正常成人外周血Th1/Th2细胞亚群体外活化的研究

目的 :探讨CD4+ T细胞在体外活化的条件下向Th1或Th2极化的规律。方法 :用Ficoll-Hypaque梯度离心法分离出正常成人抗凝外周血单个核细胞 (PBMC)和血浆 ,将PBMC置于含或不含有自身血浆环境中 ,并在植物血凝素 (PHA ,2 0mg L)的刺激下进行培养 ,培养 2 4、48、72h后收获细胞 ,分别用双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术对CD4+ T细胞表达表面分子CCR3、CCR5进行分析。结果 :CD4+ T细胞受自身血浆和PHA刺激后向Th1 Th2两个方向极化 ,2 4、48、72h后极化率分别达到 (13 2 8± 1 5 9) % (12 70± 1 6 5 ) %、(17 19± 1 0 3) % (17 5 0± 1 30 ) %、(19 49± 2 87) % (18 5 8± 1 49) % ;而只有PHA刺激的极化率很低 ,两组有显著性差异 (P <0 0 1) ;Th1∶Th2之比约等于 1。结论 :正常成人外周血CD4+ T细胞可以在体外自身血浆和PHA的条件下明显极化 ,而且Th1 Th2细胞处于等值的平衡状态。

上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平的变化

目的:探讨上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平.方法:用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,流式细胞仪检测特异性细胞因子表达水平.结果:上皮性卵巢癌患者Thl型细胞因子IL-2,IFN-γ表达水平依次为(9.47±3.56)ng/L,(10.12±2.51)ng/L,而正常对照组依次为(12.20±2.48)ng/L,(13.38±2.89)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);而Th2型细胞因子IL-4,IL-10表达水平依次为(4.56±0.78)ng/L,(5.26±2.27)ng/L,而正常对照组依次为(1.24±0.39)ng/L,(1.46±0.52)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:卵巢癌患者Thl/Th2失调,Th1型反应弱,Th2型反应优,可使肿瘤细胞发生免疫逃逸.

慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征患者外周血Th1/Th2细胞的检测

目的:探讨慢性非细菌性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征(CAP/CPPS)患者外周血Th1/Th2细胞分布的变化情况及其在CAP/CPPS临床分型中的意义。方法:采用流式细胞术检测35例CAP/CPPS患者和12例健康体检者外周血CD3+CD8-T细胞胞内细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达。结果:与正常对照组相比,ⅢA型、ⅢB型CAP/CPPS患者的Th1细胞数均升高,Th1/Th2比值升高,差异有显著性(P<0.05),Th2细胞数差异无统计学意义(P>0.05);ⅢA型与ⅢB型患者比较,Th1、Th2细胞数与Th1/Th2比值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CAP/CPPS患者Th1型反应模式占优势状态,Th1/Th2平衡失调,Th1/Th2平衡向Th1方向变化,提示Th1细胞在CAP/CPPS的病理发生中可能起重要作用。

肺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子及IL-18水平变化与肿瘤分期的关系

目的探讨肺癌患者血清IL-18及TH细胞因子水平与临床肿瘤分期以及与病理分期之间的关系。方法应用ELISA法检测109例肺癌患者血清细胞因子IL-18、Th1(IL-2、TNF-α)及Th2(IL-4、IL-10)水平。30例正常人外周血细胞因子作对照。结果肺癌组IL-18、Th1(IL-2、TNF-α)水平明显低于正常组,Th2(IL-4、IL-10)水平高于正常组(P<0.05);小细胞癌患者的外周血IL-18水平比鳞状细胞癌及肺腺癌水平明显降低(P<0.01);随着肺癌(分期)的加重,其外周血IL-18及Th1细胞因子(IL-2、TNF-α)水平逐渐下降。结论外周血IL-18及TH细胞因子水平能反映患者的免疫功能状态,并可能做为提示预后的指标之一。

孟鲁司特对哮喘患儿外周血Th1/Th2细胞功能平衡的调节作用机制的研究

目的:探讨孟鲁司特的临床疗效及其对哮喘患儿外周血Th1/Th2细胞功能平衡的调节作用机制。方法:将2008年12月～2010年12月我院收治的支气管哮喘患儿78例随机分为治疗组和对照组,每组各39例。两组均给予吸氧、平喘、抗炎、抗感染等基础治疗,其中,治疗组在上述治疗的基础上给予孟鲁司特片4 mg/d,口服,1次/d,连用3个月。观察比较两组治疗前和治疗3个月后IL-4、IFN-γ含量及IFN-γ/IL-4比值的变化,对两组的总有效率进行比较,并观察两组咳嗽、喘息及哮鸣音消失时间。结果:治疗组IFN-γ[(76.16±7.42)ng/L]较对照组[(74.53±7.56)ng/L]明显升高(t=2.42,P<0.05);治疗组IL-4[(41.45±6.61)ng/L]较对照组[(46.57±7.42)ng/L]明显降低(t=2.68,P<0.05);治疗组IFN-γ/IL-4值(1.83±0.42)较对照组(1.56±0.37)明显上升(t=2.13,P<0.05);治疗组的总有效率为92.31%,与对照组相比(74.36%),差异有高度统计学意义(χ2=12.537,P<0.01);治疗组的咳嗽、喘息、哮鸣音消失时间[(2.68±1.15)、(5.19±1.25)、(4.17±1.75)d]均明显短于对照组[(4.43±1.27)、(6.70±1.63)、(6.25±1.64)d],差异有高度统计学意义(t=2.35、2.14、2.41,P<0.01)。结论:孟鲁司特治疗小儿支气管哮喘疗效好,可以明显改善患儿的临床症状与体征,且安全性好,可能与其对支气管哮喘患儿Th1/Th2细胞功能平衡紊乱的调节作用有关。

腹泻型肠易激综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达的分析

目的:分析腹泻型肠易激综合征(IBS)患者外周血Th1/Th2细胞因子失衡表达。方法:连续选择近期就诊的腹泻型IBS患者27例,对照组为31例同龄、同性别的同期健康体检者。两组对象接受了外周血Th相关细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)检测,并计算IFN-γ/IL-4比值。结果:腹泻型IBS组外周血IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显高于对照组,而血清IL-4浓度则显著低于后者(P均<0.05～0.01)。结论:腹泻型IBS患者存在明确Th1优势失衡表达。

CTLA-4 siRNA对慢性乙型肝炎患者外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血淋巴细胞细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T-lympho-cyte antigen 4,CTLA-4)表达的抑制作用及干扰后对细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4分泌的影响,探讨CTLA-4对慢性乙型肝炎的T细胞免疫调节作用。方法:检测CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4,观察其与HBV-DNA的相关性(P<0.05);根据人淋巴细胞CTLA-4的基因序列,设计合成CTLA-4 siRNA及阴性对照siRNA(siR-NA-co),电穿孔法转染CHB患者外周血淋巴细胞,采用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)方法检测淋巴细胞CTLA-4 mRNA的表达,采用Western Blotting检测淋巴细胞CTLA-4蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedim-muno sorbent assay,ELISA)检测IFN-γ、IL-2和IL-4分泌。结果:CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4表达量与血清HBV-DNA载量有关;CTLA-4 siRNA转染CHB患者外周血淋巴细胞后,CTLA-4 mRNA及CTLA-4蛋白表达均受到抑制,IFN-γ、IL-2分泌增加,与阴性对照相比差异具有统计学意义(P<0.01)。而IL-4分泌没有变化,与阴性对照相比差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4表达一定程度抑制免疫反应,利于HBV-DNA的复制;利用siRNA在mRNA水平抑制CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4的表达,能够诱导Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ分泌增加,对Th2型细胞因子IL-4无影响。说明抑制CTLA4有助于慢性乙型肝炎患者T细胞免疫的增强。

地塞米松对反复种植失败患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡的调节作用

目的 探讨地塞米松对反复种植失败(RIF)患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡的调节作用。 方法 选择2017年2~5月在我院生殖中心行辅助助孕RIF患者29例,口服地塞米松治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Th1、Th2细胞亚群比例。 结果 口服地塞米松治疗后,RIF组患者外周血中Th1细胞亚群比例(24.31±7.24)%较治疗前(28.60±7.59)%显著下降(P<0.05),Th2细胞亚群比例无显著性差异(P>0.05)。进一步分析治疗前外周血Th1细胞比例异常升高的RIF患者12例以及Th2细胞异常下降的RIF患者6例,结果显示,口服地塞米松治疗后RIF患者外周血中Th1细胞亚群比例(29.97±6.96)%较治疗前(35.66±4.36)%显著下降,Th2细胞亚群比例(0.80±0.14)%较治疗前(0.61±0.09)%显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 糖皮质激素对于RIF患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡具有调节作用。

外周血Th1/Th2细胞及部分细胞因子对活动性肺结核患者治疗效果的评估价值

目的探讨外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2及部分细胞因子对活动性肺结核(APTB)患者治疗效果的评估价值。方法选取初诊APTB患者和健康体检者各100例作为研究组和对照组,收集2组研究对象的一般临床资料,研究组患者予以6个月标准化抗结核治疗,并于治疗开始后第2、6月随访评估治疗效果;抽取对照组体检者体检日和研究组患者治疗前及治疗后第2、6个月的清晨空腹静脉血,采用流式细胞仪检测外周血Th1、Th2细胞,采用酶联免疫法检测血清干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4及IL-10水平;采用受试者工作(ROC)曲线分析研究组患者Th1/Th2细胞及其细胞因子对APTB患者治疗有效的预测价值。结果治疗前研究组患者外周血Th1、Th1/Th2和血清IFN-γ、IL-2低于对照组(P<0.05),外周血Th2和血清IL-4、IL-10水平高于对照组(P<0.05);与治疗前相比,研究组患者治疗后第2、6月时外周血Th1、Th1/Th2和血清IFN-γ、IL-2升高(P<0.05),外周血Th2和血清IL-4、IL-10水平下降(P<0.05);与无效组比较,有效组APTB患者治疗前外周血Th1、Th1/Th2和血清IFN-γ、IL-2升高(P<0.05),Th2占比和血清IL-4、IL-10水平降低(P<0.05);ROC曲线显示,研究组患者外周血Th1/Th2评估APTB治疗价值的特异度最高(68.37%)、血清IL-4敏感度最高(78.53%),Th1、Th2、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10联合检测预测APTB患者抗结核治疗有效曲线下面积(AUC)为0.913(95%CI为0.546~0.910),敏感度和特异度(86.23%、76.28%)较单项指标检测提高。结论APTB患者机体存在Th1/Th2细胞调节失衡,抗结核治疗有助于Th1/Th2平衡调节,监测外周血Th1/Th2细胞及部分细胞因子可评估APTB临床治疗效果。

化疗对晚期非小细胞肺癌外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的探讨化疗对非小细胞肺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响。方法应用ELISA方法,检测患者化疗前、化疗3个周期后和化疗6个周期后Th1/Th2细胞因子的表达水平。结果晚期非小细胞肺癌患者外周血Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ表达水平低于正常组(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-6和IL-10表达水平显著高于正常组(P<0.05)。化疗3个周期后血IL-2、IFN-γ水平明显高于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05),IL-6和IL-10水平明显低于化疗前(P<0.05)。化疗6个周期后血IL-2、IFN-γ表达水平明显低于化疗3个周期,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗6个周期后血IL-6和IL-10水平稍低于化疗3个周期,差异无统计学意义(P>0.05)。结论晚期非小细胞肺癌患者存在免疫相关因子紊乱,3个周期的化疗对改善机体的免疫平衡有效;6个周期的化疗未能进一步改善机体免疫功能,甚至出现免疫功能恶化。

妊娠期肝内胆汁淤积症外周血Th1/Th2细胞因子表达分析

目的:分析妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)外周血白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平及IFN-γ/IL-4比值变化。方法:连续选择近期入院分娩的23例ICP孕妇,均接受了外周血IL-4I、FN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值等指标检测,并与同期住院正常孕妇20例(对照组)相同测试结果比较。结果:ICP组血清IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显高于对照组,而血清IL-4浓度则显著低于后者(P<0.05～P<0.01)。结论:ICP孕妇存在明确的Th1优势状态表达。

苦参碱预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤外周血Th1/Th2细胞因子影响作用

目的:探讨通过苦参碱预处理后,对大鼠脑缺血再灌注损伤外周血Th1/Th2细胞亚群及其活化的细胞因子的影响作用。方法:建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,将50只SD大鼠随机分为5组,分别为假手术对照组、手术模型组、苦参碱(4mg/kg,8mg/kg,16mg/kg)预处理组。手术前48h,假手术对照组与手术模型组大鼠分别腹腔注射等量的0.9%氯化钠注射液,药物预处理组腹腔注射相应剂量的苦参碱溶液,每日2次,每次2m L,共给药2日。于脑缺血再灌注后4h,8h,16h,24h进行股动脉取血流式细胞仪检测T细胞亚群;分离血清,采用ELISA法检测细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10)。结果:苦参碱各预处理后可明显降低外周血CD4^+T细胞水平降低(P<0.05或P<0.01),升高CD8^+T细胞水平(P<0.05或P<0.01),降低Th1细胞活化的促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)的水平(P<0.01或P<0.05),升高Th2细胞活化的抗炎细胞因子(IL-4、IL-10)的水平(P<0.01或P<0.05)。结论:苦参碱通过调节Th1/Th2细胞亚群,调整后Th1/Th2细胞活化的细胞因子水平,减轻炎症反应,达到脑神经缺血再灌注损伤的保护作用。从而起到对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经细胞保护作用。

不同级别胶质瘤患者术前外周血Th1/Th2细胞因子的表达

目的：分析不同级别脑胶质瘤患者手术前外周血Th1/Th2细胞因子表达变化。方法：选择近期住院的脑胶质瘤患者63例,在治疗前采用ELISA方法进行外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10浓度检测。结果：胶质瘤组外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于对照组,而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者（P〈0.05或P〈0.01）。高级别组（Ⅲ~Ⅳ级）外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于低级别组（Ⅰ~Ⅱ级）,而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者（P〈0.05或P〈0.01）。结论：脑胶质瘤患者可能有Th2优势表达,与恶性程度有一定关系。

复发性自然流产育龄期妇女外周血Th1/Th2细胞因子表达分析

我们观察了21例复发性自然流产（recurrent spontaneousabortion,RSA）育龄期妇女外周血IL-4、IFN-γ表达水平及IFN-γ/IL-4比值变化,并与同期正常怀孕妇女的检测结果比较,现报告如下。

宫颈癌患者HPV感染状况及外周血Th1/Th2细胞因子变化研究

目的探讨宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及外周血Th1/Th2细胞因子变化,分析其在宫颈癌发生及发展中所起的可能机制,为宫颈癌的临床防治提供参考。方法选取80例宫颈癌患者为研究对象(宫颈癌组),选取同期门诊体检的健康女性80例为对照(对照组),采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测宫颈HPV-DNA,应用酶联免疫吸附法检测Th1/Th2细胞因子水平,包括白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-6(IL-6)。结果宫颈癌组70例检出HPV,感染率为87.50%,对照组5例检出HPV,感染率为6.25%,比较差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌组HPV分型60例高危型、10例低危型,分别占85.71%、14.29%,38例单一感染、32例多重感染,分别占54.29%、45.71%,对照组HPV分型0例高危型、5例低危型,分别占0.00%、100.00%,5例单一感染、0例多重感染,分别占100.00%、0.00%,两组HPV分型及感染类型比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组外周血IL-2和IFN-γ、IL-4、IL-6水平分别为(43.08±8.56)pg/ml、(56.15±9.47)pg/ml、(28.55±6.39)pg/ml、(34.29±7.80)pg/ml,明显高于对照组(18.94±4.57)pg/ml、(28.28±7.78)pg/ml、(12.39±3.90)pg/ml、(16.62±3.49)pg/ml,比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组HPV感染患者外周血IL-2和IFN-γ、IL-4、IL-6水平明显高于无HPV感染患者,比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组HPV感染者外周血IL-2和IFN-γ、IL-4、IL-6水平明显高于无HPV感染者,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌患者存在HPV感染率增高及外周血Th1/Th2细胞因子紊乱,HPV感染可加重Th1/Th2细胞因子紊乱,HPV感染及外周血Th1/Th2细胞因子紊乱在宫颈癌的发生发展中可能起到了促进作用。

结缔组织病相关性间质性肺疾病患者外周血Th1/Th2细胞的表达

目的探讨外周血Th1/Th2及细胞因子在结缔组织病相关性间质性肺疾病的表达及意义。方法收集23例正常对照组及28例病理类型为非特异性间质性肺炎(NSIP)的结缔组织病相关性间质性肺疾病(CTD-ILD)患者的外周血单个核细胞及血浆,分别检测PBMC中Th1/Th2的比例及血浆中Th1/Th2及细胞因子的表达情况。结果与正常对照组相比,CTD-ILD患者组Th1比例明显增加,差别具有统计学意义(P=0.04)。而Th2比例明显降低(P=0.000),伴随着Th1/Th2比例的升高(P=0.001)。CTD-ILD患者TNF-α,IFN-γ细胞因子的浓度较正常对照组的血浆浓度均明显增加(P<0.05)。IL-4的浓度较正常对照组的血浆浓度降低(P>0.05)。结论在CTD-ILD患者体内的存在Th1/Th2平衡失调,向Th1方向偏移。

尖锐湿疣人乳头瘤病毒感染与妊娠结局关系及外周血Th1/Th2细胞因子变化

目的:探讨尖锐湿疣人乳头瘤病毒(HPV)感染与妊娠结局关系及外周血Th1/Th2细胞因子变化。方法:回顾性分析2010年2月2020年10月本院收治的122例妊娠期合并尖锐湿疣HPV感染孕妇(HPV组)、121例健康产妇(对照组),分析孕妇血清Th1/Th2细胞因子、分娩方式、妊娠结局。结果:HPV组HPV基因高危型感染77.1%,低危型感染13.1%,混合型感染9.8%;新生儿高危型HPV感染30.3%,低危型4.9%,混合型3.3%。HPV组发生早产、胎膜早破、呼吸窘迫、胎儿生长受限、产后出血率以及Th1、Th1/Th2水平均低于对照组,Th2高于对照组(均P<0.05)。不同HPV感染分型孕妇分娩方式、母婴结局以及Th1/Th2水平均未见差异(P>0.05)。结论:尖锐湿疣HPV感染妊娠女性伴随明显Th1/Th2免疫失衡,且影响妊娠结局,但Th1/Th2免疫失衡和妊娠结局未受HPV感染亚型影响。

系统性红斑狼疮与外周血Th1/Th2细胞平衡的相关性研究

目的 :探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞中Th、Tc细胞亚型比例在SLE进展中的作用。方法 :将SLE患者外周血在细胞刺激剂和蛋白质转运抑制剂作用下培养 ,以流式细胞仪检测Th细胞和Tc细胞亚型。结果 :SLE肾炎患者Th1细胞、Tc1细胞及Th1/Th2比值高于正常对照者 (P<0.05或P<0.01) ,Th2细胞较正常对照者差别无统计学意义 ;SLE患者Th1与SLE疾病活动指数 (SLEDAI)具有相关性 (P<0.05)。结论 :SLE肾炎患者Th细胞发生Th1偏移 ,Th1细胞在系统性红斑狼疮尤其是狼疮肾炎的发生和发展中具有重要作用。