miR-146a调控TLRs信号通路对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞的影响

目的:观察miR-146a调控TLRs信号通路对活动期类风湿关节炎患者外周血单个核细胞的影响。方法:选取20例活动期类风湿关节炎患者,对患者外周血单个核细胞分离培养,分为LPS组和LPS+miR-146a组;同时选取10例健康体检者为健康对照组。采用MTT法测定吸光度,比较外周血单个核细胞变化,检测外周血单个核细胞的凋亡情况。RT-PCR法检测外周血单个核细胞miR-146a、Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)mRNA表达。Western blot法检测外周血单个核细胞miR-146a、TLR2、MyD88蛋白表达。结果:LPS组较健康对照组和LPS+miR-146a组外周血单个核细胞TLR2表达明显升高(P<0.05);LPS组较健康对照组和LPS+miR-146a组外周血单个核细胞中miR-146a、TLR2、MyD88 mRNA表达明显升高(P<0.05);LPS组较健康对照组和LPS+miR-146a组外周血单个核细胞miR-146a、TLR2、MyD88蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:高表达miR-146a可能通过依赖TLR2/MyD88信号通路,抑制活动期类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中TLR2、MyD88表达,减轻炎症反应。

SLE患者外周血单个核细胞中miR-132和miR-212的表达及临床意义

目的分析SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-132和miR-212的表达水平及临床意义。方法提取PBMC中的总RNA,运用茎环逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测24例健康人及48例SLE患者PBMC中miR-132和miR-212的相对表达水平,分析其与临床检验指标的相关性。结果 SLE患者中miR-132相对表达量为1.72±0.071,与健康人对照组0.99±0.037比较,差异有统计学意义(t=-6.881,P=0.000)。健康人和SLE患者miR-212相对表达水平分别是0.99±0.020和1.03(0.982,1.048),差异未见统计学意义(Z=1.302,P=0.197)。相关性分析结果显示,SLE患者中miR-132的表达量与抗双链DNA(dsDNA)抗体以及SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r分别为0.740和0.526,P均<0.05);而miR-212的表达量与抗dsDNA抗体(r=0.106,P=0.474)和SLEDAI(r=0.005,P=0.973)等临床指标无相关性。结论 miR-132在SLE患者PBMC中的表达水平升高,可能参与SLE的致病过程。

miR-212-3p靶向MAPK3调控骨髓间充质干细胞的衰老

背景:骨质疏松症患者的骨髓间充质干细胞表现出明显衰老状态,并且细胞活性及成骨分化水平显著降低。miR-212-3p能够抑制人骨髓间充质干细胞的成骨分化,但其对骨髓间充质干细胞衰老调控的作用及机制尚不明确。目的:研究miR-212-3p通过靶向丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)对骨髓间充质干细胞衰老的影响及其机制。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,收集第3代进行以下实验:①分2组培养:对照组加入完全培养基,造模组加入含H_(2)O_(2)的完全培养基培养,培养72 h后,检测细胞中β-半乳糖苷酶活性、miR-212-3p和MAPK3 mRNA表达,以及MAPK3、p16和p21蛋白表达。②分3组培养:对照组、抑制物对照组、miR-212-3p抑制物组,转染24 h后,检测细胞中miR-212-3p、MAPK3 mRNA表达及MAPK3蛋白表达。③采用双荧光素酶报告基因联合qRT-PCR和Western blot验证miR-212-3p与MAPK3靶向调控作用。④分组培养:分为对照抑制物组、miR-212-3p抑制物组、miR-212-3p抑制物+干扰对照组、miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组,转染24 h后,检测细胞中MAPK蛋白与mRNA表达。分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+对照抑制物组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+干扰对照组、H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组,细胞转染24 h后再加入H_(2)O_(2)培养72 h,检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶活性、p16和p21蛋白表达。结果与结论:①与对照组比较,造模组β-半乳糖苷酶活性、miR-212-3p mRNA表达及p16、p21蛋白表达升高(P<0.05),MAPK3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。②与对照组比较,miR-212-3p抑制物组细胞中miR-212-3p mRNA表达降低(P<0.05),MAPK3 mRNA与蛋白表达升高(P<0.05)。③双荧光素酶报告基因实验证实,MAPK3是miR-212-3p下游靶基因。④与对照抑制物组比较,miR-212-3p抑制物组细胞中MAPK3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与miR-212-3p抑制物组比较,miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组细胞中MAPK3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+对照抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组β-半乳糖苷酶活性降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组β-半乳糖苷酶活性升高(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+对照抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组细胞中p16和p21蛋白表达降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物组比较,H_(2)O_(2)+miR-212-3p抑制物+MAPK3干扰组细胞中p16和p21蛋白表达升高(P<0.05)。⑤结果表明,下调miR-212-3p可抑制大鼠骨髓间充质干细胞衰老,其作用机制可能是通过靶向上调MAPK3表达实现的。

孕妇外周血miR-152 miR-210与子痫前期病情程度及妊娠结局的相关性研究

目的:探究孕妇外周血微小RNA-152(miR-152)、miR-210与子痫前期(PE)病情程度及妊娠结局的相关性。方法:选取2018年7月至2022年5月我院200例PE患者,根据病情严重程度分为轻度组(轻度PE患者,n=114)和重度组(重度PE患者,n=86),另选同期、同年龄段健康孕妇作为对照组(n=100)。比较三组血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、24h尿蛋白定量(24h Upro)、钙离子(Ca^(+))、外周血miR-152、miR-210水平,分析外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro及Ca^(+)相关性。PE患者随访至妊娠结束,比较不同妊娠结局PE患者临床资料、外周血miR-152、miR-210水平,通过Lasso回归和Logistic回归分析预测因素与不良妊娠结局的关联性,通过受试者工作特征曲线(ROC)、临床决策曲线(DCA)评价外周血miR-152、miR-210对预测PE患者发生不良妊娠结局的价值及临床效用。结果:重度组、轻度组、对照组SBP、DBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-152、miR-210水平与PE病情程度、血压、24h Upro呈正相关(P<0.05),与Ca^(+)水平呈负相关(P<0.05);发生不良妊娠结局年龄、流产史、病情程度、SBP、DBP、24h Upro、Ca^(+)、外周血miR-152、miR-210水平与未发生不良妊娠结局患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lasso回归选出5个预测变量为病情程度、SBP、24h Upro、外周血miR-152、miR-210水平;Logistic回归显示,外周血miR-152、miR-210水平是PE患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05);ROC、DCA结果显示,外周血miR-152、miR-210联合预测PE患者发生不良妊娠结局具有良好的预测价值和临床效用。结论:外周血miR-152、miR-210在PE患者中表达上调,且与病情程度、妊娠结局显著相关,其联合预测患者发生不良妊娠结局具有一定参考价值和临床效用。

超声造影定量参数联合外周血单个核细胞miR-34a、miR-146a对PTC诊断和淋巴结转移的评估价值

目的探讨超声造影定量参数联合外周血单个核细胞(PBMC)miR-34a、miR-146a对乳头状甲状腺癌(PTC)诊断和淋巴结转移的评估价值。方法选取104例PTC患者,根据病理诊断分为甲状腺癌组69例和良性组35例;根据是否发生淋巴结转移,将69例甲状腺癌患者分为未转移组33例和转移组36例。比较各组超声造影定量参数峰值强度(PI)、达峰时间(TTP)、平均通过时间(MTT)、曲线下面积(AUC)和PBMC中miR-34a、miR-146a水平。采用ROC分析超声造影参数联合P BMC miR-34a、miR-146a对PTC诊断和淋巴结转移的评估价值。结果与良性组比较,甲状腺癌组超声造影定量参数及P BMC miR-34a水平均降低(P<0.05),而miR-146a水平升高(P<0.05)。与未转移组比较,淋巴结转移组PI、AUC、miR-146a水平升高(P<0.05),而TTP、MTT、miR-34a水平降低(P<0.05)。超声造影定量参数与PBMC miR-34a、miR-146a对PTC诊断和淋巴结转移的AUC均高于各项指标单独检测值(P<0.05)。结论联合应用超声造影定量参数与PBMC miR-34a、miR-146a指标检测能增强PTC早期诊断与淋巴结转移的评估效能。

中国南方人群外周血microRNA-212表达与缺血性脑卒中的关联

目的探讨外周血miR-212表达水平与缺血性脑卒中风险的关联及其参与发病的潜在机制。方法选择44例缺血性脑卒中病例(病例组)及44例年龄、性别相匹配的对照人群(对照组),采用qRT-PCR检测外周全血miR-212的表达水平,非条件Logistic回归分析miRNA水平与缺血性脑卒中发生的关联,并通过生物信息学分析预测miR-212调控的下游信号通路。结果病例组外周血中miR-212表达水平显著高于对照组(P=0.012)。在校正年龄、性别等危险因素后,miR-212水平升高与缺血性脑卒中发病存在显著关联性[OR=1.62,95%CI为1.05~2.48,P=0.029]。miR-212表达水平与血小板数量呈负相关(r=-0.268,P=0.016)。生物信息学分析发现TGF-β、MAPK免疫炎症通路受到miR-212调控。结论外周血miR-212表达水平与缺血性脑卒中发生显著关联,其可能通过调控炎症参与发病。

活动期肺结核外周血mir-144的表达水平及意义

目的探讨活动期肺结核患者外周血mir-144表达水平及临床意义。方法选择2014年1月~2015年1月在笔者医院就诊的20例活动期肺结核患者及20例健康体检者作为研究对象,收集其静脉血,分别提取两组患者外周血单个核细胞中总RNA,采用实时荧光定量PCR比较其外周血mir-144的表达水平情况,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估mir-144的诊断效能。同时采用ELISA法测定两组研究对象血浆中的IL-6、TNF-α、IFN-γ的水平。进一步进行相关性分析评估外周血mir-144表达水平与IL-6、TNF-α、IFN-γ的相关性。结果活动期肺结核患者外周血中mir-144表达水平相比较健康对照组高,差异有统计学意义(P>0.05)。活动期肺结核患者外周血中IL-6、TNF-α、IFN-γ的水平比健康对照组要高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC下面积为0.885,当最佳筛查阳性界值(cut-off值)为0.955时,敏感度和特异性均为85%。活动期肺结核外周血中mir-144的表达水平与其血浆中的IL-6、TNF-α、IFN-γ的水平呈负相关,相关系数分别为-0.905、-0.910、-0.892。结论外周血单个核细胞中mir-144的表达水平可能作为活动期肺结核诊断的一个血清学指标,mir-144在结核杆菌感染后免疫反应中可能与外周血IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平有关。

鼻咽癌患者外周血中循环miR-31-5p表达及临床意义

目的探讨miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达及临床意义。方法应用荧光定量PCR检测55例鼻咽癌患者和55例健康人外周血miR-31-5p相对表达量,分析两者之间的表达差异,探讨其与鼻咽癌患者临床病理特征以及放疗的关系。结果 miR-31-5p在鼻咽癌患者外周血中的表达水平明显低于健康人(P <0.01);鼻咽癌患者外周血miR-31-5p的表达水平与肿瘤T分期、局部有无淋巴转移、临床分期相关,但与性别、年龄及是否发生远处转移不相关。同时,放疗抵抗组miR-31-5p表达水平较放疗敏感组下降(P <0.01)。结论 miR-31-5p的低表达与鼻咽癌的发展及放疗有关,它可能成为鼻咽癌新的肿瘤标志物和治疗靶点。

miR-205在ITP患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：研究micro-RNA（miR-205）在原发性免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia，ITP）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC）中的表达和意义。方法收集43例 ITP患者和38例健康人的外周静脉血2 ml，分离PBMC，提取细胞总 RNA，逆转录合成 cDNA，以 U6为内参，应用实时荧光定量 PCR（Real time PCR）的方法检测miR-205的表达量；分析miR-205与血小板计数结果之间的相关性。结果 ITP初诊患者（Naive ITP） PBMC miR-205的表达水平与健康对照组相比上调（1.81±0.48 vs 0.92±0.25，t＝10.31，P＜0.01）；治疗后不完全缓解组（incmplete remissiongroup，IR group）和初诊患者相比，miR-205的表达水平差异无统计学意义（P＝0.112），和正常对照组相比，则表达升高（1.63±0.65 vs 0.92±0.25，t＝7.2，P＜0.01）；14例治疗后完全缓解组（complete remission group，CR group）治疗后（After treatment）PBMC miR-205的表达低于治疗前（before treatment）的表达水平（1.07±0.43 vs 1.91±0.34，t＝5.68，P＜0.01）；ITP患者PBMC中miR-205的表达量与血小板计数呈负相关（r＝－0.0696，P＜0.05）。结论miR-205在 ITP初诊患者PBMC中高表达，而治疗完全缓解后表达水平又降低，并且表达水平与血小板数量呈负相关，表明其可能与 ITP的发生发展相关，或许会成为 ITP诊疗新的标志物。

过敏性紫癜患儿外周血miR-155表达及与Th17/Treg平衡的关系

目的探讨过敏性紫癜患儿外周血miR-155表达及与Th17/Treg平衡的关系。方法选取79例过敏性紫癜患儿为研究对象,60例健康体检儿童作为对照,采用qRT-PCR技术检测外周血miR-155、RORγt和Foxp3mRNA表达,流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例,酶联免疫吸附法检测细胞因子IL-6、IL-17、IL-22、IL-23、IL-10和TGF-β1表达,Pearson相关性分析miR-155与Th17和Treg细胞,RORγt和Foxp3mRNA,细胞因子IL-6、IL-17、IL-22、IL-23、IL-10和TGF-β1表达之间关系。结果与健康对照相比,过敏性紫癜患儿外周血miR-155、Th17细胞比例、转录因子RORγt、相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-22和IL-23均显著升高(P<0.05),Treg细胞比例、转录因子Foxp3、相关细胞因子IL-10和TGF-β1均显著降低(P<0.05)。miR-155与Th17细胞比例、RORγt、IL-6、IL-17、IL-22和IL-23均呈正相关(P<0.05),与Treg细胞比例、Foxp3、IL-10和TGF-β1均呈负相关(P<0.05)。结论过敏性紫癜患儿外周血miR-155高表达,Th17/Treg平衡失调,miR-155可能通过调节Th17/Treg平衡参与过敏性紫癜的疾病过程,是该疾病潜在的治疗靶点。

非小细胞肺癌患者外周血有核细胞miR-205-5p水平及其临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血有核细胞miR-205-5p的表达水平是否可作为分子标志物。方法:收集昆明医科大学第三附属医院2011年6月至2012年6月非小细胞肺癌首诊患者60例,其中无远处转移患者30例,有远处转移患者30例。另外收集健康志愿者30例作为对照组。qPCR技术检测人支气管上皮细胞BEAS-2B、云南个旧肺鳞癌细胞YTMLC-90、云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05以及人外周血有核细胞的表达水平。分析外周血有核细胞miR-205-5p的表达水平与非小细胞肺癌患者血清标志物水平、TNM分期、淋巴结转移、远处转移等临床病理参数的相关性。结果:miR-205-5p在BEAS-2B细胞中表达水平低(0.820 8±0.255 3),而在YTMLC-90(17.507 2±1.906 3)和XWLC-05(5.725 2±1.012 0)细胞中表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);miR-205-p在健康人外周血中的表达水平显著低于无转移的以及转移的非小细胞肺癌患者(1.073 0 vs3.658 8、19.6324,均P<0.01)。外周血有核细胞miR-205-5p的阳性表达率与非小细胞肺癌患者性别、年龄、淋巴结转移、病理类型和血清肿瘤标志物水平(CEA、CA125、CA242)无关(P>0.05),而与患者远处转移、TNM分期、血清肿瘤标志物CA153水平明显相关(P<0.01)。结论:miR-205-5p表达水平异常升高可能作为非小细胞肺癌患者转移相关的分子标志物。

妊娠期糖尿病妇女外周血miR-29、miR-375的表达及临床意义

目的：探讨广东省汉族妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）患者外周血miR-29、miR-375的表达情况及临床意义。方法：选取2012年12月~2013年5月在武警广东省总队医院就诊的90例GDM患者和糖耐量正常的孕妇,分别作为GDM组和对照组,检测血浆空腹胰岛素（fast insulin,FINS）及其外周血miR-29、miR-375的表达情况。结果：①GDM组及对照组的FINS分别为（15.67±5.75）mIU/L和（26.23±10.89）mIU/L（P〈0.01）;②GDM组外周血miR-29表达量（25.16±10.05）低于对照组（75.26±13.43）（P〈0.05）;③GDM组外周血miR-375的表达量（65.18±22.08）显著高于对照组（21.31±9.56）（P〈0.05）。结论：GDM患者中miR-29、miR-375的异常表达与GDM易感性有一定相关。

类风湿关节炎患者外周血miR-146a及miR-155的表达及临床意义

目的:探讨类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞中miR-146a及miR-155的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR法检测30例类风湿关节炎患者及30例健康者外周血淋巴细胞中miR-146a、miR-155的表达水平,并且与类风湿关节炎患者红细胞沉降率、C-反应蛋白、DAS28评分、免疫球蛋白M型类风湿因子进行相关性分析。结果:miR-146a及miR-155在类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞中的相对表达水平均高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。类风湿关节炎患者miR-146a、miR-155的表达水平与红细胞沉降率、C-反应蛋白、DAS28呈正相关(P<0.05),与免疫球蛋白M型类风湿因子无相关性(P>0.05)。结论:类风湿关节炎患者外周血miR-146a和miR-155表达上调,其表达水平与类风湿关节炎病情活动相关,提示miR-146a和miR-155可作为类风湿关节炎疾病活动的有效指标。

白癜风患者外周血中miR-155、miR-1238-3p、 miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p的 表达与病情进展的研究

目的本研究旨在探讨miR-155、miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p在白癜风患者外周血中的表达改变与病程发展的关系。方法本次研究选取2018年1月—2019年1月来我院治疗和检查的62例白癜风患者,平均年龄(23.25±2.11)岁,男30例(48.39%),女32例(51.61%),其中白癜风稳定期患者44例(71.77%),白癜风进展期患者18例(28.23%)。选取与白癜风组性别、年龄和体质量指数匹配的健康者作为对照组;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测受试者外周血中miR-155、miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p的表达量;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IFN-α和白细胞介素(IL)-1β蛋白水平含量;通过活性氧检测试剂盒和流式细胞仪检测受试者白癜风患者细胞内活性氧含量。结果随着白癜风病程发展,miR-155 mRNA和蛋白表达量逐渐增加,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p mRNA和蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。白癜风进展期miR-155 mRNA和蛋白表达量高于白癜风稳定期,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p mRNA和蛋白表达量低于白癜风稳定期(P<0.05);相较于健康对照组,白癜风稳定期和白癜风进展期均能使TNF-α、IFN-γ、IFN-α和IL-1β含量增加,白癜风进展期TNF-α、IFN-γ、IFN-α和IL-1β含量高于白癜风稳定期;相较于健康对照组(2.36±0.15),白癜风稳定期(3.85±0.47)和白癜风进展期(8.18±0.56)活性氧含量均增加,且进展期高于稳定期(P<0.05)。结论随着白癜风病程发展,外周血中miR-155表达量逐渐增加,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p表达量逐渐降低。

急性髓细胞白血病患者外周血单核细胞IL-9、STAT3和miR-21的表达及意义

目的探讨急性髓细胞白血病(Aml)患者外周血单核细胞(PBMCs)中白介素-9(IL-9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)和miR-21的表达及临床意义。方法选取2011年2月至2014年6月住院治疗的120例Aml患者为研究对象(Aml组),以同时期的健康体检者100例为对照组,采用RT-PCR检测所有受试者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA的表达水平,Western blot法检测IL-9和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白表达,Spearman分析IL-9、STAT3和miR-21表达之间相关性,ROC曲线分析IL-9、STAT3、miR-21及三者联合检测对Aml的诊断价值,Kaplan-Meier法分析IL-9、STAT3和miR-21表达对Aml患者生存期影响。结果与对照组相比,Aml组患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA表达水平均上调(P<0.05),IL-9和pSTAT3蛋白表达显著增加(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21mRNA水平与患者年龄、性别、血红蛋白均不相关(P>0.05),与FBA分型、白细胞计数和骨髓原始细胞相关(P<0.05),IL-9与血小板计数相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,IL-9与miR-21、IL-9与STAT3以及miR-21与STAT3表达均呈正相关(r=0.467,P<0.05;r=0.527,P<0.05;r=0.483,P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21三者联合诊断ALM的灵敏度、特异度以及ROC曲线下面积均较单独诊断时显著提高(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21高表达患者生存期均较低表达患者显著降低(P<0.05)。结论Aml患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21均表达升高,IL-9可能通过STAT3信号通路诱导miR-21表达上调参与Aml疾病的发生发展过程。

MiR-146a在寻常型银屑病患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义

目的:检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-146a的表达情况,并探讨其与寻常型银屑病发病的相关性。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测30例寻常型银屑病患者外周血PBMC中的miR-146a的相对表达量,与30例正常对照组进行比较并对其与寻常型银屑病患者PASI评分行相关性分析。结果:寻常型银屑病患者外周血PBMC中的miR-146a的表达明显高于正常对照组,进行期患者组明显高于静止期患者组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。寻常型银屑病患者外周血PBMC中miR-146a的表达与PASI评分呈正相关性(r=0.62,P<0.05)。结论:寻常型银屑病患者外周血PBMC中miR-146a异常高表达,并与寻常型银屑病的分期相关,提示miR-146a在寻常型银屑病的发病中起重要作用。

下调miR-217抑制类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞炎症反应的实验研究

目的:探讨下调miR-217表达对类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)炎症反应的影响及作用机制。方法:分离培养RA患者PBMC细胞,脂多糖(LPS)诱导PBMC细胞24 h,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达,qRT-PCR检测miR-217和Sirt1 mRNA表达,Western blot检测Sirt1蛋白表达。分别转染anti-miR-217和pcDNA3.1-Sirt1至PBMC细胞,构建miR-217低表达、Sirt1过表达的PBMC细胞,ELISA法检测PBMC细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的变化。双荧光素酶报告基因验证miR-217与Sirt1的关系。结果:LPS诱导PBMC细胞24 h后,TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,IL-10水平降低。miR-217在LPS诱导的PBMC细胞中表达上调,Sirt1 mRNA和蛋白表达下调。下调miR-217表达或上调Sirt1表达均可抑制PBMC细胞TNF-α、IL-1β和IL-6表达,促进IL-10表达。miR-217在PBMC细胞中负向调控Sirt1表达,上调miR-217表达抑制了Sirt1过表达对LPS诱导的PBMC细胞中炎症因子表达的影响。结论:下调miR-217可能通过负向调控Sirt1表达抑制RA患者PBMC细胞炎症反应,可作为治疗RA的新靶点。

miR-383增强SLE患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达

目的初步探讨microRNA-383（miR-383）对IL-2信号介导的系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Foxp3mRNA转录的影响。方法采用Westernblot方法检测14例SLE患者PBMCs中SOCS3蛋白表达水平，通过相关microRNA软件预测和Westernblot鉴定靶向SOCS3的microRNA，RT—PCR方法检测miR-383转染SLE患者的PBMCs中转录因子Foxp3mRNA的转录水平。结果Westernblot结果发现，SLE患者的PBMCs中SOCS3蛋白表达水平显著增加，miR-383抑制SOCS3蛋白表达。SLE患者PBMCs转染miR-383后Foxp3mRNA的转录水平显著增高。结论miR-383靶向抑制SOCS3，上调IL-2信号介导的SLE患者的PBMCs中Foxp3mRNA的转录水平。

miR-203在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中mi R-203的表达水平与疾病活动度、肾脏受累情况等临床表现之间的关系,初步探讨mi R-203在SLE中的临床意义。方法:收集31例SLE患者、16例健康志愿者外周血标本,根据肾脏受累分为狼疮肾炎21例和SLE无肾脏受累10例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quota polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中mi R-203表达,比较各组间mi R-203表达水平的差异,并分析其与SLE临床指标之间的关系。结果 :SLE患者mi R-203表达明显低于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);狼疮肾炎组患者mi R-203表达低于SLE无肾脏受累组和正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);SLE患者mi R-203表达水平与24 h尿蛋白、肾脏急性指数呈明显负相关(P<0.01)。结论:SLE患者PBMCs中mi R-203的表达水平降低,表明mi R-203在SLE发病机制中可能发挥一定作用;狼疮肾炎患者mi R-203的表达降低,提示mi R-203可能参与了狼疮肾炎的发病。

外周血单个核细胞miR-132对老年急性髓系白血病预后的预测价值

目的分析外周血单个核细胞miR-132对老年急性髓系白血病(AML)预后的预测价值。方法选择老年AML患者83例,选择同期行骨髓标本检验的非白血病老年人50例为对照组,检测并比较两组外周血单个核细胞miR-132表达。所有患者采用地西他滨+高山尖杉酯碱+阿糖胞苷化疗,对可能影响患者预后的各因素进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果AML组外周血单个核细胞miR-132相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。对可能影响患者预后的各因素进行单因素及多因素Logistic回归分析,结果显示,染色体核型、外周血单个核细胞miR-132相对表达量及首次治疗情况进行回归模型,为影响患者预后的独立危险因素。Kaplan-Meier生存曲线比较,miR-132低表达患者生存情况显著优于miR-132高表达患者(P<0.05)。根据患者随访情况,将随访总体生存时间(OS)超过12个月作为预后良好组,OS不足12个月作为预后不良组,预后良好组miR-132相对表达量显著低于预后不良组(P<0.05)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-132对患者预后的预测价值,曲线下面积为0.875。结论老年AML患者外周血单个核细胞miR-132表达异常升高,且miR-132表达与患者预后密切相关,可作为患者预后预测的潜在生物学指标之一。