弱精子症患者精子外周致密纤维2基因及蛋白的表达

目的:探讨弱精子症患者精子中外周致密纤维2(ODF2)mRNA及蛋白的表达水平,比较ODF2在健康男性与弱精子症患者中的表达差异。方法:根据WHO第5版,收集身体健康无疾病正常男性精液(n=15)和弱精子症患者精液(n=45)共60份,利用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精子统计,将弱精子症分为轻、中、重度3组,采用实时定量PCR和Western印迹对4组标本进行ODF2基因的表达量研究。结果:与正常组相比,轻度弱精子症组精子中ODF2基因表达无明显统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.6880±0.3720,P>0.05);中度弱精子症组ODF2基因表达降低,有显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.4833±0.1863,P<0.05);重度弱精子症组ODF2基因表达明显降低,有极显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.448 3±0.3408,P<0.01)。Western印迹中ODF2的OD值(ODF2/β-actin)在正常组和轻、中、重度弱精子症组分别为:0.4587±0.0521、0.3261±0.0714、0.1454±0.0536和0.1227±0.0457,与正常组相比,轻度弱精子症组无明显统计学差异(P>0.05),中度弱精子症组有显著的统计学差异(P<0.05),重度弱精子症组有极显著的统计学差异(P<0.01)。结论:ODF2基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调与精子活动力下降有密切联系,呈正相关性,提示ODF2基因可能参与精子活力的调控。

外周致密纤维2与精子功能关系的研究进展

弱精子症、畸形精子症是导致男性不育的主要原因,而精子尾部结构的异常和功能的缺失会导致精子活力低下。外周致密纤维2(ODF2)是哺乳动物精子尾部的组成部分,是维持细胞结构的骨架蛋白,因此,该纤维蛋白的异常与精子功能异常密切相关。研究显示,ODF2有许多同名蛋白和同源剪切体,出现在如精子中心体、卵裂胚的纺锤体等部位,也是动物纤毛发生所必需的;同时,ODF2也是微管相关蛋白,与精子获能有关,说明其并非单一的结构蛋白。本文对ODF2蛋白已知的多种功能进行了描述,为进一步系统研究ODF2与精子功能及受精的相关性奠定基础。

ODF2基因敲减对小鼠精子活力和生育力的影响

目的:探讨外周致密纤维蛋白2(ODF2)基因敲减对小鼠精子活力和生育力的影响。方法:构建了3个携ODF2目的基因的基因敲减腺病毒载体及一个空载对照载体。感染ICR小鼠后,通过RT-PCR和Western印迹实验从3个目标载体中确定敲减效果最佳的载体。用此载体感染小鼠,分析基因敲减小鼠多项精子运动参数、睾丸组织病理以及小鼠产仔情况。结果:用敲减效果最佳的载体感染小鼠发现,基因敲减小鼠的精子多项运动参数显著低于正常对照组,睾丸组织生理结构出现异常,产仔数与对照组比较下降明显[(10.86±1.28)只vs(12.72±2.05)只,P=0.001]。结论:ODF2基因表达减少的确会造成小鼠精子多项运动参数异常、睾丸生理结构异常和生育力下降。