AdeABC外排泵系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系

目的:探讨外排泵AdeABC系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系。方法:采用美罗培南多步法体外诱导敏感鲍曼不动杆菌获得对碳青霉烯类药物耐药的菌株;采用E-test法定量检测诱导前后菌株的敏感性;羰基氰化物间氯苯腙(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone,CCCP)抑制试验筛查外排泵;PCR及测序分析诱导前后AdeABC系统的调控基因adeS,adeR及主要碳青霉烯酶基因的变化;荧光定量PCR检测诱导前后adeA,adeB,adeR和adeS基因m RNA的表达量。结果:亲代敏感菌株S25595和S7257的美罗培南最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为0.38和0.25μg/m L,诱导后MIC均>32μg/m L;与亲代敏感株相比,诱导耐药株adeA,adeB,adeR和adeS基因的m RNA表达量上升2.45~9.44倍,但调控基因adeS和adeR没有基因突变或插入序列。结论:外排泵AdeABC系统高表达与鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药密切相关,其表达水平升高不是由调控基因adeS和adeR序列中基因突变或插入序列引起,可能存在其他机制。

鲍曼不动杆菌AdeABC外排泵与其对替加环素耐药的研究进展

随着耐替加环素鲍曼不动杆菌的出现,给临床抗感染治疗带来了极大的挑战。鲍曼不动杆菌对抗菌药物产生的耐药机制较为复杂,其中外排泵可减少菌体内药物的聚集并提高最低抑菌浓度,在鲍曼不动杆菌耐药中发挥着重要作用。AdeABC外排泵是鲍曼不动杆菌最主要的外排泵。本文旨在对鲍曼不动杆菌AdeABC外排泵的遗传结构、表达调控、介导替加环素耐药等方面的研究进展进行综述,以期为相关研究提供参考。

耐替加环素鲍曼不动杆菌中外排泵AdeB与Bfs过表达生物膜形成的关系

目的研究生物内被膜相关基因和向外排水泵基因之间在对耐替加环素鲍曼不动杆菌抗性上的相互作用。方法根据替加环素药敏敏感试验,将72株临床分离的鲍曼不动杆菌分为耐替加环素鲍曼不动杆菌组和替加环素敏感鲍曼不动杆菌组。采用结晶紫染色法观察两株菌的生物被膜形成情况。用RT-PCR方法分析生物被膜相关基因和外排泵基因。结果耐替加环素组生物被膜形成率为82.2%,替加环素敏感组生物被膜形成率为14.8%。转录水平上,耐药组生物被膜合成基因BfmS阳性率明显高于敏感组(P<0.01)。替加环素的最小抑菌浓度生物被膜组明显高于生物被膜缺失组(P<0.01)。外排泵AdeB基因在生物被膜形成组阳性率为95.2%,生物被膜缺失组为38.7%。结论BfS基因和AdeB外排泵基因的共表达可能与鲍曼不动杆菌生物被膜的形成有关。AdeB与BfS转录水平的提高促进了生物膜的形成,从而提高了鲍曼不动杆菌对替加环素的抗性。

类泛素-蛋白酶体系统和药物外排泵抑制剂对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性影响的研究

目的探讨类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的影响。方法采用刃天青显色法检测利福平对结核分枝杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),比较分析结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的过表达或缺失突变对结核分枝杆菌利福平MIC的差异;检测分别加入羰基氰氯苯腙、利血平、维拉帕米和氯丙嗪4种外排泵抑制剂前后各菌株对利福平MIC的影响。结果结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA和Mpa基因的过表达均能增强单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性,而Pup、Mpa、Dop和PafA基因的缺失均能显著降低单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性,P值均<0.05。4种药物外排泵抑制剂能不同程度的降低各过表达菌株对利福平的MIC,P值均<0.05,并且,类泛素-蛋白酶体系统与外排泵抑制剂之间存在一定交互作用。结论类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生有影响;类泛素-蛋白酶体系统可能通过调控外排相关通路蛋白来影响结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生。

外排AdeABC和AdeIJK系统与鲍曼不动杆菌耐药性的相关研究进展

鲍曼不动杆菌是医院感染及免疫缺陷者感染的重要致病菌之一。近年来,临床分离率逐年上升,耐药性日益严重,其耐药性与多种机制有关,其中主动外排AdeABC和AdeIJK系统的结构、功能及表达调节在多重耐药过程中起重要作用,也是研究的热点之一。

几种菌的外排泵系统及其抑制剂

由于多药耐药致病菌的出现,越来越多的抗菌药物对这些病原微生物无效。因此,当务之急就是要用创新的方法研发抗多药耐药致病菌的药物,以控制病原微生物的感染。目前,多药外排系统(MES)已成为抗菌药物发挥最佳疗效的一大障碍。因此,小分子外排系统阻滞剂的发现是当下较为热门以及广泛的研究领域,其中包括天然界来源的外排泵抑制剂的研究,天然的化学型外排泵抑制剂的研究方法以及数量正日益增长。本文对革兰阳性菌、革兰阴性菌、分枝杆菌以及真菌中的多药外排系统进行了介绍,为寻找潜在的外排泵抑制剂奠定基础。

介导鸭疫里默氏杆菌耐药的外排泵系统

21世纪以来,鸭浆膜炎已成为制约养鸭业发展的重要传染病之一。该病是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)引起的鸭、鹅、火鸡等禽类的一种高致病性、接触性传染病,患病鸭的死亡率可高达75%。目前,国际公认的R.anatipestifer血清型有21个,各血清型之间缺乏交叉保护,使得不同国家和地区、同一地区不同时期或同一养殖场可同时存在多种血清型或亚型的混合感染。

鲍曼不动杆菌耐药性与外排泵机制及群体信号系统基因检测分析

目的分析不同耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因及群体信号系统基因的分布,探讨不同耐药基因型鲍曼不动杆菌与抗菌药物耐药的特点。方法收集2018年1月至2021年7月皖南医学院第二附属医院130株鲍曼不动杆菌,按耐药性不同分为多重耐药菌31株、碳青霉烯类耐药菌43株和非多重耐药菌56株,分析各组鲍曼不动杆菌对抗生素的耐药性,采用PCR检测以上3组菌株外排泵基因ade B、ade J、abe S、abe M和群体信号系统基因Aba I、Aba R分布情况。结果多重耐药和碳青霉烯类耐药菌株对头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、哌拉西林/他唑巴坦耐药率均大于60%。130株鲍曼不动杆菌中,基因检测结果显示ade B、ade J、abe S、abe M、Aba I、Aba R检出率分别是43.85%、48.46%、46.15%、48.46%、46.15%、48.46%。其中非多重耐药菌株组携带外排泵基因及群体信号系统基因均低于其余两组,群体信号系统基因Aba I、Aba R在碳青霉烯类耐药组中检出率较多重耐药组增高,差异具有统计学意义(χ^(2)=6.049、6.188,P均<0.05)。结论临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性广泛,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药性与携带群体信号系统基因Aba I、Aba R密切相关。

鲍曼不动杆菌双组份系统调控AdeABC外排泵表达的研究

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)是一种革兰阴性菌(Gram negative bacterium),是引发院内感染的主要致病菌之一。AB耐药机制复杂,其中AdeABC外排泵是AB的主要耐药机制之一。双组份系统(two component system, TCS)是AB的信号转导系统,TCS AdeRS和TCS BaeSR可以调控AdeABC外排泵表达,有很大潜力成为AB的抗菌药物靶点。现就TCS对AdeABC外排泵的调控机制及TCS抑制剂的研究进展作一概述。

多重耐药鲍曼不动杆菌AdeABC外排泵的作用机制研究

目的探讨临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌AdeABC型主动外排系统在耐药性产生中的作用,为研制有效抗菌药物及指导临床合理用药提供科学依据。方法对临床分离的鲍曼不动杆菌进行耐药性检测后收集多重耐药菌株,监测AdeABC型主动外排系统的表达及使用泵抑制剂后的耐药情况。结果多重耐药鲍曼不动杆菌AdeABC外排系统表达增强,而使用泵抑制剂后其表达水平下降,耐药性降低。结论 AdeABC外排泵表达增强是鲍曼不动杆菌产生耐药性的重要机制。

外排泵系统与幽门螺杆菌抗生素耐药性的研究进展

抗生素在幽门螺杆菌中的耐药性越来越普遍,甚至出现了二重、三重、四重和五重耐药菌株,细菌可以通过多种方式适应抗生素施加的选择压力。外排泵的过表达有助于增加抗生素耐药性的产生,因此细菌可以在感染部位继续存在。除排出有毒物质外,外排泵还与持续形成和增加自发突变率有关,外排泵系统在幽门螺杆菌的耐药性中起着重要作用。本文就幽门螺杆菌的抗生素耐药性及其外排泵系统的研究进展作一综述,旨在为临床治疗耐药幽门螺杆菌感染提供一定思路。

主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

为检测和证实主动外排系统 (外输泵 )在细菌多重耐药机制中的作用 ,用四环素和水杨酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导 ,筛选出多重耐药株 ,再用能量抑制剂 CCCP(Carbongl cyanide m- chloropheyhydrazone)对耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果 :在耐药株 ,其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株 ;多重耐药株在有 CCCP存在时 ,菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增 ,而无 CCCP的抑制时 ,菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢 ;在质控株 ,不论有无 CCCP存在 ,菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势 ,且保持较耐药株明显高的水平。结论 :体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生 。

全耐药铜绿假单胞菌中多药外排泵mRNA表达的定量RT-PCR检测

目的分析4种重要的药物外排泵系统在临床分离的全耐药铜绿假单胞菌与全敏感铜绿假单胞菌中表达的差异。方法用SYBR G reenⅠ实时定量RT-PCR方法检测临床分离鉴定的全耐药和全敏感铜绿假单胞菌中4种外排泵M exAB-OprM、M exCD-OprJ、M exEF-OprN、M exXY-OprM的mRNA。结果全耐药菌株较全敏感菌株多药外排泵M exAB、M exXY、M exCD、M ex-EF的mRNA表达明显增高(P<0.01)。以敏感菌株拷贝平均数×4判定明显高表达,则全耐药菌M exAB高表达率为18.9%;M exXY高表达率为13.5%;M exCD高表达率为56.8%;M exEF高表达率为35.1%。37株全耐药菌有1种外排泵高表达的8株;2种外排泵高表达的10株;3种外排泵高表达的4株;4种外排泵同时高表达的2株,4种外排泵表达均未增高的有13株。结论药物外排泵系统在临床全耐药铜绿假单胞菌耐药机制中起着重要作用,研究结果提示可能还存在其他耐药机制或存在外排泵功能与其表达量存在差异的情况。

铜绿假单孢菌多药外排系统研究进展

铜绿假单孢菌是一种重要的院内感染条件致病菌 ,具有先天的和后天获得的多重高度耐药性 ,一旦感染 ,临床治疗十分困难。铜绿假单孢菌的耐药机理十分复杂 ,除常见耐药机制外 ,很重要的就是其拥有可以外排多种药物的主动外排系统 ,使抗菌药物很难发挥应有作用。本文将从近年铜绿假单孢菌中各类外排泵的研究情况 ,特别是其中最重要的外排系统“MexAB -OprM”的分子结构模型、膜定位、该基因的表达与调控等方面的研究进展做一综述。

淋病流行株外排系统与外膜通透性和多重耐药性的关系

探讨外排系统、外膜通透性与淋病流行株多重耐药性的关系。应用K-B法和琼脂稀释法从湛江地区分离出62株淋球菌多重耐药株。利用SDS-PAGE测定淋球菌外膜孔蛋白的表达;应用直接荧光法测定能量抑制剂加入前后淋球菌对抗生素的摄入和积累情况,比较耐药菌与敏感菌内膜泵蛋白表达的差异;利用煮沸法提取细菌DNA,PCR扩增mtrR基因,并对扩增产物测序,比较敏感株与多重耐药株的差异。结果5株多重耐药菌均有外膜孔蛋白表达的缺失或下降,同时伴有外排泵蛋白的表达;5株敏感淋球菌无mtrR的突变,10株多重耐药株均有mtrR基因的突变。表明外排系统、外膜通透性与淋病流行株的多重耐药性密切相关。

主动外排系统作为鲍曼不动杆菌耐环丙沙星重要机制的研究

目的探讨耐环丙沙星鲍曼不动杆菌的主动外排机制。方法试管稀释法检测56株临床鲍曼不动杆菌对环丙沙星的敏感性;用直接荧光法检测耐药株在有无外排泵抑制剂时鲍曼不动杆菌胞内药物聚集浓度;结合药敏和直接荧光法两项结果筛选出6株外排抑制剂存在时胞内药物聚集浓度明显升高的环丙沙星耐药株,对该耐药组及对照敏感组做胞内环丙沙星聚集浓度的线性测定;RT-PCR法检测两组菌株主动外排泵基因adeABC的表达水平;对adeABC自身启动子区域相关基因片段进行PCR扩增并测序。结果(1)56株鲍曼不动杆菌中,48株对环丙沙星耐药(M IC>4mg/l);0株对环丙沙星中介(1mg/l≤M IC≤4mg/l);8株对环丙沙星敏感(M IC<1mg/l)。(2)耐药组药物积累量不及敏感组,加入外排泵抑制剂叠氮化钠后积累量上升并接近敏感组。(3)耐药组主动外排基因adeB的表达水平(2.372±0.032)明显高于敏感组(1.654±0.040)(P<0.01)。(4)自身启动子区域相关基因片段没有发现突变。结论鲍曼不动杆菌对环丙沙星的耐药现象非常严峻;外排泵基因adeABC的过度表达是鲍曼不动杆菌对环丙沙星耐药的重要原因;adeABC基因自身启动子区域无导致adeABC过度表达的基因突变。

定量RT-PCR检测多药耐药铜绿假单胞菌中MexAB-OprM外排泵

铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）所涉及耐药机制相当复杂,包括抗生素灭活酶或修饰酶的生成、外膜低渗透性、外膜孔蛋白缺失、生物膜形成和主动外排等[1]。近年来的研究发现,铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）内存在着多种主动外排系统[2],MexAB-OprM是在PA中发现的第一个RND家族外排系统,在PA对多种β-内酰胺类抗生素（包括碳青霉烯类）的固有耐药机制中发挥重要作用,MexAB-OprM是迄今为止最具有临床意义的药物外排系统。

肠球菌的多重耐药外排泵研究进展

肠球菌是最常见的医院感染病原菌之一，近年来肠球菌的耐药性变得越来越严重，尤其表现为多重耐药性。在肠球菌中已经发现多种耐药基因，有些耐药基因能够编码多重耐药外排泵，介导肠球菌对多种药物的耐药，即多重耐药性。外排系统抑制剂能够抑制肠球菌对抗菌药物的泵出。因此，外排系统抑制剂的研究和开发将是一条解决多重耐药性的重要途径。

细菌多重耐药外排泵的研究进展

由于临床抗菌药物不合理使用等原因，细菌耐药问题日趋严重，给医院感染防控工作带来严峻考验，其中最为棘手的是多重耐药菌（MDRO），即机体对3类或3类以上抗菌药物同时耐药的细菌.导致细菌多重耐药机制主要包括产生灭活酶（如碳青霉烯酶）、药物作用靶位改变、外膜通透性改变、外排泵系统及生物膜形成等，其中细菌细胞膜表面的外排泵在介导细菌多重耐药中起重要作用。外排泵可将抗菌药物排至细菌外，从而阻碍抗菌药物与细菌内的靶点结合，

细菌外排泵介导耐药性研究进展

随着抗生素的广泛应用,临床上产生一些多重耐药菌株。多重耐药菌株的产生使常规抗生素在临床细菌性感染治疗中失效。细菌主动外排是耐药菌株产生多重耐药的主要机制之一;因此有关细菌主动外排泵的研究也是近年来细菌多重耐药机制研究中,相对较新和活跃的领域。本文结合当前主动外排泵研究的进展,对主动外排蛋白的分类、组成和主要的主动外排系统的基因表达调控以及耐药性情况进行综述。