不同花纹文蛤(Meretrix meretrix)的外套膜蛋白质的双向电泳研究

采用双向电泳技术,对浙江乐清无花纹和有花纹文蛤外套膜的全蛋白进行了研究,并利用质谱和软件对差异蛋白进行了分析。经PDQuest软件分析,在pH4—7,分子量14.3—200kD之间,无花纹文蛤样品中检测到682±24个蛋白质点,有花纹样品检测到600±35个蛋白质点,平均匹配率为84.5%。研究结果显示,两种文蛤共有256个点存在差异表达,这些差异点可能与贝壳的颜色和花纹形成有关。其中98个点为无花纹文蛤特有,57个点为有花纹文蛤特有,另有101个点在表达量上存在两倍以上差异。在无花纹贝壳中发现分子量为42kD左右,等电点为6.4左右,与库蚊的肌动蛋白(分子量为41.7kD,等电点为5.3)匹配率较高;分子量为29kD,等电点为5.6,与飞鱿的肌动蛋白(分子量为29kD,等电点为5.25)匹配率较高的两个蛋白质。在有花纹文蛤中发现了分子量为27kD左右,等电点为4.8,与丽文蛤属的肌浆钙结合蛋白(分子量为20.8kD,等电点为4.98)匹配率较高。

几种淡水蚌外套膜蛋白质氨基酸组成及部分元素分析

测定了三角帆蚌、圆背角无齿蚌、褶纹冠蚌、背视丽蚌外套膜的粗蛋白含量 ,分析了外套膜干粉的氨基酸组成 ,并采用原子吸收光谱法和等离子吸收光谱法测定三角帆蚌、圆背角无齿蚌、褶纹冠蚌外套膜的 12种元素含量。结果表明 :干燥外套膜蛋白质含量为 :三角帆蚌 4 1 34% ,圆背角无齿蚌2 2 0 3% ,褶纹冠蚌 32 14 % ,背视丽蚌 7 78%。这四种淡水蚌外套膜均含有 17种氨基酸。被测的 12种元素中 ,Cu元素含量最高 ,其次是Fe ,Mn ,Mg ,Ca ,Zn ,Cr,而Ni,Co ,Pb ,Hg等元素含量较低。这四种淡水蚌外套膜是一类优质的动物蛋白质资源。

三角帆蚌肉和外套膜中可溶性蛋白的回收与性质比较

以采珠后的三角帆蚌肉和外套膜为原料,分别采用纯水和5%的NaCl溶液对其中的水溶性和盐溶性蛋白(合称为可溶性蛋白)进行提取,并对所获得蛋白质的一些性质进行比较研究。实验结果表明,运用1∶10(m/V)纯水提1h(沉淀再重复提取1次)和1∶10(m/V)5%NaCl提取24h所得的可溶性蛋白回收率均达到65%以上,SDS-PAGE电泳显示,三角帆蚌外套膜和蚌肉的水溶性蛋白较一致,而两者的盐溶性蛋白则不同,差异表现在:外套膜的盐溶性蛋白在82～97kD有4条带,而蚌肉的盐溶性蛋白质只在97kD处有一条带。氨基酸分析结果表明,所提取的可溶性蛋白必需氨基酸含量较高,均达46%以上,外套膜可溶性蛋白的呈味氨基酸(Glu和Asp)占氨基酸总量的28%以上,蚌肉的高达35%以上。