Fn14与JAK/STAT在非小细胞肺癌EGFR外显子19缺失突变组织中的表达

目的探讨成纤维细胞生长因子诱导14(Fn14)和Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号分子在非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR外显子19缺失突变(EGFR 19-Del)组织样本中的表达情况。方法经突变扩增阻滞系统法筛选出125例EGFR 19-Del的NSCLC组织并收集30例配对癌旁组织,应用免疫组织化学法检测该组织样本中Fn14、pJAK1和p-STAT1的表达,统计分析3种蛋白表达与临床病理特征的关系及三者之间的相关性。结果 Fn14阳性表达主要定位于细胞膜和胞质,p-JAK1、p-STAT1阳性表达主要定位于细胞质和胞核。EGFR 19-Del的NSCLC组织中Fn14、p-JAK1、pSTAT1的阳性表达率分别为100.0%(125/125)、83.2%(104/125)和100.0%(125/125),均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。三者在性别、年龄、吸烟史、病理类型方面的表达差异均无统计学差意义(P>0.05),在组织学分级、pT NM分期、淋巴结转移方面的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。Fn14与p-JAK1、p-STAT1在病理类型、组织学分级及pT NM分期方面表达均有很好的相关性(P<0.05,r>0.3)。结论 Fn14、p-JAK1、p-STAT1在EGFR 19-Del的NSCLC组织中呈高表达,表明Fn14、p-JAK1、p-STAT1很可能与EGFR 19-Del的NSCLC发生、发展有关;且Fn14可能促进p-JAK1、p-STAT1的表达,为进一步研究Fn14在EGFR 19-Del的NSCLC中的作用机制提供重要依据。

EGFR外显子19缺失突变促恶性甲状腺肿瘤侵袭迁移作用的研究

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)外显子19缺失突变(EGFR exon 19 deletion)在恶性甲状腺肿瘤中促侵袭转移的作用。方法划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;转录组测序分析(RNA-seq)检测HTFEC-ex19 del细胞株中调控肿瘤分子生物学的相关信号通路。结果分析发现4%(2/50)的甲状腺癌患者的基因组测序中具有EGFR突变。功能分析结果显示,EGFR外显子19缺失突变会使细胞具有迁移侵袭行为。RNA-seq分析结果显示,EGFR外显子19缺失突变后致癌基因KRAS通路、p53通路、EGFR下游相关信号通路PI3K-AKT、上皮间质转化(EMT)通路等显著富集。结论EGFR外显子19缺失突变可使细胞更具侵袭性,激活癌症相关通路,其中包括PI3K-AKT信号通路、EMT等通路。EGFR外显子19缺失突变可成为临床治疗甲状腺癌一个重要参考指标。

外显子19缺失和外显子21L858R突变的NSCLC患者埃克替尼治疗效果比较

目的比较埃克替尼治疗外显子19缺失和外显子21 L858R突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果。方法选择104例经证实为EGFR突变的NSCLC患者,其中外显子19缺失60例(A组)、外显子21 L858R突变44例(B组)。均接受埃克替尼治疗,比较两组有效率及无进展生存期。结果两组有效率和无进展生存期及不良反应发生率相比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论埃克替尼治疗外显子19缺失和外显子21 L858R突变的NSCLC患者临床效果相同。

EGFR外显子19缺失突变及其在恶性甲状腺癌发生发展中的作用

目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)外显子19缺失突变在恶性甲状腺癌发生发展中的作用及其分子调控机制.方法:构建稳定转染EGFR外显子19缺失突变的正常人甲状腺滤泡上皮细胞(human thyroid follicular epithelial cell,HTFEC)株;EGF处理,通过划痕、Transwell、软琼脂克隆集落形成实验、失巢凋亡实验检测细胞的恶性转化能力;转录组测序分析(RNA-Seq),比较空载对照HTFEC细胞株和具有EGFR外显子19缺失突变的细胞株中显著差异表达的基因.结果:对50例多种类型的(恶性)甲状腺癌患者的二代测序分析显示,2例患者(4%)具有EGFR突变,其中一例为EGFR外显子19缺失突变的甲状腺癌来源肺腺癌(滤泡型),且第一代EGFR抑制剂(Icotinib)治疗极大地延缓了其肿瘤进展.实验结果表明,EGFR外显子19缺失突变能以EGF依赖性的方式转化HTFEC,使其具有侵袭特性.RNA-Seq分析显示,EGFR外显子19缺失突变后,LAMC2、TRIB3等基因表达显著上调,CTSB、FASN等基因表达显著下调.结论:EGFR外显子19缺失突变通过上下调与甲状腺功能密切相关的基因表达,如LAMC2、CTSB等,使HTFEC发生恶性转化,从而在甲状腺癌发生发展中发挥重要作用.靶向EGFR外显子19缺失突变可成为临床治疗恶性甲状腺癌的有效选择.

血浆EGFR19外显子缺失突变高灵敏度检测技术的建立

目的探讨结合酶切及片段分析技术建立稳定的高灵敏度EGFR19外显子缺失突变检测技术检测血浆EGFR19外显子缺失突变的价值。方法设计针对野生型片段的限制性内切酶予以降低野生型DNA背景。通过野生型和突变型序列的分析,以野生型序列为酶切底物,选择工具内切酶Tru1Ⅰ,设计内外两个PCR反应引物,且内侧引物一端予以标记绿色荧光。采用PCR-酶切-PCR-片段分析步骤,优化各反应条件,得到稳定的技术。以野生型DNA稀释突变型DNA检测该方法的灵敏度。采用上述方法检测42例肺癌患者外周血浆中EGFR19外显子突变情况。结果采用野生型DNA稀释突变型DNA模拟检测本方法的灵敏度,能够检测出1∶1000(Mt∶Wt)突变型DNA。42例肺癌患者中5例血浆EGFR19外显子存在缺失,其中4例为15bp的缺失,1例为24bp的缺失。结论本研究建立了一种联合酶切与片段分析的高灵敏度血浆EGFR 19外显子缺失突变检测技术,能够有效从外周血中检测出EGFR19外显子缺失突变。

1例EGFR 19外显子缺失突变的晚期非小细胞肺癌的多线治疗过程

1例53岁女性因“胸闷、气短伴咳嗽1周,发现左肺占位4 d”入院,胸部计算机断层扫描(computed tomography,CT)检查提示左肺占位,患者经CT引导下左肺肿物穿刺,结合全身检查,明确诊断为晚期肺腺癌伴有EGFR 19外显子缺失突变(epidermal growth factor receptor 19 exon deletion),经多线化学药物治疗、多线靶向治疗及联合治疗,患者治疗过程中多次获得部分缓解(par t ial remission,PR),又多次进展,进展后多次以不同样本及不同方法行T790M基因检测,检测结果前后差异显著,最终患者被检测到T790M基因突变,获得了口服三代表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-KTI)的机会,获得了高质量的长生存期,三代EGFR-KTI耐药后的联合治疗也使患者的生存获益进一步增加。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况及其与患者临床病理特征、吉非替尼治疗后疗效相关性探讨

目的:探讨非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况及其与患者临床病理特征、吉非替尼治疗后疗效相关性。方法:选取2015年1月~2015年3月到某院接受治疗的60例患者作为研究对象,所有患者入院后经过各项详细检测以及组织病理学部门诊断确实为非小细胞肺癌。采用直接测序法检测60例患者的表皮生长因子受体基因19、21外显子突变情况。结果:男性和女性患者有统计学意义(P<0.05);腺癌与鳞癌两种突变率有统计学意义(P<0.05);吸烟患者和不吸烟患者两者突变率有统计学意义(P<0.05)。结论:EGFR基因突变状态与患者的性别、病理类型以及是否吸烟有关,EGFR基因突变状态到目前还不能作为化疗疗效以及远期生存的预测因子。

EGFR 19-del和L858R突变型NSCLC患者预后比较

目的比较表皮生长因子受体(EGFR)19外显子(19-del)突变和21外显子L858R点突变型非小细胞肺癌(NSCLC)患者的预后。方法收集257例NSCLC患者,取其新鲜组织或石蜡包埋组织,采用ARMS-PCR法检测EGFR基因型。收集临床资料,定期随访,以死亡为终点事件,失访或截止至末次随访时间尚未发生终点事件均纳入截尾数据,应用SPSS17.0软件进行统计分析。结果在257例患者中,19-del突变型134例,L858R突变型123例。两种类型突变患者的临床特征分布比较,P均>0.05。生存分析结果显示,19-del突变型中位生存期为798 d,L858R突变型中位生存期为710 d,两者的总生存期差异无统计学意义(P>0.05)。进一步对样本进行分层分析结果显示,在汉族患者中,19-del突变型患者预后比L858R突变型患者好(P=0.047),在壮族中未观察到差异有统计学意义(P>0.05)。在不同年龄、性别、TNM分期和临床分期上预后也没有统计学差异(P均>0.05)。结论EGFR 19-del突变和L858R突变型NSCLC患者总体上总生存期相似,但是在汉族中EGFR 19-del型突变患者预后较好。

两种方法治疗EGFR19del阳性肺腺癌患者的疗效和生存期比较

目的探讨对表皮生长因子受体基因19外显子突变(EGFR 19del阳性)肺腺癌患者采用化疗与表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)靶向治疗的临床效果及患者生存期的差异。方法回顾性分析安康市中医医院2016年1月至2017年1月收治的EGFR19del阳性肺腺癌患者86例,将这些患者按照治疗方法分为靶向组42例与化疗组44例。化疗组患者采用铂类联合第三代细胞毒性药物的双药联合化疗方案进行治疗,靶向组患者采用EGFR-TKIs进行靶向治疗,比较两组患者的临床疗效、生存率以及不良反应发生情况。结果化疗组患者部分缓解12例、稳定18例、进展14例,靶向组患者部分缓解25例、稳定15例、进展2例,化疗组与靶向组均无患者完全缓解,两组患者的客观缓解率分别为27.27%、59.52%(P<0.05),两组患者的疾病控制率分别为68.18%、95.24%(P<0.05)。靶向组患者1、2年生存率分别为76.19%、42.86%,明显优于化疗组患者的50.0%和25.0%(P<0.05)。在治疗期间,化疗组共有8例患者发生不良反应,而靶向组共有6例患者发生不良反应,不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于EGFR19del阳性肺腺癌患者,采用EGFR-TKIs靶向治疗对控制患者的癌症进展具有良好的效果,同时有助于延长患者的生存期,且不增加治疗过程中的不良反应。

分子模拟方法验证肺癌分子靶标外显子缺失对吉非替尼用药效果的影响

利用同源建模,构造出EGFR的第19位外显子缺失后的蛋白结构model。然后使用Arguslab软件,计算出吉非替尼、ATP分别与野生型蛋白2GS6和突变蛋白model结合所需要的能量,试图用理论计算的方式对吉非替尼的用药效果改善作出解释,下面将总结研究过程和结果。

凋亡相关蛋白激酶样蛋白1低甲基化对表皮生长因子受体19外显子缺失突变型肺癌患者预后的影响

目的探讨凋亡相关蛋白激酶样蛋白1(DAPL1)低甲基化对表皮生长因子受体19外显子(EGFR Del19)缺失突变型肺癌患者预后的影响。方法收集基因组数据共享(GDC)TCGA肺腺癌、TCGA肺腺癌、TCGA肺癌数据库中肺癌患者的临床病理资料,分析DAPL1甲基化水平对EGFR Del19缺失突变患者预后的影响。相关性分析采用线性回归模型,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,两组间生存曲线的差异采用Log rank检验。结果GDC TCGA肺腺癌、TCGA肺腺癌和TCGA肺癌数据库中,DAPL1高表达肺癌患者的5年生存率(分别为31.9%、27.5%和33.0%)高于DAPL1低表达者(分别为11.0%、11.6%和13.8%),差异均有统计学意义(P值分别为0.006、0.028和0.025);EGFR Del19缺失突变亚型肺癌患者的DAPL1中位表达水平(分别为12.8、2.75和2.9)高于EGFR其他亚型突变者(分别为11.6、1.75和1.8,均P<0.05)。TCGA肺腺癌和TCGA肺癌数据库中,DAPL1甲基化水平较低的肺癌患者5年生存率(分别为22.4%和16.4%)高于DAPL1甲基化水平较高的肺癌患者(分别为15.1%和14.2%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。DAPL1表达水平与EGFR突变亚型呈正相关(r=0.909,P<0.05),与DNA甲基化呈负相关(r=-0.891,P<0.05)。肺癌患者DAPL1的表达受DNA甲基化调控,进而影响肺癌患者的预后。结论DAPL1的高表达或低甲基化与肺癌EGFR Del19缺失突变亚型有关,DAPL1低甲基化肺癌患者的总生存时间更长。

非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体基因第19外显子突变研究

目的研究非小细胞肺癌的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因第19外显子突变情况。方法提取72例手术切除肺癌基因组DNA，用巢式PCR扩增EGFR基因第19外显子并测序，分析EGFR基因第19外显子突变及其与临床特征的相关性。结果检测到13例肿瘤组织存在EGFR基因第19外显子多核苷酸的缺失突变，共有4种突变类型，突变率为18．1％，所检测的突变均为杂合型；EGFR基因第19外显子突变与肺腺癌、女性患者与不吸烟者相关。结论EGFR基因第19外显子存在多核苷酸的框架缺失突变，以女性、腺癌和不吸烟患者为主。

一个Ⅰ型神经纤维瘤家族NF1基因18和19外显子的检测

目的检测郴州市一个Ⅰ型神经纤维瘤家族NF1基因的18～19外显子区段是否发生突变。方法应用PCR技术扩增NF1基因18～19外显子区段,并对PCR产物进行测序。结果该家系的IV1患者的18外显子的一对碱基发生置换(错义突变),II2患者的18～19外显子之间的内含子一对碱基发生置换,但家系中另两名患者和正常成员18～19外显子区段序列均正常。结论 NF1具多突变性。两处碱基置换可能与II2和IV1患神经纤维瘤发生有关,但不是该家族引起神经纤维瘤的共享突变位点。

埃克替尼治疗EGFR不同突变类型晚期肺腺癌的疗效分析

目的:回顾分析埃克替尼一线治疗EGFR不同突变类型肺腺癌患者的疗效是否存在差异。方法:收集福州肺科医院2016年01月至2017年12月确诊EGFR突变肺腺癌患者79例,EGFR 19外显子缺失33例,21外显子突变46例,均予口服“埃克替尼125 mg tid”治疗,进行生存期随访;应用χ^(2)检验比较临床特征及临床疗效,应用Kaplan-Meier及Log-Rank法比较生存曲线。结果:19外显子组和21外显子组患者在性别、年龄、吸烟、脑转移、TNM分期、病理分化临床特征无差异(P>0.05);19外显子组和21外显子组ORR(75.8%vs 71.7%)和DCR(97%vs 93.5%)无统计差异(P>0.05);EGFR 19外显子组和21外显子组中位PFS(14.5个月vs 11个月)差异有统计学意义(χ^(2)=4.112,P=0.043);二者中位OS(26个月vs 17个月)差异有统计学意义(χ^(2)=6.650,P=0.010)。结论:晚期肺腺癌EGFR 19外显子缺失较21外显子突变相比EGFR-TKI靶向治疗具有生存获益优势。

一代EGFR-TKIs联合化疗对两种EGFR经典突变非小细胞肺癌的疗效比较

目的比较一代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)联合化疗对两种表皮生长因子受体(EGFR)经典突变非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效。方法选取2017年4月至2019年12月郑州大学第一附属医院肿瘤科收治的34例EGFR经典突变的晚期NSCLC患者。患者均接受一代EGFR-TKIs联合化疗治疗。按基因突变种类将患者分为两组,即EGFR基因19外显子缺失突变(19Del突变)为A组(18例),EGFR基因21外显子L858R点突变(21L858R突变)为B组(16例)。研究的主要终点为中位无进展生存时间(PFS)和1 a PFS率,次要终点为客观缓解率(ORR)。比较两组不良反应。结果治疗后,B组ORR[25.0%(4/16)]较A组[88.9%(16/18)]低(P<0.05)。B组1 a PFS率[25.0%(4/16)]与A组[44.4%(8/18)]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。B组中位PFS短于A组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论接受一代EGFR-TKIs联合化疗治疗的EGFR基因19Del突变的NSCLC患者较EGFR基因21L858R突变患者的PFS更长。

19-del和21-L858R突变非小细胞肺癌患者临床特点和疗效的差异

人表皮生长因子受体（ epidermal growth factor re-ceptor ,EGFR）突变仅见于肿瘤组织,尤其是非小细胞肺癌[1,2]. 19-del 和21 -L858R突变是EGFR最常见突变类型,约占非小细胞肺癌中所有EGFR突变类型的85％. 随着表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（ EGFR-tyrosine kinase inhibitors , EGFR-TKIs ）在敏感突变的非小细胞肺癌（ non-small cell lung canc-er,NSCLC）患者中的广泛应用,有学者发现19 -del和21-L858 R突变肺癌患者临床特点及治疗效果不尽相同[3] ,这两种不同的突变有其各自的特性,需要区别对待.

埃克替尼治疗不同外显子突变非小细胞肺癌的效果

目的探讨埃克替尼对不同外显子突变非小细胞肺癌（NSCLC）患者的治疗效果。方法选取2015年1月至2016年12月运城市中心医院呼吸内科收治的80例晚期NSCLC患者，根据表皮生长因子受体（EGFR）突变方式的不同分为缺失突变组与突变组，缺失突变组为19外显子缺失突变，突变组为21外显子突变，每组40例。两组患者均给予埃克替尼口服治疗，比较两组患者治疗的效果，治疗前及治疗后1个月血清VEGF的表达情况，相关免疫功能指标的变化情况及预后情况。结果缺失突变组近期有效率（70.0%）显著高于突变组（40.0%），差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗前两组患者的血清VEGF表达水平比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；治疗后1个月，缺失突变组血清VEGF表达水平[（102.2±13.5）ng/L]低于突变组[（125.8±15.3）ng/L]，差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗前两组患者CD3＋/CD4＋和CD4＋/CD8＋表达水平比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；治疗后1个月，缺失突变组CD3＋/CD4＋（36.2±4.5）、CD4＋/CD8＋（1.4±0.5）表达水平高于突变组（33.8±4.3）、（1.2±0.3），差异有统计学意义（P〈0.05）。缺失突变组中位无进展生存期（12.4个月）与突变组（10.1个月）比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。结论埃克替尼对EGFR 19外显子缺失突变晚期NSCLC患者的治疗效果优于21外显子突变患者，同时可提高患者免疫力，值得在临床上推广应用。

非小细胞肺癌细胞学标本EGFR检测的研究进展

非小细胞肺癌治疗手段以手术、化疗、放疗和靶向治疗为主。随着靶向治疗研究的进展，发现表皮生长因子受体（EGFR）突变患者接受小分子酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗效果佳。进行这类药物治疗前的筛选是个体化治疗的前提，目前以组织标本基因检测为金标准。但是进展期患者的病理诊断很多时候是根据细胞学标本，部分细胞学标本是惟一的标本来源。近年来肺癌细胞学标本行EGFR检测已经成为一种趋势，主要细胞学标本类型包括外周血、胸腔积液及细针穿刺标本。本文旨在对目前使用细胞学标本评价非小细胞肺癌EGFR基因状态方面做一个概述。

国产吉非替尼与原研药一线治疗EGFR阳性晚期NSCLC对比研究

目的一代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)吉非替尼是表皮生长因子受体EGFR敏感基因突变晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的一线治疗药物。本研究对比分析国产吉非替尼与原研药一线治疗EGFR敏感突变[19外显子Del和21(L858R)点突变]的临床疗效及安全性,探讨国产吉非替尼与原研药疗效的一致性。方法选取2017-03-01-2019-01-31淮北市人民医院收治的经病理学确诊的晚期EGFR突变的NSCLC患者70例,采用随机数字表法随机分为国产吉非替尼组35例和原研药组35例,4周为1个周期,每2个周期评价疗效。观察2组的有效率(response rate,RR)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、无进展生存期(progression-free survival,PFS)、毒副作用及预后等。采用SPSS 19.0对数据进行统计分析。结果国产吉非替尼组RR为65.7%,原研药组为71.4%,χ~2=0.265,P=0.607。DCR国产吉非替尼组为82.9%,原研药组为91.4%,χ~2=1.148,P=0.284。中位PFS国产吉非替尼组为9.1个月,原研药组为9.5个月,χ~2=0.021,P=0.884。RR国产吉非替尼组19外显子Del的为78.3%,原研药组为83.3%,χ~2=0.005,P=0.943。DCR国产吉非替尼组19外显子Del的为91.3%,原研药组为95.8%,χ~2=0.001,P=0.970。RR国产吉非替尼组21(L858R)点突变的为41.7%,原研药组为45.5%,χ~2=0.034,P=0.885;DCR国产吉非替尼组21(L858R)点突变的为66.7%,原研药组为81.8%,差异无统计学意义,χ~2=0.683,P=0.408。2组患者中19外显子Del的RR为80.9%,21(L858R)点突变的为43.5%,χ~2=10.009,P=0.002;19外显子Del的DCR为93.6%,21(L858R)点突变的为73.9%,χ~2=5.351,P=0.021。2组患者中19外显子Del的中位PFS为11.7个月,21(L858R)点突变的为8.6个月,差异有统计学意义,χ~2=10.798,P=0.001。2组主要的毒副作用是腹泻和皮疹,多为Ⅰ~Ⅱ度,差异无统计学意义,P>0.05。结论国产吉非替尼与原研药治疗EGFR敏感突变的晚期NSCLC疗效及不良反应相当,19外显子Del的患者较21(L858R)点突变的患者疗效更佳。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体双向基因测序研究

目的探讨中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(EGFR)第18、19、21外显子基因突变状态。方法32例病理证实的非小细胞肺癌组织标本,通过模板DNA提取、定量和Touchdown PCR扩增EGFR exon 18、19、21序列,进行正、负链基因测序分析,并与10例非小细胞肺癌患者血液标本对照。结果32例非小细胞肺癌组织发现7例共9种突变,即已报道的5例19外显子缺失和未见报道的21exon T>G(L833V)及A>T(H835L)杂合性突变,另有2例内含子多态改变。中国人非小细胞肺癌突变率为28．1％(9／32),肺腺癌突变率为31．6％(6／19)。结论中国人非小细胞肺癌的EGFR突变率与已报道的亚洲人女性肺腺癌的突变率相似,但存在中国人自身新的突变位点(L833V和H835L)及内含子改变,该突变率与国内易瑞沙治疗非小细胞肺癌有效率基本吻合。