外周血游离胎儿DNA检测(NIPT)在产前唐氏筛查中的应用价值

探究外周血游离胎儿DNA检测(NIPT)在产前唐氏筛查中的应用价值。方法 本文观察对象为DS高风险孕妇共1580例,收取时间段在2022年1月至2024年5月,对所有孕妇均进行外周血游离胎儿DNA检测(NIPT),并开展唐氏筛查、羊水穿刺-核型检查,对各项检查结果进行分析。结果 NIPT诊断的灵敏度、特异度、准确度分别为96.00%、99.68%、99.62%;阳性预测值、阴性预测值分别为82.76%、99.94%,结果 和高于唐氏筛查诊断结果(诊断的灵敏度、特异度、准确度分别为68.00%、99.09%、98.61%;阳性预测值、阴性预测值分别为56.67%、99.42%)相比更高(χ2=4.787、4.289、9.225、4.735、4.920;P<0.05)。NIPT检测结果阳性为15例,胎儿染色体异常的发生概率为0.95%,其中13-三体综合体的检出人数一共2例、18-三体综合体的检出人数一共4例、21-三体综合体的检出人数一共9例,与金标准对比,诊断符合率分别为100.0%、100.0%、100.0%。结论 在产前唐氏筛查中应用外周血游离胎儿DNA检测(NIPT),能使产前有创诊断数量得以减少,并且还能使诊断准确率得以提升,将新生儿出生缺陷率大大降低,优化人口出生质量,与此同时还可减少不必要的胎儿流失,值得研究和推广。

孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测假阳性结果影响因素分析

目的探讨孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测假阳性结果的影响因素。方法回顾分析2015年1月—2021年6月,在南京鼓楼医院产前诊断中心因孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测(简称NIPT)阳性的651例孕妇进行产前诊断的结果,选择其中10例NIPT结果假阳性的病例采集孕妇外周血和胎盘样本行进一步测序分析。结果651例行羊膜腔穿刺产前诊断的病例中,357例为真阳性,其中204例是21-三体高风险、49例是18-三体高风险、7例是13-三体高风险、97例是性染色体高风险;294例为假阳性,包括21-三体高风险41例、18-三体高风险33例、13-三体高风险40例、性染色体高风险180例。选择4例21-三体高风险假阳性、2例18-三体高风险假阳性、4例性染色体高风险假阳性,共10例病例进行追踪检查,病例1(P1)在21号染色体上存在重复区域;病例2(P2)患有系统性红斑狼疮,而且在X染色体上存在重复区域;病例9(P9)在妊娠31周时提示可能存在胎儿生长受限;病例3(P3)、病例4(P4)、病例5(P5)、病例6(P6)和病例7(P7)的胎盘样本中发现限制性胎盘嵌合。病例8(P8)和病例10(P10)胎盘样本及外周血结果均无异常。结论限制性胎盘嵌合和母体因素是可能造成NIPT假阳性的主要因素。因此NIPT仍然是一种筛查试验,不能作为侵入性产前诊断的替代方法。

基于高通量测序的孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测的失败率及原因分析

目的 对孕妇外周血胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA,cffDNA)无创产前检测的失败原因及妊娠结局进行分析,探讨检测失败病例的处理方案。方法 对5898例妊娠12~22周的单胎孕妇进行外周血cffDNA检测,设定严格的质控标准,首次检测不达标者在知情同意后选择二次采血或直接进行产前诊断。结果 首次采血检测失败率为0.5%(32/5898),其中17例cffDNA%未达质控标准,10例两次建库检测均提示染色体数据波动,5例可能存在无法鉴别的性染色体异常。32例首次采血检测失败的病例中,2例直接接受了羊水细胞染色体核型分析,结果均未见异常;30例接受了重新采血,其中24例在二次采血后发放了检测报告,最终失败率为0.1%(8/5898)。二次采血共报告21三体、18三体、13三体高风险各1例,经羊水细胞染色体核型分析证实均为假阳性。6例二次采血检测失败病例中,1例产前诊断未见异常;1例产前诊断为mos45,X[32]/46,XY[18];4例未进行产前诊断,目前生长发育未见异常。结论 cffDNA比例低是检测失败的主要原因,但二次采血成功率较高,可有效增加最终检测成功率,减少侵入性检测数量,首次检测失败的孕妇在充分知情的前提下可考虑重新采血检测。

外周血胎儿游离DNA检测在无创性产前诊断中的价值

目的:探讨孕妇外周血胎儿游离DNA无创性产前检测在诊断胎儿非整倍体中的价值。方法:选择2017年1月—2017年12月本院行外周血胎儿游离DNA无创产前检测和羊水穿刺胎儿染色体核型分析的孕妇616例,以羊水穿刺结果为金标准,判断无创产前检测的准确率。结果:胎儿游离DNA无创性产前检出胎儿染色体非整倍体高风险11例,其中21-三体高风险5例,18-三体高风险3例,13-三体高风险1例;性染色体非整倍体高风险2例。羊水染色体核型分析共检出染色体非整倍体12例,其中21-三体5例,18-三体3例,13-三体1例,性染色体非整倍体3例,总体符合率91.7%。胎儿游离DNA无创性产前检测胎儿非整倍体的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为91.7%、100.0%、100.0%、99.8%、99.8%、95.0%,ROC曲线下面积为0.958(95%CI:0.867～1.000)。结论:无创性胎儿游离DNA检测可有效检出胎儿染色体非整倍体,是一种可靠的产前检测方法。但不排除存在假阳性及假阴性的可能。

孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测发现胎儿48,XXYY综合征一例

目的报告一例由孕妇外周血胎儿游离DNA产前检测发现的48,XXYY综合征。方法对胎儿游离DNA产前检测结果提示胎儿性染色体异常的孕妇进行羊水染色体核型分析和羊水微阵列染色体比较基因组杂交技术检测,同时对孕妇及其丈夫取外周血进行染色体核型分析,以确认胎儿性染色体异常的来源情况。结果孕妇染色体核型为46,XX,1qh+;丈夫染色体核型为46,XY;胎儿染色体核型为48,XXYY。结论无创产前基因检测技术可通过孕妇外周血中胎儿游离DNA提示胎儿性染色体异常,结合羊膜腔穿刺行羊水染色体核型分析及微阵列染色体比较基因组杂交技术检测完成产前诊断,该模式有利于罕见型胎儿染色体异常的发现与诊断,可及时开展相应的遗传咨询。

9470例孕中期高危孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前检测结果分析

目的探讨孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前检测(Non-invasive prenatal testing,NIPT)在胎儿染色体非整倍体疾病(21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征)产前筛查中的应用和价值。方法选择于2017年7月至2020年7月在济南市妇幼保健院进行外周血NIPT的孕妇9470例,将检测结果与胎儿染色体产前诊断技术标准(染色体核型分析结果或出生随访结果作为“金标准”)进行对照,对检测的阳性符合率、阴性符合率、总符合率和一致性系数Kappa(K)值进行评价。结果9470例有效病例(均有完整的NIPT检测结果及“金标准”对照结果)中,阳性病例69例,其中T21阳性38例,T18阳性17例,T13阳性13例,T21和T18双阳性1例。“金标准”结果阳性42例,其中T21阳性35例,T18阳性7例,T13阳性0例。总体阳性预测值为60.87%(95%CI:48.37%~70.40%),阴性预测值为100.00%(95%CI:99.96%~100.00%),总符合率为99.71%(95%CI:99.59%~99.80%),Kappa值=0.76(95%CI:0.67~0.84)。结论孕妇外周血胎儿游离DNA NIPT与产前诊断技术或出生随访作为“金标准”对比结果有较好的一致性,其总体准确性和有效性符合临床实际应用的需求。

外周血胎儿游离DNA无创产前检测诊断染色体异常及假阳性原因分析

目的:探究外周血胎儿游离DNA无创产前检测(NIPT)诊断染色体异常及假阳性原因。方法:2016年7月—2019年12月本院行NIPT单活胎孕妇10236例,对NIPT提示异常者行羊膜腔穿刺胎儿染色体核型分析,评价NIPT对染色体异常诊断价值。选取NIPT假阳性而羊水穿刺核型分析正常且孕妇选择继续妊娠分娩孕妇,于新生儿出生后同时取胎盘组织和母血样本进行DNA测序分析。结果:10236例孕妇NIPT检测染色体异常111例(1.1%)。其中21-三体异常34例(30.6%)、18-三体异常20例(18.0%)、13-三体异常17例(15.3%)、性染色体异常35例(31.5%),其他染色体异常5例(4.5%)。NIPT检测提示异常者行羊膜腔穿刺检测复核,其中确诊92例(92/111,82.9%),未见异常19例(19/111,17.1%),总假阳性率为0.2%(19/10236)。NIPT对21-三体、18-三体、13-三体、性染色体的检测符合率分别为94.1%、90.0%、76.5%、74.3%。19例NIPT假阳性中12例胎盘组织检测与NIPT结果一致,5例母血检测与NIPT结果一致,另有2例无法确定NIPT假阳性原因。结论:NIPT在产前胎儿染色体异常诊断中具有较高检出率,但不排除假阳性可能。胎盘中异常游离DNA进入母血、母血已有异常游离DNA及孕周不足是导致NIPT假阳性的主要原因。

孕妇外周血中胎儿游离DNA在产前诊断中的应用

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创性产前诊断开辟了一条新途径。检测孕妇血浆中特异的胎儿DNA序列已被用于胎儿性连锁疾病鉴定、RhD血型检查和多种单基因遗传病的产前诊断;游离DNA水平的变化还可被用作某些妊娠相关疾病如先兆子、早产和胎儿染色体疾病的临床诊断新指标。本文对母体外周血中胎儿游离DNA的生化特征及其临床应用研究,进行了总结和分析。

改良QIAamp法检测孕妇外周血中胎儿游离DNA-STR多态性

1997年研究者在一孕男胎孕妇血浆中成功地扩增出Y染色体特异性序列，从而证实了孕妇血浆中胎儿游离DNA的存在，这一发现提出了孕妇血浆中的游离胎儿DNA在产前诊断中应用的可能性。随后，许多学者在这一方向进行了研究和探讨，但大多都围绕着孕男胎孕妇血浆DNA中Y染色体的研究。

2019年北京市孕妇外周血胎儿游离DNA检测现状分析

目的了解2019年北京市孕妇外周血胎儿游离DNA筛查、产前诊断及妊娠结局的情况。方法采用描述性统计学方法分析2019年北京市8家产前诊断机构孕妇外周血胎儿游离DNA筛查及诊断情况。结果2019年北京市8家产前诊断机构共进行外周血胎儿游离DNA检测65136例,占产妇总数的29.8%(65136/218396)。21\18\13-三体综合征检测复合阳性预测值为57.4%(152/265),21-三体检测阳性预测值为76.0%(117/154),18-三体检测阳性预测值为38.9%(28/72),13-三体检测阳性预测值为18.0%(7/39),性染色体检测阳性预测值为30.5%(85/279),其他染色体检测阳性预测值为16.4%(30/183)。65136例患者中,适用人群筛查10791例,占16.6%;慎用人群筛查53833例,占82.7%;不适用人群筛查343例,占0.5%。追访发现1例21-三体和1例18-三体假阴性患者。21\18\13-三体综合征检出率为98.7%(152/154),其中21-三体检出率为99.2%(117/118),18-三体检出率为96.6%(28/29),13-三体检出率为100%(7/7)。非侵入性产前检查(NIPT)高风险孕妇产前诊断率为84.6%(615/727),其中21\18\13-三体综合征的产前诊断率为91.7%(243/265)。结论孕妇外周血胎儿游离DNA检测已成为21-三体综合征筛查的重要手段之一,在临床应用中应严格掌握检测指征,重视检测前后的遗传咨询,提高产前诊断率,同时加强实验室质控,提高检测质量。

孕妇外周血胎儿游离DNA的检测及应用研究

从1997年首次在孕妇外周血中发现胎儿DNA以来,众多学者致力于将其应用于无创性的产前诊断。荧光定量PCR实现了胎儿游离DNA浓度的检测,目前研究发现,正常孕妇血浆胎儿DNA浓度稳定于某一水平,有望成为产前诊断和孕期检测的一项新指标。有学者认为,子痫前期母循环中胎儿DNA可有异常增高,而且子痫前期的孕妇在有临床症状前,孕妇血浆胎儿DNA水平异常增高,这与较多胎儿DNA释放到母血中,和肝肾功能异常导致胎儿DNA在母血中清除紊乱有关。此外许多妊娠合并症和并发症都伴有母外周血DNA水平的异常增高,例如:性连锁疾病、Rh血型不合、父系遗传性疾病、染色体非整倍体胎儿、早产等。现就孕妇外周血胎儿游离DNA的检测及临床应用作一综述。

孕妇血浆中胎儿游离DNA检测在唐氏综合征产前诊断中的应用价值分析

目的:分析孕妇血浆中胎儿游离DNA检测在唐氏综合征(DS)产前诊断中的应用价值。方法:选取2022年2月—2024年2月于溧阳市妇幼保健院进行产前检查的孕妇80例进行研究,根据检查结果分为参照组(单胎正常妊娠,n=48)和研究组(怀有DS胎儿,n=32)。孕妇均进行外周血血浆胎儿游离DNA和mRNA检测,采用荧光定量聚合酶链式反应检测DYS14基因水平及胎盘生乳素基因、绒毛膜促性腺激素β基因、组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)、21-三体综合征危象区基因4(DSCR4)基因mRNA水平,以临床综合诊断结果为“金标准”,分析DYS14基因及相关基因mRNA对DS的诊断效能。结果:研究组DYS14基因水平高于参照组(P<0.001)。研究组胎盘生乳素基因mRNA水平低于参照组,绒毛膜促性腺激素β基因、TFPI-2及DSCR4 mRNA水平高于参照组(P<0.05)。绒毛膜促性腺激素β基因、TFPI-2、DSCR4 mRNA对DS的诊断效能均较高,其中TFPI-2mRNA的诊断效能最高。结论:孕妇血浆中胎儿游离DNA检测在DS产前诊断中的应用价值较高,可作为临床诊断DS的辅助检查指标。

孕中期高危孕妇外周血中胎儿游离DNA与高危产前诊断指征相关性分析

目的分析孕中期高危孕妇外周血中胎儿游离DNA(Cell-free fetal DNA,cffDNA)与高危产前诊断指征相关性。方法研究对象为2018年7月-2019年7月在遂宁市中心医院产前诊断中心接受外周血cffDNA筛查的3176例孕中期高危孕妇,记录高危产前诊断指征、cffDNA检测结果,分析不同高危产前诊断指征的孕中期高危孕妇外周血cffDNA筛查结果,以染色体核型检查结果为对照,分析孕中期高危孕妇外周血中cffDNA的筛查价值。结果3176例孕中期高危孕妇的产前诊断指征分别为高龄(年龄≥35岁)33.63%(1068/3176)、血清学筛查临界风险31.30%(994/3176)、血清学筛查高风险18.29%(581/3176)、不良孕产史2.90%(92/3176)、B超软指标异常2.39%(76/3176)、B超提示胎儿结构异常0.22%(7/3176)、其他11.30%(359/3176)。cffDNA检查结果显示57(1.79%)例孕妇外周血cffDNA检查结果为高风险,以B超提示胎儿结构异常的孕妇外周血cffDNA检测高风险相对比例最高,为28.57%,血清学筛查高风险(2.75%)、不良孕产史(2.17%)、高龄(1.97%)、血清学筛查临界风险(1.21%)、其他(1.12%)。57例孕妇外周血cffDNA高风险患者中,56.14%的孕妇染色体核型分析染色体核型异常,cffDNA高风险预测21三体的准确率最高(82.60%)。结论孕中期高危孕妇外周血中cffDNA与高危产前诊断指征存在一定关系,孕中期开展外周血cffDNA筛查期较高的灵敏度、特异度,具有无创、准确率高的特点,尤其是对T21的筛查具有较高的准确度。

孕妇外周血中胎儿游离DNA及RNA在产前诊断中的研究进展

孕妇外周血中胎儿游离DNA的发现,为无创伤性产前诊断提供了一条新途径。通过对胎儿游离DNA的检测,可以诊断胎儿性连锁性疾病,胎儿非整倍体病,RhD血型和妊娠相关性疾病。相对于胎儿游离DNA而言,胎儿游离RNA由于在血浆中具有极强的稳定性,且是非性别依赖性的胎儿核酸物质,大大扩展了临床检测范围,它将和胎儿游离DNA一起成为未来很有潜力的无创伤诊断方法。

母体外周血胎儿游离DNA检测在孕中期唐氏筛查临界风险非高龄孕妇中的应用价值

唐氏综合征(downs syndrome,DS)是临床常见染色体异常性疾病,患儿的主要临床表现为智力低下、唐氏特殊面容及发育迟缓等[1],因此,在产前及早进行胎儿筛查,寻找积极有效的护理治疗方法,成为人们研究的热点。本次研究主要为母体外周血胎儿游离脱氧核糖核酸(deoxyribo nucleic acid,DNA)检测作用于孕中期唐氏筛查临界风险非高龄孕妇,现报告如下。

无创胎儿游离DNA血型检测在产前诊断中的研究进展

胎儿游离DNA(cell-free fetal DNA,cff-DNA)存在于孕妇妊娠期外周血中,其为携带胎儿相关遗传信息的DNA片段,可以进行胎儿染色体、基因相关疾病筛查。因其操作风险低、无副作用,目前已被广泛用于无创产前诊断检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)。无创cff-DNA血型检测是运用分子生物学检测cff-DNA血型相关基因,得出胎儿血型结果。以此在妊娠期即可检测出胎母血型是否一致,判断胎儿有无发生血型不合所致胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)的风险。

孕妇外周血中游离胎儿DNA在出生缺陷产前诊断中的研究

孕妇外周血中游离胎儿DNA已被广泛应用于非侵入性产前诊断中.本文综述了游离胎儿DNA作为产前诊断可靠指标的理论依据,总结了目前游离胎儿DNA的提取技术、研究方法及临床应用.同时,提出了在这个研究领域中仍面临的困难.

无创产前检测中胎儿游离DNA浓度的影响因素及临床应用研究进展

无创产前检测(Non-Invasive Prenatal Testing, NIPT)自临床应用以来,因其方便快捷、无需侵入的特点于全球迅速开展。胎儿游离DNA浓度(Fetal Fraction, FF)是NIPT的质控参数,同时也可作为预测不良妊娠结局的重要指标。本文旨在分析总结FF的影响因素及与胎盘相关性不良妊娠结局的关系,以期发挥FF在临床应用中的价值。Non-invasive prenatal testing (NIPT) has been rapidly developed worldwide due to its characteristics, including convenience and non-invasive. Fetal fraction (FF) is a parameter of sample quality control for NIPT and can also be used as an important indicator for predicting adverse pregnancy outcomes. This article aims to analyze and summarize the influencing factors of FF and the relationship between FF with placenta-related adverse pregnancy outcomes, in order to exert the value of FF in clinical application.

外周血游离胎儿DNA检测联合唐氏筛查在妊娠中期唐氏综合征胎儿筛查中的应用价值

目的:探讨外周血游离胎儿DNA检测联合唐氏筛查在妊娠中期唐氏综合征胎儿筛查中的应用价值。方法:选取2015年9月~2017年4月在某院进行产前检查的孕中期孕妇1430例,均先行唐氏筛查,对唐氏筛查阳性患者再行外周血游离胎儿DNA检测,统计唐氏筛查结果及外周血游离胎儿DNA检测结果。结果:1430例孕中期孕妇经唐氏筛查,筛查阳性率为7.41%(106/1430);106例高危孕中期孕妇进行外周血游离胎儿DNA检测发现染色体数目异常10例,4例结构异常,检测准确率为100.00%;外周血游离胎儿DNA检测结果显示21-三体综合征2例、18-三体综合征1例、13-三体综合征1例,与染色体核型分析结果符合率均为100.00%。结论:对大样本妊娠中期孕妇进行唐氏筛查可及早发现高危孕妇,对高危孕妇进一步实施外周血游离胎儿DNA检测,可提高诊断符合率。

两重巢式PCR检测母体外周血中胎儿游离DNA

使用两重巢式PCR技术检测母体外周血中胎儿游离DNA，为非损伤性产前鉴定胎儿性别和诊断单基因疾病奠定基础．采用改良的chelex100方法提取60例孕龄为16～36周孕妇的外周血浆中游离胎儿DNA，依据NCBIX染色体长臂ATL1位点，Y染色体上DYS14位点序列，设计并合成引物，用巢式PCR同时扩增2个基因片段，以鉴定胎儿性别．结果表明；有ATL1位点和DYS14位点的扩增产物261bp和198bp鉴定为男性胎儿，而仅有261bp扩增产物鉴定为女性胎儿．均以真实出生性别进行确认后发现，此方法能有效提高检测特异性．两重巢式PCR能够简便并准确地鉴定胎儿性别，对单基因疾病特别是X-连锁遗传病的诊断有积极意义．