显低于健康对照组 (P<0 .0 1) ,CA患者 PBL C Fas/Fas-L 表达水平与血清中 IL- 2的水平呈负相关 (P<0 .0 1)。结果表明 :CA患者 PBL C有凋亡异常 ,并且与血清中 IL- 2的水平呈负相关 ,患者 PBL C凋亡异常在

糖皮质激素诱导特发性血小板减少性紫癜患儿外周血淋巴细胞凋亡的体外研究

为探讨糖皮质激素对儿童急性特发性血小板减少性紫癜 (AITP)外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用 ,对 6例初诊儿童 AITP外周血淋巴细胞进行糖皮质激素、糖皮质激素受体拮抗剂 (RU486 )等体外干预培养 ,用流式细胞术检测细胞凋亡 ,以凋亡率为定量指标 ,用 DNA电泳对细胞凋亡进行定性分析。结果显示 :糖皮质激素组的淋巴细胞凋亡率明显高于对照组和经 RU486预处理组 ,具有显著性差异 ;糖皮质激素组细胞的 DNA电泳呈现清晰的“梯状”(ladder)条带 ,而对照组和 RU486预处理组均未出现 ,提示糖皮质激素可诱导淋巴细胞凋亡 ,这一作用可被其受体拮抗剂阻断 ,说明糖皮质激素诱导

二期梅毒患者外周血淋巴细胞凋亡及其免疫表型的研究

目的:观察二期梅毒患者外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡及其免疫表型,探讨二期梅毒患者免疫功能异常与淋巴细胞凋亡的关系。方法:采用流式细胞仪检测33例二期梅毒患者和30例正常人PBLC免疫表型与细胞凋亡。结果:梅毒患者外周血Th细胞及Th/Ts比值明显低于对照组(P<0.01),而Ts细胞则显著高于对照组(P<0.01)。B淋巴细胞两组间的差异无显著性(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4+细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),CD8+及CD19+细胞凋亡率两组比较差异无显著性(P>0.05);梅毒患者PBLC凋亡率与CD4+细胞及CD4+/CD8+比值呈显著负相关(r=-0.675,P<0.01;r=-0.782,P<0.01),CD4+细胞凋亡率与CD4+细胞数呈显著负相关(r=-0.813,P<0.01)。结论:二期梅毒患者存在细胞免疫功能抑制,其细胞免疫功能异常可能与淋巴细胞凋亡过度有关。

肠道部分缺血再灌注损伤诱发外周血淋巴细胞凋亡

目的：观察肠道部分缺血再灌注(I/R)损伤过程中外周血淋巴细胞凋亡及其在植物血凝素(PHA)刺激下增殖能力的变化。方法：大耳白兔55只,分为肠部分I/R组、假手术对照组、正常对照组,用自行设计的血流阻断器阻断SMA血流50%,维持4h,制作肠道部分缺血再灌注损伤动物模型。采用流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)测定外周血淋巴细胞凋亡变化,采用免疫组织化学方法观察外周血淋巴细胞caspase-3蛋白的表达,采用MTT比色法测定外周血淋巴细胞增殖能力。结果：肠道缺血期外周血淋巴细胞凋亡率明显升高,肠道再灌注期后外周血淋巴细胞凋亡比例骤然减少；外周血淋巴细胞caspase-3表达与凋亡改变呈相同趋势；肠部分I/R损伤后外周血淋巴细胞增殖能力明显降低。结论：肠道部分I/R损伤后,外周血T-淋巴细胞增殖功能明显受抑,外周血淋巴细胞凋亡变化与细胞内caspase-3的表达有关。

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量关系的研究

探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量的关系。分别采用流式细胞计数仪和荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率与血清HBVDNA。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,且与血清HBVDNA水平呈正相关。

2-氯化腺苷对致痫大鼠外周血淋巴细胞早期凋亡的影响

目的研究2-氯化腺苷对惊厥大鼠外周血淋巴细胞早期凋亡的影响。方法在Wistar大鼠腹腔注射马桑内酯诱发大鼠惊厥发作,制作癫痫模型。将30只Wistar大鼠随机分为3组,A组:致痫组10只;B组:致痈+2-氯化腺苷组10只(0.6mg/kg);C组:致痫+生理盐水组10只。采用流式细胞仪观察比较A,B,C组外周血淋巴细胞早期凋亡率的变化。结果1.致痫后6小时,12小时,24小时大鼠外周血淋巴细胞凋亡率低于致痫前,经统计学处理,均有显著性差异(P<0.01)。2.致痫后各时间点给予2-氯化腺苷组淋巴细胞凋亡率高于致痫组及生理盐水组淋巴细胞凋亡率,经统计学处理,均有显著性差异(P<0.01)。结论 2-氯化腺苷诱导致痫大鼠外周血淋巴细胞凋亡。

小柴胡汤的酚类代谢物体外诱导人肺成纤维细胞和外周淋巴细胞凋亡

据报道,小柴胡汤提取剂(TJ-9)治疗的慢性肝损害病例中出现多例间质性肺炎,且当TJ-9与干扰素(IFN-α)同时使用时,发生间质性肺炎的病例数增多。研究表明TJ-9和IFN-α体外抑制肺成纤维细胞增殖,增加IL-6产生。

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL的表达情况。方法分离活动期SLE患者(SLE组)19例和正常者(健康对照组)10例的外周血淋巴细胞，在植物血凝素(PHA)刺激72h后，采用流式细胞仪检测其凋亡及：Fas、FasL的表达。结果SLE组患者外周血淋巴细胞凋亡率明显高于健康对照组(P<0．01)，Fas表达明显多于健康对照组(P<0．01)，FasL表达与健康对照组差异不明显(P>0．05)。结论SLE患者外周血淋巴细胞存在凋亡及凋亡相关蛋白表达的紊乱。

Apo2.7抗体原位标记法在原发性肝癌病人外周血淋巴细胞凋亡检测中的应用价值

目的 探讨Apo2.7抗体原位检测细胞凋亡的应用价值。方法 采集42例原发性肝癌病人和37例健康人的 外周血,分离外周血淋巴细胞后,分别采用Apo2.7抗体原位检测法和流式细胞仪检测细胞凋亡,并将结果进行比较。结果 原发性肝癌病人Apo2.7抗体原位检测外周血淋巴细胞凋亡率为(12.4±1.2)%,流式细胞仪检测细胞凋亡率为(12.1± 0.7)%,2种方法检测外周血淋巴细胞凋亡率无显著性差异(t=1.43,P>0.05),但均明显高于对照组(P<0.01)。结论 Apo2.7抗体原位检测法可替代流式细胞仪用于检测外周血淋巴细胞的凋亡;原发性肝癌病人淋巴细胞凋亡率高于正常人。

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与HBVDNA及Th1/Th2类细胞因子的关系

研究活化诱导的外周血单核细胞凋亡 (AICD)在乙型肝炎慢性化中的作用以及与HBVDNA和Th1/Th2的关系。分离 2 5例慢性乙型肝炎患者与 10例健康人外周血单个核细胞 (PBMC) ,在PHA的刺激下培养 ,经流式细胞仪检测凋亡 ,ELISA检测细胞因子IFN -γ、IL - 4、IL - 10。经过PHA诱导的PBMC凋亡率乙型肝炎组明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。在慢乙肝组中 ,随着HBVDNA的上升 ,凋亡比率升高 ,IL - 4与凋亡成正相关 ,有统计学差异(P <0 0 0 1)。AICD可能在乙型肝炎感染慢性化与形成免疫耐受过程中起到重要作用 ,HBVDNA与AICD有关 ,IL

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡的研究进展

系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosis，SLE）是一种自身免疫性炎症性疫病。研究证实，SLE患者的外周血淋巴细胞（penpheralbloodlymphocyte，PBL）凋亡率增加，且机体对凋亡细胞清除障碍，未被清除的凋亡物质获得免疫原性，形成自身抗原，诱发了自身免疫反应，导致SLE的发病。现结合相关文献对SLE患者PBL凋亡异常及其机制研究进展作如下综述。

化疗中腹水癌细胞及外周血淋巴细胞凋亡的定量检测和临床意义

目的 探讨化疗对腹水癌细胞及外周血淋巴细胞凋亡率及凋亡因子Fas因子表达的影响。方法 从 39例恶性腹水中提取富含癌细胞的悬液 ,并从外周静脉血提取淋巴细胞 ,比较化疗前后癌细胞的凋亡。用AnnexinV FITC/PI双染法分辨凋亡细胞及坏死细胞 ,并以Fas因子单克隆抗体标记上述细胞 ,均用流式细胞仪检测。结果 化疗后腹水癌细胞凋亡率及Fas表达显著性高于化疗前 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ;化疗后外周血淋巴细胞凋亡率及Fas因子增加的程度不同。结论 该方法能检测及分辨出凋亡细胞与坏死细胞 ,有助于判断化疗效果 。

HIV/AIDS患者外周血淋巴细胞凋亡与CD4+T淋巴细胞水平的临床实验研究

人类免疫缺陷病毒(HIV)感染和AIDS已严重威胁着人类的健康并在全球范围内呈现出迅速蔓延的趋势.HIV侵入人体后可在感染细胞内复制并将其遗传物质整和于寄生细胞内,造成CD4+T淋巴细胞数量进行性减少,继而损害细胞免疫功能并最终导致各种机会性感染和肿瘤.有关HIV/AIDS者外周血淋巴细胞凋亡及与CD4+T淋巴细胞计数间关系的相关研究仍处于探索阶段,鉴于此,本文采用流式细胞技术初步探讨了HIV/AIDS者外周血淋巴细胞凋亡的损伤特点及其与CD4+T淋巴细胞水平的相互关系,现将结果报告如下.

过敏性紫癜患儿急性期淋巴细胞凋亡与血清可溶性Fas和FasL变化的关系

目的 探讨过敏性紫癜 (HSP)患儿急性期外周血淋巴细胞凋亡与血清可溶性Fas (sFas)、可溶性FasL(sFasL)水平变化及其相互关系。方法 选择HSP患儿及健康儿童各 3 3例。分别应用形态法、间接免疫荧光法、双抗夹心ABC ELISA法检测外周血淋巴细胞凋亡率、CD2 5+细胞百分率及血清sFas及sFasL水平。结果 HSP患儿急性期外周血淋巴细胞培养 0、48h凋亡率均显著高于正常对照组 (P均 <0 0 1) ;HSP组培养 48hCD2 5+细胞百分率显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,HSP患儿外周血淋巴细胞培养 48h凋亡率与CD2 5+细胞百分率呈负相关 (r =- 0 .61 P <0 0 5 ) ;血清sFas及sFasL水平较正常对照组明显升高 (P均 <0 0 1) ;HSP患儿外周血淋巴细胞培养 48h凋亡率与sFasL水平呈正相关 (r =0 .69 P <0 .0 5 ) ,与sFas水平呈负相关 (r =- 0 .5 8 P <0 0 5 )。结论 HSP患儿外周血淋巴细胞凋亡过度和血清sFas、sFasL水平升高 ,与患者免疫功能紊乱关系密切。

过敏性紫癜急性期患儿淋巴细胞凋亡特征的研究

为探讨过敏性紫癜 (HSP)患儿急性期外周血淋巴细胞凋亡特征及其与 T淋巴细胞免疫应答活性的相关性 ,选择 HSP患儿及健康儿童各 33例 (HSP组及对照组 ) ,分别应用形态法、间接免疫荧光法检测外周血淋巴细胞凋亡率、T淋巴细胞亚群及 CD+ 2 5细胞百分率。结果 HSP组急性期外周血淋巴细胞培养前及培养、4 8小时凋亡率均显著高于对照组 (P均 <0 .0 1) ;外周血 CD+ 4细胞百分率及 CD+ 4/ CD+ 8均明显低于对照组 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;培养 4 8小时 CD+ 2 5细胞百分率显著低于对照组 (P<0 .0 1) ;培养 4 8小时淋巴细胞凋亡率与 CD+ 2 5细胞百分率呈负相关 (P<0 .0 5 )。认为 HSP患儿外周血淋巴细胞凋亡过度 ,此与其

肺癌患者外周血细胞凋亡与化疗关系的研究

目的探讨肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞凋亡变化,以判断化疗疗效。方法采用流式细胞术分析方法,用罗丹明123检测细胞凋亡时线粒体膜电位的变化,对34例肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞凋亡进行检测,并以36例健康体检者作正常对照。结果肺癌患者化疗前外周血淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.05),且与病理类型无关(P>0.01),但与肿瘤临床分期有明显相关性(P<0.01),化学治疗后凋亡率明显增高(P<0.01)。而在化疗结束后4周左右再检测,则凋亡率又几乎恢复到化疗前的水平,与化疗结束时相比差异显著(P<0.01),29例有肿瘤观察指标的肺癌患者经化疗后,有效病例23例,有效率为79.3%。结论化学治疗能诱导肺癌细胞的凋亡,显著改善肺癌患者的预后。细胞凋亡检测对探讨肺癌的发生发展,病情判断及指导化疗有重要的临床价值。

构建体外联合培养条件下抗原诱导淋巴细胞反应的抑制模型

目的:观察在体外混合培养条件下,抗原能否诱导外周淋巴细胞反应抑制,建立体外淋巴细胞反应抑制模型。方法:实验于2003-10/2004-04在解放军第四军医大学西京医院心脏外科研究所实验室进行。取健康自愿者新鲜血液用于分离外周淋巴细胞。在体外条件下,以同种异体外周淋巴细胞分作供体和受体进行混合培养,采用四甲基偶氮唑盐比色法、电镜、姬姆萨-瑞氏染色、流式细胞仪检测对照组D组:首次混合培养淋巴细胞(PMLC),即受体淋巴细胞(R)+用丝裂霉素处理过的供体淋巴细胞(DBm)混合培养72h所得,A组(PMLC+DBm)、B组(PMLC+白细胞介素2中和单抗)、C组(PMLC+DBm+白细胞介素2中和单抗)等4组淋巴细胞的活性变化、活性变化的原因及其数量的变化。结果:①4组混合培养淋巴细胞在电镜、显微镜下变化:均可见细胞质染色浓集、核固缩裂解、凋亡小体形成。②四甲基偶氮唑盐比色法检测4组细胞活性即刺激指数:B组和C组比A、D组明显减弱(3.152±0.322,1.802±0.115,4.293±0.269,3.709±0.278,P<0.05);C组细胞活性比B组也明显减弱(P<0.05)。③流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率:单向混合淋巴细胞培养后的T淋巴细胞的凋亡率Bf组和Cf组高于Df对照组和Af组(11.25±0.78)%,(31.65±1.33)%,(5.95±0.24)%,(2.15±0.04)%,P<0.01;

高功率微波对小鼠免疫组织淋巴细胞影响的初步研究

目的：观察不同强度高功率微波(HPM)对小鼠免疫组织和外周血淋巴细胞的影响及其作用机制。方法：应用TUNEL和FCM(Annexin—V/PI双标法)技术研究小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和外周血淋巴细胞凋亡的发生规律。结果：①10～30mW/cm^2 HPM辐照后,C57小鼠外周血WBC出现降低,而淋巴细胞凋亡率明显升高,与WBC的变化呈较好的对应关系,且在0～15mW/cm^2内呈一定的剂量效应关系。②照后7d,C57小鼠免疫组织淋巴细胞凋亡率均出现明显升高,而在0～15mW/cm^2范围内与辐照剂量呈一定的量效关系。③不同剂量辐照后3d,129小鼠免疫组织淋巴细胞凋亡率均出现明显升高,而以脾组织淋巴细胞凋亡率与剂量呈一定的量效关系。淋巴结经15mW/cm^2辐照后3、7和14 d,其凋亡率的升高与照后时间显示一定的时效关系。结论：虽然对非热效应的生物学影响及其机制仍存在争议,然而本研究结果明确指出,微波对机体免疫机能影响的非热效应还是比较明显的,有关机制尚需进一步阐明。

系统性红斑狼疮细胞凋亡相关基因及细胞因子研究进展

系统性红斑狼疮（SLE）是一种常见的典型自身免疫性疾病，以自身抗体产生和免疫复合物形成为特征，可引起多器官损害。近年来研究发现，SLE患者外周血淋巴细胞凋亡水平异常，可引起机体内多种自身抗体产生，形成免疫复合物沉积，因此推断细胞凋亡可参与SLE的发病机制。本文就参与该过程的相关基因做一综述。