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运用微电极技术测定三角帆蚌外套膜Ca^(2+)流量的研究 被引量:7
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作者 李文娟 施志仪 +3 位作者 郝莹莹 韩健 靳雨丽 叶显峰 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期545-549,共5页
Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分(CaCO3占95%以上),又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2+在外套膜中也保持一个较... Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分(CaCO3占95%以上),又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2+在外套膜中也保持一个较高的水平^[3]。研究贝类Ca代谢,特别是外套膜组织的Ca^2+跨膜转运,对进一步阐明贝壳以及珍珠形成机理,提高优质珠的产量都有着重要意义。 展开更多
关键词 三角帆蚌 外套膜细胞培养 选择性微电极 ca2+流量
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β_3-肾上腺素能受体对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca^(2+)浓度的调控及其转导途径 被引量:6
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作者 邓义军 伍卫 +2 位作者 方昶 黄至斌 王景峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1635-1637,1640,共4页
目的观察β3-肾上腺素能受体(β3-AR)对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控及其转导途径。方法通过结扎冠状动脉前降支制备大鼠实验性心力衰竭模型,经典酶分离法分离心肌细胞,Fluo-3/AM染色,激光共聚焦显微镜观察β3... 目的观察β3-肾上腺素能受体(β3-AR)对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控及其转导途径。方法通过结扎冠状动脉前降支制备大鼠实验性心力衰竭模型,经典酶分离法分离心肌细胞,Fluo-3/AM染色,激光共聚焦显微镜观察β3-AR兴奋剂BRL-37344以及合用PTX(Gi抑制剂)、L-NAME(NOS抑制剂)、Methylene blue(NO抑制剂)时对心室肌细胞内静息Ca2+浓度的影响及其转导途径。结果在心力衰竭和正常对照大鼠,β3-AR激动剂BRL37344(1μmol/L)分别使心室肌细胞内[Ca2+]i下调至用药前水平的59.4%、45.5%(P<0.05);在分别用L-NAME(10μmol/L)、Methylene blue(10μmol/L)、PTX(2μg/ml)阻断下,BRL37344(1μmol/L)使正常对照大鼠[Ca2+]i分别下降10.1%、16.9%、15.4%,而在心力衰竭大鼠[Ca2+]i分别下降16.9%、19.3%、11.7%。结论β3-AR激动剂可以使心室肌细胞内[Ca2+]i下调,心力衰竭心肌下调程度较轻,其作用是通过PTX-NOS-NO转导。 展开更多
关键词 Β3-肾上腺素能受体 心力衰竭 心室肌细胞 细胞内静息ca2+浓度
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哈巴苷对缺氧缺糖诱导下大鼠海马神经细胞游离Ca^(2+)浓度的影响 被引量:5
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作者 李官泽 徐慕蝶 +3 位作者 肖文喜 应夏丽 钟晓明 黄真 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期361-365,共5页
目的:研究哈巴苷对缺氧缺糖(OGD)诱导下海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响。方法:原代培养新生24 h内SD乳鼠海马神经细胞,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定并检测其纯度;哈巴苷(0.5、1、5、10、25、50、100、150、200... 目的:研究哈巴苷对缺氧缺糖(OGD)诱导下海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响。方法:原代培养新生24 h内SD乳鼠海马神经细胞,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定并检测其纯度;哈巴苷(0.5、1、5、10、25、50、100、150、200、250、500、1 000μmol/L)预处理48 h后,OGD 4 h,另设正常对照组及模型组,采用MTT法检测各组海马神经细胞活力,筛选哈巴苷有效浓度范围;将SD乳鼠海马神经细胞随机分为正常对照组、模型组、哈巴苷各剂量(50、75、100、125μmol/L)组,采用Fluo-3/AM负载的海马神经细胞,应用荧光倒置显微镜及荧光分光光度计观测哈巴苷各剂量对OGD海马神经细胞内游离Ca2+浓度的影响。结果:原代SD乳鼠海马神经细胞培养至第7天,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色鉴定为海马神经细胞,并检测其神经细胞纯度为85%~90%;MTT结果显示:与模型组比较,哈巴苷10、25、50、100μmol/L能显著增强海马神经细胞的活力(P<0.05或P<0.01),确定哈巴苷预处理48 h的有效浓度范围为10~100μmol/L;荧光倒置显微镜下观察,正常对照组海马神经细胞Ca2+荧光强度弱,模型组海马神经细胞Ca2+荧光强度强;与模型组比较,哈巴苷各剂量预处理48 h,均能降低OGD诱导的海马神经细胞Ca2+的荧光强度,其中75μmol/L组荧光强度降低最为明显。荧光分光光度法测定显示:与正常对照组比较,模型组海马神经细胞内游离Ca2+浓度显著升高(P<0.01);与模型组比较,哈巴苷75μmol/L能显著降低OGD诱导下海马神经细胞内游离Ca2+的浓度(P<0.05)。结论:哈巴苷预保护48 h能降低OGD诱导的海马神经细胞内游离Ca2+的浓度,以75μmol/L剂量效果最好,其保护作用与降低细胞内游离Ca2+浓度有关。 展开更多
关键词 哈巴苷 OGD 海马神经细胞 Fluo-3/AM负载 荧光分光光度法 ca2+浓度
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补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞内Ca^(2+)浓度影响的研究 被引量:7
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作者 曹勇 张丹 +1 位作者 郑广娟 张静 《四川中医》 北大核心 2003年第11期24-26,共3页
为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Ca2 +浓度的影响 ,选择人肺腺癌耐药株A5 49/DDP为模型 ,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法 ,并与正常动物含药血清为对照 ,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清与正常动物药物血清均能显著降低... 为了探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内Ca2 +浓度的影响 ,选择人肺腺癌耐药株A5 49/DDP为模型 ,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法 ,并与正常动物含药血清为对照 ,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清与正常动物药物血清均能显著降低肺癌A5 49/DDP耐药细胞内Ca2 +浓度 (P <0 0 0 1) ,但荷瘤动物药物血清降低作用显著高于正常动物药物血清 (P <0 0 5 )。表明补肾化瘀解毒方药物血清有阻止肺癌耐药细胞内Ca2 +的内流或释放作用 ,但荷瘤动物药物血清与正常动物药物血清具有差异性。 展开更多
关键词 补肾化瘀解毒方 肺癌 耐药细胞 ca2+浓度 血清药理学
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流式细胞仪实时监测细胞内Ca^(2+)浓度变化 被引量:5
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作者 曹云新 李豫容 杨安钢 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期4481-4483,共3页
背景:多种信号转导途径可影响细胞内Ca2+浓度的变化,因而对细胞内钙离子变化的检测,有助于了解细胞功能的启动、加强或抑制。目的:利用流式细胞术实时监测细胞内钙离子浓度的动态变化。方法:选取健康人新鲜全血,用淋巴细胞分离液分离淋... 背景:多种信号转导途径可影响细胞内Ca2+浓度的变化,因而对细胞内钙离子变化的检测,有助于了解细胞功能的启动、加强或抑制。目的:利用流式细胞术实时监测细胞内钙离子浓度的动态变化。方法:选取健康人新鲜全血,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,使用Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM负载淋巴细胞,加入CD3单克隆抗体和CD28单克隆抗体刺激淋巴细胞活化,以流式细胞仪动态监测活化淋巴细胞内Ca2+的浓度变化。结果与结论:T淋巴细胞在静息状态时,钙离子的荧光值平稳,显示为基线;加入抗CD3单克隆抗体和抗CD28单克隆抗体后,T淋巴细胞被活化,钙离子的浓度迅速升高,持续大约两三分钟后下降,逐渐趋向平缓。结果提示采用钙离子指示剂Fluo-3负载细胞与流式细胞术分析可以跟踪细胞内钙离子的动态变化,成为钙离子动态变化监测的有效方法。 展开更多
关键词 细胞ca2+ 浓度 流式细胞 实时监测 淋巴细胞
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钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞[Ca^(2+)]i浓度的影响 被引量:3
6
作者 张蕴慧 李运伦 《山东中医杂志》 2012年第2期130-131,149,共3页
目的:探讨钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度的抑制作用。方法:建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载模型,通过激光共聚焦显微镜技术观察钩藤碱和异钩藤碱对[Ca2+]i浓度的影响。结果:血管紧张... 目的:探讨钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞[Ca2+]i浓度的抑制作用。方法:建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载模型,通过激光共聚焦显微镜技术观察钩藤碱和异钩藤碱对[Ca2+]i浓度的影响。结果:血管紧张素Ⅱ显著刺激血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载,钩藤碱和异钩藤碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖[Ca2+]i浓度。结论:钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞[Ca2+]i超载有显著抑制作用。 展开更多
关键词 钩藤碱 异钩藤碱 血管平滑肌细胞(VSMC) [ca2+]i浓度 血管紧张素Ⅱ VSMC增殖和凋亡
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肉仔鸡肠道B淋巴细胞Ca^(2+)浓度流式细胞术测定方法的建立
7
作者 王益兵 姚军虎 +2 位作者 覃定奎 李朝云 杨小军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第3期13-16,共4页
【目的】建立以流式细胞术结合Fluo-3-AM测定肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的方法。【方法】分离培养21 d肉仔鸡肠道B淋巴细胞,以不同质量浓度(0,5,10,15,20μg/mL)脂多糖(LPS)刺激B淋巴细胞,测定B淋巴细胞刺激指数(SI),确定B淋巴细... 【目的】建立以流式细胞术结合Fluo-3-AM测定肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的方法。【方法】分离培养21 d肉仔鸡肠道B淋巴细胞,以不同质量浓度(0,5,10,15,20μg/mL)脂多糖(LPS)刺激B淋巴细胞,测定B淋巴细胞刺激指数(SI),确定B淋巴细胞增殖的最适LPS质量浓度,建立肉仔鸡B淋巴细胞体外增殖试验模型。以最佳质量浓度LPS刺激培养72 h的肉仔鸡肠道B淋巴细胞为研究对象,应用Fluo-3-AM作为钙指示剂,建立肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的流式细胞术测定方法,并用该测定方法探讨不同质量浓度(0,20,40,60,80μg/mL)二十碳五烯酸(EPA)对肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内的Ca2+浓度的影响。【结果】LPS的最佳质量浓度为10μg/mL。建立了以Fluo-3-AM为标记的肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度流式细胞仪测定方法。EPA可极显著降低B淋巴细胞胞内Ca2+浓度(P<0.01)。【结论】Fluo-3-AM结合流式细胞术可检测肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内的Ca2+浓度,且EPA极显著降低了B淋巴细胞胞内的Ca2+浓度。 展开更多
关键词 流式细胞 二十碳五烯酸(EPA) B淋巴细胞 ca2+浓度
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N-乙酰氨基葡萄糖激活Ca2+信号通路体外诱导小鼠T淋巴细胞增殖
8
作者 曹秀明 马娇 万晓峰 《中国药理通讯》 2009年第2期34-35,共2页
目的N-乙酰氨基葡萄糖(N—acetyl—D—glucosamine,NAc—Glu)是甲壳素的-种重要衍生物。其分子量小,水溶性好,有更独特的生理生化活性,近些年已经引起越来越多的关注。但关于NAc-Glu对T淋巴细胞增殖的影响,国内外罕见报道。本文... 目的N-乙酰氨基葡萄糖(N—acetyl—D—glucosamine,NAc—Glu)是甲壳素的-种重要衍生物。其分子量小,水溶性好,有更独特的生理生化活性,近些年已经引起越来越多的关注。但关于NAc-Glu对T淋巴细胞增殖的影响,国内外罕见报道。本文研究N_乙酰氨基葡萄糖体外作用于小鼠T淋巴细胞诱导淋巴细胞增殖。方法以T淋巴细胞为研究对象,应用MTT法,流式细胞术法考察了NAc—Glu对淋巴细胞的增殖的影响,采用Caz+探针(Fura-3/AM)、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测的方法从Ca2+信号通路入手对NAc—Glu诱导淋巴细胞增殖的机制进行了研究。结果NAc-Glu可以诱导淋巴细胞由G0/G进入S期,使细胞的有丝分裂启动,细胞发生增殖。NAc—Glu作用下的淋巴细胞胞内Ca2+的浓度显著增加,其中加药6h后淋巴细胞内的Ca2+浓度最高。24h后有所下降。Ca2+浓度的改变又影响了CaM和CaN这两种与C矿密切相关的蛋白的表达。 展开更多
关键词 N-乙酰氨基葡萄糖 T淋巴细胞增殖 ca2+信号通路 体外诱导 小鼠 ca2+浓度 激光共聚焦显微镜 流式细胞仪检测
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次乌头碱对心肌细胞内Ca2+及L-Ca通道mRNA表达的影响
9
作者 李志勇 孙建宁 《中国药理通讯》 2009年第2期46-46,共1页
目的:观察次乌头碱对SD乳鼠心肌细胞内Ca2+浓度及细胞膜L-Ca通道mRNA的影响。方法:原代培养SD乳鼠心肌细胞,给予不同浓度的次乌头碱,采用流式细胞技术分别检测给药后15min、30min、60min心肌细胞内钙浓度的变化,并分析次乌头碱对... 目的:观察次乌头碱对SD乳鼠心肌细胞内Ca2+浓度及细胞膜L-Ca通道mRNA的影响。方法:原代培养SD乳鼠心肌细胞,给予不同浓度的次乌头碱,采用流式细胞技术分别检测给药后15min、30min、60min心肌细胞内钙浓度的变化,并分析次乌头碱对心肌细胞内钙浓度的作用与L-Ca通道mRNA表达的相互关系。结果:30-120μM/L次乌头碱引起心肌细胞内游离Ca2+浓度升高,细胞“钙超载”出现在给药后15min(P〈0.01),且呈一定的剂量依赖性,但无明显的时间依赖性;60μM/L次乌头碱与心肌细胞作用5min即能增加L—Ca通道mRNA表达(P〈0.05),随着次乌头碱浓度的增加,L—Ca通道mRNA的表达也增多,但亦未表现出明显的时间依赖性。结论:次乌头碱为附子中的主要成分之一,其可能通过增加心肌细胞膜L-Ca通道开放数量而导致细胞内钙增加,发生钙超载,并最终导致心律失常的发生。 展开更多
关键词 胞内ca2+浓度 MRNA表达 心肌细胞 次乌头碱 ca通道 胞内游离ca2+浓度 细胞内钙浓度 时间依赖性
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抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度的影响
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作者 周慧 汪溪洁 +2 位作者 翁志洁 李建其 马璟 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期145-149,共5页
目的研究抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,初步探讨其神经毒性的机制。方法 接种PC12细胞于经胶原Ⅰ包被的培养皿,加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色后,用激光共聚焦显微镜分别记录①有钙外液中... 目的研究抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,初步探讨其神经毒性的机制。方法 接种PC12细胞于经胶原Ⅰ包被的培养皿,加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色后,用激光共聚焦显微镜分别记录①有钙外液中,10μmo.lL-1的SIPI-A,B,C和F对PC12细胞[Ca2+]i的影响;②有钙外液中,1,10和100μmol.L-1的SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响;③有钙外液中,硝苯地平10μmo.lL-1对10μmo.lL-1的SIPI-C或SIPI-F作用的影响;④无钙细胞外液中,10μmo.lL-1SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响。结果 有钙外液中,SIPI-A 10μmol.L-1给药后[Ca2+]i下降,10μmol.L-1的SIPI-B,SIPI-C和SIPI-F分别使[Ca2+]i增加27%(P<0.05),84%(P<0.05)和87%(P<0.01);SIPI-C和SIPI-F明显升高[Ca2+]i;同时给予SIPI-C 10μmol.L-1和硝苯地平10μmo.lL-1或SIPI-F 10μmo.l L-1和硝苯地平10μmo.lL-1,给药后荧光强度立即上升达到峰值,随后下降,[Ca2+]i分别增加24%和15%(P<0.05)。在无钙外液中,SIPI-C和SIPI-F 10μmo.lL-1分别使[Ca2+]i增加16%和18%(P<0.01)。结论 抗抑郁化合物SIPI-C和SIPI-F可以引起PC12细胞中[Ca2+]i显著增加,此影响可能与其神经毒性有关。 展开更多
关键词 细胞内游离钙离子浓度 PC12细胞 新化合物 抗抑郁 [ca2+]I Fluo-3 AM 激光共聚焦显微镜 硝苯地平
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维生素D_3对三角帆蚌外套膜细胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量:2
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作者 郝莹莹 施志仪 +1 位作者 李文娟 靳雨丽 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期98-103,共6页
采用胰酶消化法获得三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)外套膜细胞,用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)检测外套膜内外表皮细胞在静息状态下细胞的游离Ca2+浓度及不同浓度维生素D3(VD3... 采用胰酶消化法获得三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)外套膜细胞,用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)检测外套膜内外表皮细胞在静息状态下细胞的游离Ca2+浓度及不同浓度维生素D3(VD3)孵育后的外套膜细胞的Ca2+的动态情况。结果表明,未添加VD3(1.25 mmol/L Ca2+)时,外套膜外表皮细胞的Ca2+荧光强度显著高于内表皮细胞内的Ca2+(P<0.05)。在添加不同浓度VD3后,内表皮细胞与外表皮细胞内Ca2+浓度变化趋势一致,表现为细胞内Ca2+沉积量的变化是随着VD3浓度的增大而增大,其中,对照组与添加50 IU/L组差异不显著(P>0.05);当添加浓度为100 IU/L时,与对照组和50 IU/L组差异显著(P<0.05);当添加组浓度达到500IU/L时,与前3组有显著差异(P<0.05);当添加的浓度增大到1 000 IU/L后与500 IU/L组差异不显著(P>0.05),但与其他组均存在显著差异(P<0.05)。本实验为外套膜细胞的钙代谢机制研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 三角帆蚌 外套膜细胞ca2+浓度 维生素D3(VD3) 激光共聚焦扫描显微镜
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静磁场对大鼠面颌骨骼肌细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响 被引量:2
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作者 王丽艳 许艳华 林珠 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第9期847-849,共3页
目的:利用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)技术观察静磁场作用下骨骼肌细胞胞浆内Ca2+浓度的变化。方法:采用原代培养的大鼠面颌骨骼肌细胞,利用LCSM测定180、280、360mT磁场分别作用12、36、60h后,大鼠面颌骨骼肌细胞内游离Ca2+浓度的变化... 目的:利用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)技术观察静磁场作用下骨骼肌细胞胞浆内Ca2+浓度的变化。方法:采用原代培养的大鼠面颌骨骼肌细胞,利用LCSM测定180、280、360mT磁场分别作用12、36、60h后,大鼠面颌骨骼肌细胞内游离Ca2+浓度的变化。结果:12h组各磁场强度的骨骼肌细胞内游离Ca2+浓度无明显变化。36h组细胞内Ca2+浓度均有增加,且随着磁场强度的增加细胞内Ca2+浓度增加明显。60h组细胞内Ca2+浓度增加均非常明显,各磁场强度组相互之间无统计学意义。结论:静磁场促使大鼠面颌骨骼肌细胞胞浆内Ca2+浓度增加,与时间呈正相关关系。 展开更多
关键词 静磁场 大鼠面颌骨骼肌细胞 LCSM ca2+浓度
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环匹阿尼酸对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响 被引量:1
13
作者 彭公永 蒋永亮 +4 位作者 胡国平 周玉民 胡锦兴 赵祝香 邹威凤 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期3511-3514,共4页
目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl... 目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl)溶液及CPA对PVSMC的[Ca2+]i影响。结果原代培养的PVSMC表现出典型血管平滑肌细胞生长特征,并对平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应;高钾溶液使PVSMC的[Ca2+]i显著升高,5μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应;10μmol/LCPA能使含5μmol/L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA能使含5μmol/L硝苯地平的Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i迅速升高。结论 CPA能够使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与Ca2+从肌浆网释放,并诱发细胞外Ca2+通过钙池操纵性钙通道(SOCC)内流有关。 展开更多
关键词 环匹阿尼酸 细胞ca2+浓度 肺静脉平滑肌细胞 大鼠 钙池操纵性钙通道
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Cariporide对糖基化终末产物所致血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:1
14
作者 吴树金 刘立英 +4 位作者 周寿红 宋涛 陈庚容 黄宁江 唐蜜蜜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第9期677-680,共4页
目的观察cariporide对糖基化终末产物所致大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和平滑肌细胞共孵育24h,加入不同浓度的cariporide(0.1、1.0和10μmol/L... 目的观察cariporide对糖基化终末产物所致大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和平滑肌细胞共孵育24h,加入不同浓度的cariporide(0.1、1.0和10μmol/L)处理。用噻唑蓝比色法所测得的细胞吸光度值及考马斯亮蓝法测得的细胞总蛋白含量来反映细胞增殖情况,利用2,7-二羧乙基-5,6羧基荧光素及钙荧光探针通过荧光分光光度计分别检测细胞内的pH值及Ca2+浓度。结果糖基化终末产物(10mg/L)与平滑肌细胞共孵24h,与正常对照组比较,细胞吸光度值(0.554±0.032比0.155±0.018)和细胞内总蛋白浓度均显著增加(193.3±10.7μmol/L比127.8±8.2μmol/L,P<0.01);cariporide0.1、1.0和10μmol/L使细胞吸光度值从0.554±0.032分别降至0.402±0.028、0.298±0.020、0.174±0.019;细胞内总蛋白浓度也从(193.3±10.7)μmol/L分别降至(180.9±9.8)μmol/L,(156.4±9.4)μmol/L,(130.6±8.8)μmol/L,同时cariporide也明显降低了糖基化终末产物处理后的平滑肌细胞内pH值及Ca2+水平。结论外源性糖基化终末产物能显著刺激平滑肌细胞的增殖;cariporide对糖基化终末产物诱导的平滑肌细胞增殖具有显著抑制作用,其机制可能与cariporide抑制细胞内糖基化终末产物诱导的pH值及Ca2+水平升高有关。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 caRIPORIDE 糖基化终末产物 平滑肌细胞 PH值 细胞ca2+浓度
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急性缺氧对环匹阿尼酸诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度升高的影响
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作者 彭公永 胡国平 +3 位作者 赵祝香 胡锦兴 邹义敏 彭芳 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2015年第8期800-804,共5页
目的:研究急性缺氧对Ca2+-ATPase抑制剂——环匹阿尼酸(CPA)诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)内钙浓度([Ca2+]i)升高的影响及机制。方法:选用6只雄性SD大鼠(体重200~250 g),培养大鼠PVSMC,运用荧光显微镜和细胞内钙... 目的:研究急性缺氧对Ca2+-ATPase抑制剂——环匹阿尼酸(CPA)诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)内钙浓度([Ca2+]i)升高的影响及机制。方法:选用6只雄性SD大鼠(体重200~250 g),培养大鼠PVSMC,运用荧光显微镜和细胞内钙浓度检测系统观测CPA及急性缺氧(4%O2)对PVSMC的[Ca2+]i影响及钙池操纵性钙通道(SOCC)阻断剂氯化镍(Ni Cl2)和SKF96365的干预作用。结果:含5μmol/L硝苯地平(电压依赖钙通道阻断剂)的无钙Krebs溶液孵育PVSMC,10μmol/L CPA使PVSMC的[Ca2+]i小幅度升高,急性缺氧能使[Ca2+]i升高幅度增加;恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA使[Ca2+]i显著升高,急性缺氧可导致CPA诱导的[Ca2+]i升高显著增强;SOCC阻断剂Ni Cl2(500μmol/L)和SKF96365(50μmol/L)均能明显抑制急性缺氧条件下CPA诱导的[Ca2+]i升高,但对高钾(60 mmol/L KCl)Krebs溶液引起的[Ca2+]i反应无影响。结论:急性缺氧能够使CPA诱导的大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高增强,[Ca2+]i升高可被SOCC阻断剂阻断,提示急性缺氧能够增强SOCC活性,使细胞外Ca2+通过SOCC内流增强,从而导致大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高。 展开更多
关键词 急性缺氧 环匹阿尼酸 肺静脉平滑肌细胞 细胞ca2+浓度 钙池操纵性钙通道
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15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响
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作者 郭守利 张一飞 +1 位作者 刘晔 朱大岭 《实验动物科学》 2013年第5期28-32,共5页
目的探讨15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2+的作用及其来源。方法以酶法(胶原酶Ⅰ型和弹性酶)分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度(2×105个/mL),加样于6孔板中的盖玻片上,放入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,... 目的探讨15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2+的作用及其来源。方法以酶法(胶原酶Ⅰ型和弹性酶)分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度(2×105个/mL),加样于6孔板中的盖玻片上,放入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks液冲洗细胞3次,加入1×10-5mol/L的Flou-3/AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果 1)15-KETE(1×10-8—1×10-6)mol/L可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)增加;2)1×10-6mol/L维拉帕米(L-型钙离子通道阻断剂)和无钙离子细胞外液显著阻抑了1×10-6mol/L 15-KETE引起肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加。结论 15-KETE可引起大鼠肺动脉平滑肌[Ca2+]i增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子。 展开更多
关键词 15-酮基二十碳四烯酸 肺动脉平滑肌细胞 细胞ca2+浓度
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Wnt5a对HaCaT细胞的增殖、周期及血管内皮生长因子的影响 被引量:1
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作者 刘守刚 罗光浦 +4 位作者 曲永彬 黄莉宁 底大可 任盈盈 王天晶 《皮肤性病诊疗学杂志》 2016年第5期302-306,共5页
目的:以HaCaT细胞为细胞模型,探讨Wnt5a能否激活非经典Wnt5a/Ca^2+信号传导途径,并检测其对HaCaT细胞增殖、周期和对血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨Wnt5a在银屑病发病中的作用机制。方法:采用CCK-8检测不同浓度Wnt5a重组蛋白对HaCa... 目的:以HaCaT细胞为细胞模型,探讨Wnt5a能否激活非经典Wnt5a/Ca^2+信号传导途径,并检测其对HaCaT细胞增殖、周期和对血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨Wnt5a在银屑病发病中的作用机制。方法:采用CCK-8检测不同浓度Wnt5a重组蛋白对HaCaT细胞增殖的影响;利用流式细胞仪技术测定Wnt5a对HaCaT细胞周期和Ca^2+浓度的影响;不同浓度Wnt5a和Frizzled5分别刺激HaCaT细胞后,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测HaCaT细胞内VEGF在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果:5μg/mL、15μg/mL和25μg/mL的Wnt5a能够不同程度的提高HaCaT细胞的增殖能力,促进细胞周期从G1期向S期分化,其中15μg/mL和25μg/mL组与空白组相比具有明显差异(P<0.01)。同时,15μg/mL和25μg/mL的Wnt5a可增加HaCaT细胞内Ca^2+浓度(P<0.05)。RTPCR和Western blot结果显示,Wnt5a和Frizzled5能不同程度的促进VEGF的表达,其中Wnt5a的效果更显著(P<0.05)。结论:外源性Wnt5a能促进HaCaT细胞增殖和周期,并增加细胞内Ca^2+浓度,进而激活Wnt5a/Ca^2+非经典信号传导途径,从而促进VEGF的表达。 展开更多
关键词 WNT5A HAcaT细胞 ca2+浓度 VEGF
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人参炔醇对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制 被引量:6
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作者 蒋丽萍 聂宝明 +3 位作者 卢慧敏 干丽君 陈红专 陆阳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1313-1319,共7页
目的观察人参炔醇(panaxynol,PNN)对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制。方法由细胞计数、[3H]TdR参入试验确定细胞增殖率,采用分子探针Fura-3/AM及共聚焦显微镜检测胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i),RT-PCR方法观察线粒体转... 目的观察人参炔醇(panaxynol,PNN)对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用及机制。方法由细胞计数、[3H]TdR参入试验确定细胞增殖率,采用分子探针Fura-3/AM及共聚焦显微镜检测胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i),RT-PCR方法观察线粒体转录因子1(m tTF1)mRNA的表达。结果PNN以浓度依赖方式抑制血清及PDGF-BB诱导的RASMC增殖和DNA合成;9μmol.L-1PNN预处理RASMC能抑制PDGF-BB引起的[Ca2+]i升高;PDGF-BB上调RASMC m tTF1 mRNA表达,该作用可被3、9μmol.L-1的PNN抑制。结论PNN具有抗RASMC增殖作用,该作用与降低[Ca2+]i和抑制m tTF1 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 人参炔醇 大鼠主动脉平滑肌细胞 细胞增殖 PDGF-BB 胞内游离ca2+浓度 线粒体转录因子1
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纳秒级陡脉冲电场诱导人黑色素瘤细胞裸鼠皮下移植瘤凋亡作用及机制 被引量:7
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作者 杨方黎 唐均英 +2 位作者 米彦 姚陈果 王剑飞 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第13期1227-1230,共4页
目的:观察纳秒级陡脉冲对人黑色素瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的诱导凋亡作用和Caspase-3表达的影响.方法:取雌性4~6wk龄BALB/c裸鼠20只,建立人黑色素瘤皮下移植瘤模型,设对照组和纳秒级陡脉冲处理组,采用参数为300ns,20kV/cm,f=1Hz的脉冲电... 目的:观察纳秒级陡脉冲对人黑色素瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的诱导凋亡作用和Caspase-3表达的影响.方法:取雌性4~6wk龄BALB/c裸鼠20只,建立人黑色素瘤皮下移植瘤模型,设对照组和纳秒级陡脉冲处理组,采用参数为300ns,20kV/cm,f=1Hz的脉冲电场处理5min,每2d处理1次,共3次,分别观察纳秒级陡脉冲处理组和对照组各时间点瘤体体积大小变化,绘制抑瘤曲线;电镜观察肿瘤超微结构改变;采用免疫荧光检测Caspase-3蛋白表达;RT-PCR方法检测Caspase-3mRNA表达;荧光分光光度计测定Ca2+浓度.结果:纳秒级陡脉冲处理组裸鼠瘤体体积明显小于对照组(P<0.01);电镜下可见现典型的细胞凋亡改变;纳秒级陡脉冲处理组Caspase-3蛋白表达和Caspase-3 mRNA表达均较对照组明显增多;Ca2+浓度显著增加.结论:纳秒级陡脉冲电场能够诱导在体人黑色素异体移植瘤细胞产生凋亡. 展开更多
关键词 纳秒级陡脉冲 人黑色素瘤细胞A375 凋亡 caSPASE-3表达 ca2+浓度
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心肌细胞钙信号与心血管疾病研究进展 被引量:13
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作者 赵灿 吴永全 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期492-495,共4页
Ca2+作为一种最广泛而又最重要的细胞内第二信使参与了各种细胞的病理生理过程。在心肌细胞的收缩、舒张过程中,每一次的兴奋一收缩耦联都伴随着细胞内Ca2+浓度改变,这种浓度变化的时间及空间效应形成了心肌细胞内的钙信号。由于Ca... Ca2+作为一种最广泛而又最重要的细胞内第二信使参与了各种细胞的病理生理过程。在心肌细胞的收缩、舒张过程中,每一次的兴奋一收缩耦联都伴随着细胞内Ca2+浓度改变,这种浓度变化的时间及空间效应形成了心肌细胞内的钙信号。由于Ca2+在生物体内具有十分重要的地位及作用,钙信号的调节机制是非常复杂的,钙信号与心血管疾病密切相关。 展开更多
关键词 心肌细胞 心血管疾病 钙信号 病理生理过程 ca2+ 浓度改变 收缩耦联 第二信使
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