用Bubble PCR法对一个新的锌指基因进行外显子划界

介绍了一种确定基因外显子一内含子交界点的快速、准确的方法，应用该方法对本室克隆的一个新的锌指基因ZNF191进行了外显子划界。将含有ZNF191全长CDNA的基因组DNA经限制酶酶切后与退火的Bubblelinker连接，以该连接产物为模板，用依据cDNA序列设计的引物和Bubblelinker上的特异引物进行PCR扩增，继以相同的扩增条件对扩增产物进行测序，从而确定了外显子－内含子的交界点。结果确认出ZNF191基因由4个外显子和3个内含子组成，这一结论为后来完成的ZNF191基因的全长测序结果所证实。