经头孢他啶诱导产生亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的耐药表型及其耐药机制研究

目的探讨经头孢他啶诱导产生亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌(Imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,IRPA)的耐药表型及其耐药机制,旨在为临床有效治疗铜绿假单胞菌感染提供理论依据。方法收集2016年7月-12月从临床送检标本中分离的抗菌药物全敏的铜绿假单胞菌PA株共计20株,以头孢他啶为诱导剂,诱导25代后,对诱导后产生亚胺培南耐药的菌株采用PCR方法进行金属β-内酰胺酶(MBLs)基因(IMP、VIM、SIM、GIM、SPM)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因(TEM、VEB、SHV、PER、OXA-2以及OXA-10),AmpC酶基因(PDC、DHA),整合酶基因(intIl、intI2和intI3)的基因检测,采用RT-PCR方法对膜孔蛋白OprD2的表达量及主动外排系统MexAB-OprM、MexXY-OprM的超表达和MexCD-OprJ、MexEF-OprN的表达进行检测,分析比较各耐药相关表型在其中的作用。结果经人工诱导25代后,获得10株对亚胺培南产生耐药的菌株,其中产TEM的IMP耐药PA(IRPA)有7株,占70%;产PDC的IRPA10株,占100%;产intIl的IRPA10株,占100%;OprD2的表达量降低的有8株,占80%,主动外排系统表型阳性IRPA 3株,占30%。结论经头孢他啶诱导的PA产生IMP耐药性涉及ESBLs,AmpC酶,整合子的存在,膜孔蛋白的缺失和主动外排系统激活等多种耐药机制。