外排子抑制剂对变异链球菌致龋毒力因子的影响

目的研究外排子抑制剂(EPI)对变异链球菌(S.mutans)及其生物学特性的调控作用。方法通过溴化乙锭(Et Br)吸收和外排实验筛选变异链球菌EPI。检测变异链球菌外排子功能被抑制后,其药物敏感性、耐酸性、菌种间竞争能力和生物膜形成能力等生物学特性的改变。EPI筛选采用方差分析,生物学特性检测采用独立样本t检验进行比较,检验水准α=0.05。结果 128μg/ml利血平显著抑制变异链球菌的外排功能且不抑制其生长代谢,可作为变异链球菌的EPI。添加128μg/ml利血平后,洗必泰对变异链球菌的最小抑菌浓度(MIC)降低75%至0.25μg/ml;在pH=3的环境中35 min后无活菌生长,与对照组相比差异有统计学意义;对戈登链球菌的抑菌圈减小[(8.81±0.33)mm VS(14.25±0.51)mm,P<0.0001];代表12和24 h生物膜生物量的A575值分别从1.31±0.01降低63.92%至0.47±0.004(t=227.267,P<0.0001)和1.94±0.02降低73%至0.52±0.003(t=223.730,P<0.0001);12 h生物膜总菌量与对照组(73.39±2.56)μm^3/μm^2相比降低了24.73%,为(55.24±3.20)μm^3/μm^2(t=9.896,P<0.0001)。结论 EPI能显著提高变异链球菌对洗必泰的敏感性,降低其耐酸性、菌种间竞争和生物膜形成能力,提示外排子可作为潜在的防治龋病的新靶点,EPI有望成为临床龋病防治的一类新药物。