系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞及中性粒细胞p16基因甲基化状态研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)及中性粒细胞(PMNL)的p16基因甲基化状态,探讨其在SLE发病中的作用。方法:采用甲基化特异的PCR方法对25例活动期SLE患者PBMC及PMNL的p16基因甲基化状态进行分析,并与21名健康者进行对照。结果:SLE患者PBMCp16基因甲基化阳性率为76.0%(19/25),对照组为47.6%(10/21),两者比较差异有统计学意义(P<0.05);两组PMNLp16基因甲基化率分别为54.3%(12/25)和45.7%(11/21),差异无统计学意义(P>0.05)。在PBMCp16基因高甲基化的SLE患者中,IgG升高者占78.9%(15/19),与该细胞系p16基因甲基化阴性的SLE患者IgG平均水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患者PBMCp16基因甲基化明显异常,IgG升高与之相关,p16基因高甲基化可能在SLE的发病中起一定的作用。

卡介菌多糖核酸对寻常型银屑病患者外周血单一核细胞产生干扰素-γ和白细胞介素-4的影响

目的探讨卡介菌多糖核酸对寻常型银屑病患者外周血单一核细胞(PBMCs)产生干扰素-γ、白细胞介素-4的影响。方法用ELISA法各检测30例来源于正常对照组、银屑病组及卡介菌多糖核酸组外周血单一核细胞培养上清液中IFN-γ和IL-4的量。结果卡介菌多糖核酸组IFN-γ水平明显低于银屑病组而高于正常对照(P<0.05),IL-4水平在三组间无明显差异(P>0.05)。结论卡介菌多糖核酸可通过降低IFN-γ的水平而对银屑病起到治疗作用。

性激素对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响及其意义

研究脱氢表雄酮(DHEA)和(或)雌二醇(E2)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)凋亡的影响。应用吖啶橙(AO)染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与生理、病理浓度的DHEA和(或)E2培养48h的凋亡百分率。SLE患者PBMC凋亡率高于健康献血员(P<0.01)。不论生理或者病理浓度的E2对SLE患者、健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05)。生理浓度的DHEA及DHEA+E2对健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05),但可显著抑制SLE患者PBMC凋亡(P<0.05);病理浓度的DHEA及DHEA+E2可显著促进SLE患者、健康献血员PBMC凋亡(P<0.05)。DHEA及DHEA+E2对PBMC凋亡的影响,两者间无显著差异(P>0.05)。结果提示,DHEA对SLE患者PBMC凋亡起重要作用;DHEA浓度降低可能导致凋亡加快。

雷公藤对系统性红斑狼疮外周血单一核细胞NF-κB活性的影响

目的探讨雷公藤治疗系统性红斑狼疮(SLE)的免疫作用机制。方法采用电泳迁移率试验(EMSA)检测SLE患者雷公藤治疗前后和正常对照组外周血单一核细胞(PBMC)中NF-κB活性,同时对活动期SLE患者PBMC用雷公藤处理,比较其NF-κB活性变化。结果SLE患者和正常对照组均有一定量的NF-κB活化,但SLE患者NF-κB活性明显高于正常对照组(P<0.01),且活动期又明显高于非活动期(P<0.05)。经雷公藤处理后,活动期SLE患者NF-κB活性显著降低(P<0.01),与非活动期SLE患者相当(P>0.05),但仍明显高于正常对照组(P<0.05)。结论SLE的发病机制复杂,雷公藤可能仅在某些环节抑制了NF-κB的表达,在SLE治疗中发挥其免疫抑制作用。

CGRP对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响

目的 探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单一核细胞（PBMC）凋亡的影响。方法 应用流式细胞仪膜联蛋白（Annexin）V／碘化丙啶（propidineiodide，PI）染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与不同浓度的CGRP和（或）CGRP的受体拮抗剂CGRP8-37培养48h的凋亡百分率。结果 SLE患者PBMC凋亡率显著高于健康献血员（P〈0．001）．不同浓度（0.5×10^-8～1．5×10^-8moL／L）的CGRP对健康献血员PBMC凋亡无影响（P〉0．05）；但可以不同程度的抑制SLE患者PBMC的凋亡（P〈0．05～0．001）；当CGRP浓度超过1.0×10^-8moL／L时，其对SLE患者PBMC凋亡的抑制效应进入平台，增加CGRP浓度并不能进一步显著抑制SLE患者PBMC地凋亡。无论何种浓度的CGRP均不能使SLE患者PBMC的凋亡率降低至正常范围内。CGRP8-37本身对PBMC凋亡无影响（P〉0.05），但是可以桔抗CGRP对SLE患者PBMC凋亡的影响。结论 CGRP通过受体影响PBMC地凋亡；CGRP浓度地降低在某种程度上可导致SLE患者PBMC地凋亡加快。

当归多糖对银屑病患者外周血单一核细胞NF-κB及IFN-γ的影响

目的:确定体外当归多糖对银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)与角质形成细胞(KC)NF-κB表达及IFN-γ分泌的影响。方法:将正常人KC+银屑病患者PBMC混合培养(A组),正常人KC和正常人PBMC混合培养作为作对照(B组)。当归多糖作用于两组,采用Western Blot检测混合细胞中NF-κB的蛋白表达水平。双抗体夹心ELISA法检测培养上清液中IFN-γ的水平。结果:A组混合培养体系中NF-κB p65蛋白表达水平及上清液中IFN-γ水平明显高于B组(P<0.01);经当归多糖作用后,A组混合培养体系中NF-κB p65蛋白表达水平及上清液中IFN-γ水平较处理前降低(P<0.05),而B培养体系中NF-κB p65蛋白表达水平及上清液中IFN-γ水平较处理前升高(P<0.05)。结论:当归多糖可能通过抑制NF-κB活化、减少IFN-γ分泌,对银屑病治疗发挥作用。

芦荟对银屑病患者外周血单一核细胞产生干扰素-γ的影响

目的探讨芦荟对银屑病患者外周血单一核细胞(PBMCs)产生干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法采用双抗体夹心ELISA法,检测芦荟对银屑病患者PBMCs或Colo-16细胞培养,及对银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养产生的IFN-γ的含量变化。结果芦荟对银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养产生的IFN-γ含量有明显的抑制作用,P<0.01;而对银屑病患者PBMCs或Colo-16细胞培养产生的IFN-γ的含量没有抑制作用。结论芦荟在银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养时,才能抑制IFN-γ的产生。为进一步研究芦荟外用治疗银屑病提供药理作用依据。

SLE患者外周血单一核细胞CD43基因的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)免疫功能异常与CD43分子基因的关系。方法采用反向聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)CD43基因的表达进行检测。结果SLE患者与正常人PBMC均检测到CD43基因的表达,且前者的表达水平为0.8662±0.3992,高于后者的0.3451±0.3310,有非常显著性差异(t=7.109,P<0.01)。结论活动期SLE患者PBMC的CD43基因表达水平显著升高,导致淋巴细胞免疫功能异常。

银屑病患者外周血单一核细胞中趋化因子受体CXCR1及CXCR2 mRNA的表达

目的:探讨银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)中CXC型趋化因子受体CXCR1及CXCR2的表达水平及其临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测了进行期斑块状银屑病患者33例及其中16例患者治疗后PBMC中CXCR1及CXCR2 mRNA的表达,设30名健康人作为正常对照,并将检测结果与患者皮损面积及严重程度指数(PASI)进行了相关性分析。结果:斑块状银屑病患者PBMC中CXCR2 mRNA表达水平为1.38±0.87,明显高于健康人对照组0.73±0.58,治疗后患者1.21±0.62仍高于健康对照组(P<0.05);CXCR1 mRNA表达水平为0.26±0.28,与健康对照组及同一组患者治疗后相比均无明显差异,分别为:0.17±0.26,0.27±0.31(均P>0.05);银屑病患者PBMC中CXCR2 mRNA水平高于CXCR1 mRNA水平,二者均与PASI之间无明显相关性。结论:CX-CR2可能参与了银屑病的发病机制。

慢性特发性荨麻疹患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5 mRNA的表达

目的:检测慢性特发性荨麻疹(CIU)患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5mRNA的表达。方法:收集45例CIU患者,38名正常人作为对照,采集PBMC提取RNA,应用逆转录聚合酶链扩增法检测Toll样受体2和5mRNA表达水平。结果:CIU患者外周血单一核细胞Toll样受体2mRNA表达水平低于健康对照组,分别为0.302±0.243和0.81±0.364(P<0.01)。Toll样受体5mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义,分别为0.558±0.342和0.722±0.350(P=0.035)。结论:CIU患者外周血单一核细胞Toll样受体2和5mRNA表达显著降低,提示CIU患者可能存在固有免疫异常。

当归饮子对人外周血单一核细胞增殖的影响

采用MTT比色法测定当归饮子水煎剂对人外周血单一核细胞增殖功能的影响.结果显示,10^(-1)～10^(-7)mg/ml范围内的当归饮子能单独或协同PHA发挥促进人外周血单一核细胞增殖的作用。

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CX3CR1趋化因子受体mRNA的表达

目的:探讨趋化因子受体CX3CR1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达,及其与疾病活动的相关性。方法:收集93例确诊的SLE患者和30例正常人的PBMC,提取RNA。应用RT-PCR方法检测CX3CR1mRNA表达水平,并与疾病活动度评分(SLEDAI)作直线相关性分析。结果:①CX3CR1 mRNA在PBMC中的表达水平,活动期(3.735±0.557)与非活动期(0.530±0.045),两者差异有统计学意义(t=2.606,P=0.01);非活动期与对照组(0.146±0.02)间的差异有统计学意义(t=5.831,P=0.000);患者组(2.819±1.347)与对照组间的差异有统计学意义(t=3.921,P=0.000)。②SLE患者组CX3CR1 mRNA水平与疾病活动度评分(SLEDAI)呈正相关(r=0.445,t=4.523,P<0.001)。③不具有血管炎、肌炎、肾损及血小板减少的患者与具有上述相应临床特征的患者比较,CX3CR mRNA表达水平更高,差异具有统计学意义。结论:CX3CR1mRNA表达水平在活动期SLE比非活动期增高,与疾病的活动性(SLEDAI)呈正相关。CX3CR1可能反映疾病的活动性、参与特异器官受累的发生。

天疱疮患者外周血单一核细胞IL-6受体TNFα受体mRNA的表达

目的:研究天疱疮患者外周血单一核细胞(PBMCs)促炎性细胞因子受体mRNA的表达及其意义。方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对37例寻常型天疱疮患者及30例健康对照者PBMCs上IL-6受体、TNFα受体mRNA进行检测。结果:所有天疱疮患者及健康对照者均可检测到IL-6受体及TNFα受体mRNA,IL-6受体mRNA表达量在患者组与对照组之间无显著性差异,TNFα受体mRNA的表达量在患者组为0.50±0.19,对照组为0.22±0.10,患者组的表达量显著高于对照组(P<0.001)。结论:天疱疮患者PBMCs的TNFα受体mRNA表达升高,可能在天疱疮的发病机制中起一定的作用。

梅毒血清固定患者外周血单一核细胞CD40和CD40L的表达

近年来梅毒患者血清固定（sero-resistance）发病率显著增高，梅毒血清固定的确切原因目前尚不清楚，认为与机体细胞免疫功能受抑制有关。本研究对梅毒血清固定患者外周血单一核细胞（PBMC）中CIM0和CD40L的表达进行检测，探讨CD40和CD40L与梅毒血清固定的关系。

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞趋化因子受体2和3mRNA的表达

目的:探讨趋化因子受体(CCR)2及CCR3在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达及与疾病的相关性。方法:对93例SLE患者和30名健康对照者,应用半定量逆转录(RT)-PCR方法检测其CCR2、CCR3mRNA表达水平,并应用SLE疾病活动性指数评分标准(SLEDAI)对SLE患者进行评分。结果:①9例SLE患者活动期、非活动期及对照组PBMCCCR2与CCR3mRNA表达水平分别为2.989±1.595与2.847±2.400、0.388±0.213与0.585±0.219、0.263±0.157与0.602±0.124,活动期与非活动期、对照组相比差异均有显著性(P值分别为0.013,0.004;0.000,0.007);非活动期与对照组相比差异无显著性(P>0.01)。②SLE患者PBMC中CCR2、CCR3mRNA表达水平与SLEDAI分别作直线相关性分析,CCR2mRNA、CCR3mRNA水平与SLEDAI均呈正相关。③具有肌炎临床表现的SLE患者其PBMCCCR2、CCR3表达水平较无肌炎表现时降低。血小板减少的SLE患者比不具有相应症状者CCR2mRNA表达降低。结论:SLE患者PBMCCCR2、CCR3表达均增加,且与疾病活动性呈正相关,而CCR2、CCR3为表达于Th2细胞的趋化因子受体,提示SLE患者Th2细胞占优势。CCR2可能参与SLE患者肌炎及血小板减少的发生,CCR3参与肌炎发生。

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞核小体释放水平及其临床意义

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)释放核小体的水平变化及其与自身抗体、病情活动度的关系。方法应用ELISA方法检测SLE患者PBMC裂解上清液核小体及其血清自身抗体水平,用SLEDAI积分法评估SLE活动度。结果活动期SLE患者PBMC释放核小体的平均水平为(39.39±25.70)IU/mL,明显高于正常人对照组(11.73±7.87)IU/mL和静止期SLE患者(13.44±8.82)IU/mL,并且与其凋亡率呈显著正相关(r=0.83,P<0.001);SLE患者PBMC的核小体释放水平与SLEDAI积分数、ds鄄DNA抗体水平和补体C3降低水平均呈显著正相关(P值分别<0.01、0.01和0.05)。结论SLE患者PBMC凋亡产生的核小体水平变化与SLE临床病情活动程度密切相关,提示核小体可能是诱导SLE发病的重要抗原之一。

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞Toll样受体4及2mRNA表达的研究

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者与正常人外周血单一核细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA、TLR2mRNA的表达情况。方法运用Taqman实时定量PCR方法检测活动期SLE患者28例、稳定期SLE患者13例外周血单一核细胞TLR4、TLR2的mRNA表达水平,并与正常人作对照。结果活动期SLE患者外周血单一核细胞TLR4mRNA较正常人和稳定期SLE患者表达水平显著升高(P<0.01);其中复发的、经糖皮质激素治疗的活动期SLE患者较未经治疗的初发患者TLR4mRNA升高更明显(P<0.05)。SLE活动期和稳定期患者TLR2mRNA较正常人对照显著降低(P<0.01)。结论活动期SLE患者TLR4mRNA表达水平升高,尤其是使用过糖皮质激素的患者TLR4升高更为显著,其原因可能与感染作为诱发SLE活动因素之一有关。

斑块状银屑病外周血单一核细胞p16基因甲基化状态的研究

目的探讨银屑病患者外周血单一核细胞p16基因甲基化状态。方法采用甲基化特异的聚合酶链反应对34例斑块状银屑病患者和35例正常人外周血单一核细胞p16基因甲基化状态进行分析,银屑病的严重程度按PASI评分评估。结果斑块状银屑病外周血单一核细胞p16基因甲基化率高于正常人,差异有统计学意义(P<0.05),但单一核细胞p16基因甲基化状态对疾病的严重程度和病程无明显影响(P>0.05)。结论斑块状银屑病外周血单一核细胞p16基因甲基化率明显增高,在银屑病的发病机制中可能起某些作用。